 |
  |
|||
 |
 |
|||
|---|---|---|---|---|
|
Выявление персистентно инфицированных вирусом ИРТ КРС животных при ввозе крупного рогатого скота из-за рубежаУДК: 619.616.9:036.3 Пчельников А. В., Коба И. С. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение Одной из особенностей возбудителя инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота (далее, ИРТ КРС) является его способность встраиваться в геном инфицированной клетки хозяина в периферической нервной системе и, таким образом, длительно сохраняться в организме животного будучи недоступным для иммунной системы. Такое состояние вируса называется персистенцией [2, 3, 4]. Персистентная инфекция может возникнуть после первичного контакта животного с возбудителем болезни, но чаще формируется после клинического переболевания в период реконвалесценции [8]. При снижении резистентности или возникновении иммунодефицитного состояния животного возможна реактивация персистирующего вируса, сопровождающаяся явной (с проявлением клинических признаков) или латентной (без проявления клинических признаков) формой инфекции и выделением возбудителя во внешнюю среду [3, 4]. Реактивация персистирующего вируса может быть спровоцирована разными факторами, приводящими к возникновению иммунодефицитов, в том числе: стрессы («травматический», «транспортный», «алиментарный», «технологический» и стресс при отеле), инфицирование возбудителями парагриппа-3, вирусной диареи, лейкоза, респираторно-синцитиальной инфекции, коронавирусной дизентерии, герпесвирусной инфекции 4-го типа; бесконтрольное применение антибиотиков и сульфаниламидов в больших дозах; микотоксикозы [13, 14, 15]. Основной мерой специфической профилактики ИРТ КРС в мире и в России является вакцинация. Но правильно и своевременно проведенная вакцинация также не предотвращает персистенцию, в случае инфицирования вакцинированных животных полевыми вариантами вируса [7, 9]. По данным литературы наиболее опасными источниками возбудителя инфекции при ИРТ КРС считаются племенные быки-доноры спермы, инфицированные возбудителем этой болезни [6]. А.Ф. Шуляк указывает, что персистентно-инфицированные быки-производители, вакцинированные против ИРТ КРС, чаще выделяют вирус со спермой по сравнению с не вакцинированными. Таким образом вакцинация племенных быков против ИРТ КРС, без использования DIVA-стратегии, только маскирует вирусоносителей, снижая возможность выявления таких животных серологическими методами исследования [5, 10]. В соответствии с последним абзацем главы 1 Ветеринарных требований при ввозе на таможенную территорию Евразийского экономического союза и (или) перемещения между государствами-членами племенного и пользовательского крупного рогатого скота: «В отношении племенных животных дополнительно проводятся исследования на инфекционный ринотрахеит и вирусную диарею крупного рогатого скота (если животные не были предварительно вакцинированы)» [1]. Учитывая свойство возбудителя ИРТ КРС персистировать в организме восприимчивых животных, с учетом того, что вакцинация не предотвращает персистенцию вируса, была сформулирована цель настоящего исследования - проанализировать возможности заноса возбудителя ИРТ КРС из-за рубежа при ввозе племенных животных с разными статусами вакцинации против ИРТ КРС. Материалы и методы исследований. Для изучения вероятности заноса эпизоотических штаммов вируса ИРТ с экспортируемым в Россию крупным рогатым скотом случайным образом были выбраны две партии животных с разным статусом вакцинации против ИРТ КРС. Первая партия животных, в количестве 9 голов, ввезена из Нидерландов. Животные против ИРТ КРС на территории страны-импортера не вакцинировались. Вторая партия животных, в количестве 80 голов, ввезена из Дании. Животные за месяц до ввоза на территорию России (в стране-импортере) были вакцинированы против ИРТ КРС вакциной Biobos IBR Marker (2 мл/гол.). Указанная вакцина содержит в своем составе аттенуированный штамм вируса ИРТ КРС, маркированный путем делеции гена гликопротеина Е. Отбор проб. Пробы крови для получения сыворотки отбирались у животных обеих партий ветеринарными врачами государственной ветеринарной службы в период профилактического 21 дневного карантина. У животных 1 партии взятие крови проводилось двукратно на 3 и 20 дни карантина. У животных 2 партии -однократно на 20 день карантина. Серологические исследования проводили тремя методами: реакция нейтрализации (далее, РН), реакция торможения гемагглютинации (далее, РТГА) и иммуноферментный анализ (далее, ИФА). РН с постоянной дозой вируса проводили микрометодом, используя полистероловые 96-луночные культуральные планшеты. Каждую пробу сыворотки исследовали в 4 повторах. Окончательный титр рассчитывался по методу Кербера. РТГА проводили микрометодом используя полистероловые 96-луночные планшеты с использованием 1% суспензии эритроцитов морской свинки. Каждую пробу сыворотки исследовали в 4 повторах. Результат учитывали визуально в крестах. Окончательный титр рассчитывался по методу Кербера. ИФА проводился в ФГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория» с использованием диагностического набора ID Screen IBR gE Competition (ID.vet, Франция), предназначенного для обнаружения антител к гликопротеину gE eupycf BoHV-1 в сыворотке или плазме крови крупного рогатого скота. Статистическая обработка результатов проводилась в программе Microsoft Excel 2017. Результаты исследований и их обсуждение. Исследования сыворотки крови, полученной от 9 племенных быков-производителей, ввезенных из Голландии, двумя серологическими методами (РН и РТГА) позволили детектировать антитела к возбудителю ИРТ КРС у трех животных (табл. 1). Таблица 1 Результаты параллельных серологических исследований животных первой партии
Примечание: * - p < 0,05 Результаты серологических исследований парных проб сыворотки, отобранных от животных второй партии (в РН с постоянной дозой вируса), позволили установить прирост титра антител во вторых пробах сыворотки, который может быть связан с недавней вакцинацией (вакцинация животных проводилась за месяц до ввоза на территорию России). Дополнительными серологическими исследованиями с использованием DIVA-стратегии, проведенными в ГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория», антитела к gE не были детектированны ни у одного животного. Таким образом можно утверждать о стопроцентном поствакцинальном происхождении антител у всех животных исследованной партии. Для оценки официального статуса Голландии и Дании по ИРТ КРС сделали выгрузку отчетной информации с информационного портала WAHIS, размещенного на официальном сайте ВОЗЖ за 11 лет 2012-2023 гг. В течение всего указанного периода времени Дания официально благополучна по ИРТ КРС, в то время как Голландия ежегодно представляла в ВОЗЖ информацию о неблагополучии по этой болезни на всей территории страны [16]. Животные, ввезенные из Голландии (9 голов племенных быков-производителей), не были вакцинированы против ИРТ КРС. В соответствии с последним абзацем главы 1 Ветеринарных требований при ввозе на таможенную территорию Евразийского экономического союза и (или) перемещения между государствами-членами племенного и пользовательского крупного рогатого скота [1] на территории страны импортера и после ввоза на территорию Российской Федерации животные были исследованы на наличие антител к вирусу ИРТ КРС с отрицательными результатами. Взятие проб крови для плановых исследований было проведено на 3-й день пребывания животных на территории Российской Федерации. Взятие проб для наших исследований проводилось на 20-й день после ввоза животных в Россию. В результате нам удалось детектировать антитела к вирусу ИРТ КРС у 3-х животных. Факт детекции антител к возбудителю указанной болезни у одних и тех же животных двумя серологическими методами, которые независимо друг от друга проводили разные соавторы, исключает возможность получения ложноположительных результатов. Видимо животные, в сыворотке крови которых детектированы антитела к вирусу ИРТ КРС, были инфицированы на территории страны-импортера, тем более, что Голландия, по данным ВОЗЖ, стационарна неблагополучна по ИРТ КРС [16]. Возбудитель болезни в организме указанных животных скорее всего находился в состоянии персистенции и именно этим можно объяснить отрицательные результаты серологических исследований, проведенных на территории страны-импортера и в России в первые дни после ввоза животных. Такое заключение согласуется с мнением многих авторов, описывающих явление персистенции возбудителя ИРТ КРС [3, 4, 7, 9, 11]. Транспортный, кормовой, климатический и ряд других стрессов, которым животные подверглись в ходе их перемещения из Голландии в Россию, способствовали реактивации вируса и началу иммунного ответа организма на циркуляцию возбудителя, который нам и удалось зафиксировать, проведя отбор проб крови для исследования на 20-й день пребывания животных на территории России. Вторая партия крупного рогатого скота была ввезена из Дании (80 голов племенных нетелей). По данным ВОЗЖ Дания в течение последних 11 лет благополучна по ИРТ КРС [16]. В период карантина на территории страны-импортера всем животным была проведена вакцинация против этой болезни с использованием маркированной вакцины Biobos IBR Marker. Спустя месяц после вакцинации животные были импортированы на территорию России и поставлены на карантин. В соответствии с последним абзацем главы 1 Ветеринарных требований при ввозе на таможенную территорию Евразийского экономического союза и (или) перемещения между государствами-членами племенного и пользовательского крупного рогатого скота, поскольку были ввезены племенные животные вакцинированные против ИРТ КРС, исследования на наличие антител к возбудителю этой болезни ни на территории страны-импортера, ни в Российской Федерации не проводились [1]. Исследование парных проб сыворотки крови, проведенное нами в реакции нейтрализации с постоянной дозой вируса, позволило установить пророст титров антител во второй пробе сыворотки в среднем в 2 раза у всех животных исследуемой партии. Учитывая, что с даты вакцинации животных против ИРТ КРС до даты отбора второй пробы сыворотки крови прошло немногим больше 1,5 месяцев, предположить об инфекционном происхождении антител у животных невозможно [12]. В ходе независимых серологических исследований, направленных на детекцию антител к гликопротеину Е (gE), по гену которого маркирован вакцинный штамм вируса, проведенных в ГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория», получены отрицательные результаты. Таким образом мы можем с уверенностью утверждать, что антитела к возбудителю ИРТ КРС у всех животных исследуемой партии имеют поствакцинальное происхождение [12]. По результатам исследования животных двух партий с разным статусом вакцинации против ИРТ КРС, ввезенных из стран с разным официальным статусом по этой болезни, для повышения биологической безопасности мы рекомендуем: 1. В случае ввоза животных, вакцинированных маркирова-ными вакцинами, независимо от требований последнего абзаца главы 1 Ветеринарных требований при ввозе на таможенную территорию Евразийского экономического союза и (или) перемещения между государствами-членами племенного и пользовательского крупного рогатого скота [1], все равно проводить серологические исследования, по результатам которых можно доказать причину происхождения антител у животных (посвакци-нальная или постинфекционная). 2. В случае ввоза животных, не вакцинированных против ИРТ КРС, пробы крови для серологического исследования на наличие антител к этому возбудителю, желательно отбирать в заключительные сроки профилактического карантина (18-20 дни пребывания животных на территории России). Список литературы: 1. Ветеринарные требования при ввозе на таможенную территорию Евразийского экономического союза и (или) перемещении между государствами-членами племенного и пользовательного крупного рогатого скота // Единые ветеринарные (ветеринарно-санитарные) требования, предъявляемые к товарам, подлежащим ветеринарному контролю (надзору), утвержденные решением Комиссии Таможенного союза от 18 июня 2010 г. № 314. Глава 1. С. 5-6. 2. Волкова, В. В. Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота / В. В. Волкова, О. Г. Петрова // Молодежь и наука. 2018. № 3. С. 5. 3. Герпесвирусные болезни животных / Н. И. Закутский, И. Ю. Хухоров, В. И. Жестерев [и др.] // 2003. 282 с. - ISBN 5-94210-021-7. 4. Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота / А. Г. Глотов, А. Ф. Шуляк, Т. И. Глотова, А. Н. Сергеев // Издательско-полиграфическое объединение Юпитер. 2006. 196 с. ISBN 5-9657-0066-0. 5. Курченко, Г. А. Инфекционный ринотрахеит у племенных быков на племпредприятиях / Г. А. Курченко, А. Ф. Шуляк, Г. Н. Величко // Ветеринария. 2016. № 11. С. 7-11. 6. Меры профилактики и борьбы с инфекционным ринотрахеитом - инфекционным пустулезным вульвовагинитом КРС в условиях молочного скотоводства / Ю. А. Костыркин, В. А. Мищенко, И. В. Нестеренко [и др.] // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - 2005. - Т. 3. - С. 171-183. 7. Мищенко, В. А. Проблема борьбы и профилактики инфекционного ринотрахеита - инфекционного пустулезного вульвовагинита крупного рогатого скота / В. А. Мищенко, Г. А. Джаилиди, О. Ю. Черных // Ветеринария Кубани. 2012. № 6. С. 3-5. 8. Петрова, О. Г. Меры профилактики и борьбы с острыми респираторными заболеваниями крупного рогатого скота в племенных хозяйствах / О. Г. Петрова, Ю. А. Кирсанов, В. С. Мымрин // Аграрный вестник Урала. 2011. № 2 (81). С. 18-19. 9. Сюрин, В. Н. Вирусные болезни животных / В. Н. Сюрин, А. Я. Самуй-ленко, Б. В. Соловьев // ВНИТИБП. 1998. 928 с. 10. Шуляк, А. Ф. Характеристика изолятов BoHV-1, выделенных от племенных быков / А. Ф. Шуляк, Г. Н. Величко // Молекулярная диагностика. 2017. С. 380. 11. Юров, К. П. Контроль и пути оздоровления скота племенных хозяйств и племенных предприятий от инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи / К. П. Юров, М. И. Гулюкин // Российская сельскохозяйственная наука. 2018. № 1. С. 59-63. 12. Infectious bovine rhinotracheitis/ infectious pustular vulvovaginitis // Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals 2021. -Р. 1139-1142. 13. Ludwig H. Bovine herpesviruses / The Herpesviruses / Ed. B. Roizman. -New York; London: Charter, 1982. - P. 135-214. 14. Ludwig H. Herpesviruses of bovidae: The characterization, grouping and role of different types, including viruses / / CEC Symp. on «Latency of herpesviruses», Tubingen, 21-23 Sept. 1982. - 1984. - P. 171-189. 15. Meyer H., Mayr A., Bachmann P.A. e. а. Schutzimpfung von latent IBR-IPV-Virus Infizierten Bullen mit einer Vakzine aus inaktiviertem IBR-Virus / / Tierarztl. Umsch. - 1985. - Bd. 40. - S. 974-985. 16. WAHIS: World Animal Health Information System. - https://wahis.woah.org/#/home Резюме. Возбудитель инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота может длительное время персистировать в организме восприимчивых животных, независимо от их статуса вакцинации против этой болезни. По сообщениям многих авторов, именно ввоз персистентно инфицированных возбудителем ИРТ КРС животных в Россию, является одним из основных путей заноса новых эпизоотических штаммов этого вируса из-за рубежа. В рамках настоящей работы авторами проанализирована возможность заноса возбудителя ИРТ КРС при ввозе крупного рогатого скота с разным статусом вакцинации против указанной болезни из зарубежных стран с разными официальными статусами благополучия по данным ВОЗЖ. В конце работы авторы обосновывают рекомендации по исследованию ввезенных животных на территории Российской Федерации, которые позволят минимизировать риск ввоза животных, персистентно инфицированных возбудителем инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. Ключевые слова: инфекционных ринотраехит, крупный рогатый скот, импорт, вакцинация, DIVA-стратегия. Сведения об авторах: Коба Игорь Сергеевич, доктор ветеринарных наук, заведующий кафедрой эпизоотологии и организации ветеринарного дела ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К. И. Скрябина»; 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23; e-mail: epizootology@mgavm.ru. Черных Олег Юрьевич, профессор, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры микробиологии, эпизоотологии и вирусологии ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина»; 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13; e-mail: gukkvl50@kubanvet.ru. Кривонос Роман Анатольевич, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры паразитологии, ветсанэкспертизы и зоогигиены ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина»; 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13. Осипян Эдуард Артурович, аспирант кафедры эпизоотологии и организации ветеринарного дела ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К. И. Скрябина»; 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23; e-mail: edik.osipian@yandex.ru. Акбаева Любовь Махмудовна, научный сотрудник НИЛ биотехнологии и прикладной иммунологии ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К. И. Скрябина»; 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23. Чомаева Лилия Магометовна, научный сотрудник НИЛ биотехнологии и прикладной иммунологии ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К И. Скрябина»; 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23. Ответственный за переписку с редакцией: Пчельников Александр Владимирович, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры эпизоотологии и организации ветеринарного дела ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К. И. Скрябина»; 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23; e-mail: vetdr-mom@list.ru.
|
|
| 2011 © Ветеринария Кубани | Разработка сайта - Интернет-Имидж | |
|---|---|---|