Изменение гематологических показателей у животных после введения им инактивированных токсинов Escherichia Coli

УДК 619:579.842.11-612.112.7

Терехов В.И. ГБПОУ КК «Пашковский сельскохозяйственный колледж», г. Краснодар
Тищенко А.С. ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет
имени И.Т. Трубилина», г. Краснодар

Введение. Колибактериоз (эшерихиоз) телят и поросят ос­таётся проблемной патологией, как в России, так и в других странах [1, 4, 12]. Основу мероприятий, направленных на предупреждение данной болезни составляет вакцинопрофилактика. Подавляющее большинство биопрепаратов против эшерихиоза, при­меняемых на территории Российской Федерации, ориентировано на обеспечение у животных активного и пассивного иммунитета в от­ношении соматических антигенов, специфических пилей (К99, К88. F41, F17 и другие), термолабильного (TL) и/или термостабильного (TS) экзотоксинов [3, 11]. Между тем, аналитическая проработка влияния иммунизаций с использованием подобных вакцин на эпизоотичес­кий процесс при колибактериозе показала полное отсутствие корре­лятивной зависимости между уровнем заболеваемости и уровнем вакцинообработок [1, 4]. Как оказалось, достаточно интенсивное и регулярное использование вакцин против колибактериоза никоим об­разом не влияет ни на заболеваемость, ни на летальность при данной инфекции. Одной из причин сложившегося обстоятельства, по всей видимости, является несоответствие антигенного состава имеющих­ся вакцинных препаратов, этиологическим и патогенетическим фак­торам, обуславливающим развитие болезни. Акцент при разработке вакцин против эшерихиоза на соматические и пилевые антигены не­состоятелен в виду их значительного разнообразия у патогенных E. coli. Кроме того, адгезия эшерихий к эпителиальным клеткам может осуществляться не только за счёт фимбриальных, но и нефимбриаль- ных структур (AFA или NFA), относящихся к семейству Dr-адгезинов, AIDA-I адгезинам, М-агглютининам и интимину [7, 8, 9, 10]. Включе­ние в состав вакцин только термолабильного и/или термостабильного экзотоксина также неверно, так как установлено, что в развитии пато­логии у телят и поросят широко участвуют варианты E. coli, продуциру­ющие шигаподобный токсин (STX), а также такие варианты, которые могут продуцировать сразу несколько видов токсинов [5, 12]. Однако, использование в составе одного вакцинного препарата антигенов нескольких экзотоксинов патогенных эшерихий требует специальных исследований, поскольку они сами по себе в отдельности обладают разнообразными токсичными, иммуносупресивными и иммунномо- дулирующими свойствами.

Целью работы являлось изучение влияния смеси инактивиро­ванных экзотоксинов (анатоксина) E. coli на картину крови животных, для оценки возможности использования её в качестве претендента на вакцинный препарат.

Материалы и методы исследований. Для получения анатокси­на были использованы ранее отобранные штаммы [6], посев которых осуществляли по отдельности в пробирки с 10 мл питательного бульона с последующим их культивированием в термостате при температуре 37°C в течение 6-8 ч до появления легкого помутнения, свидетельс­твующего о росте микроорганизмов. По истечении срока культивиро­вания полученные культуры переносили в 200-300-миллилитровые колбы с питательным бульоном и подвергали инкубации в термостате при 37°C, при этом штаммы, продуцирующие TL и TS, выдерживали в течение 6 суток, а штамм, продуцирующий STX - 7 суток. На сле­дующем этапе осуществляли инактивацию бульонных культур путем добавления в них формалина до концентрации 0,3-0,4%. Данную про­цедуру проводили в течение двух недель при температуре 37°C, при этом культуры микроорганизмов каждый день двукратно перемеши­вали. На последнем этапе по окончании инактивации культуры прове­рили на стерильность, объединили их равные объемы и посредством стерилизующей фильтрации произвели разделение среды культивиро­вания и микробной массы. В результате получили комплексный пре­парат, представляющий собой прозрачную жидкость, светло-желтого цвета, содержащий 3 вида инактивированных экзотоксинов. После чего готовый препарат с соблюдением условий асептики разлили по стерильным флаконам, затем укупорили их стерильными резиновыми пробками с последующей обкаткой алюминиевыми колпачками.

Для изучения влияния инактивированных токсинов на картину крови использовали лабораторных животных, в качестве которых ис­пользовали белых крыс с массой 200±10 г. Подопытных животных по методу пар-аналогов сформировали в 5 групп по 70 голов в каждой. Крысы из 1-ой группы служили в качестве отрицательного контроля, которым ничего не вводили. Животные из 2-ой группы являлись по­ложительным контролем, им инъецировали стерильный питательный бульон. Остальным животным вводили анатоксин в различных дозах: крысам 3-ей группы инъецировали 0,15 см3; 4-ой группе - 0,3 см3; 5-ой группе - 0,6 см3. После введения препаратов у 10-ти животных из каждой группы через 1, 3, 6, 12, 24 ч, 3 и 7 дней отбирали кровь из латеральной вены хвоста с помощью перфузионного устройства «иг­ла-бабочка» размером G25 (Vogt medical, Германия).

Исследование крови у подопытных животных проводили с помо­щью автоматического гематологического анализатора MEDONIC CA 400 (Boule Medical AB, Швеция), определяли количество эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина. Отдельно выводили лейкоформулу, по кото­рой для установления оценки выраженности степени эндотоксикоза и уровня воспалительной реакции рассчитывали лейкоинтоксикацион­ный индекс (ЛИИ) [2].

Биометрическая обработка цифрового материала осуществля­лась с использованием программы Microsoft Office Excel 2010.

Результаты исследований и их обсуждение. При проведении анализа полученных результатов опыта установили, что у подопытных крыс после введения им как стерильного бульона, так и анатоксина во все временные отрезки исследования оставалась стабильной и до­стоверно не отличалась от таковой у интактных животных. Между тем основные изменения наблюдали в картине белой крови.

Через 1 ч после введения питательного бульона и анатоксина (табл. 1) у животных опытных групп и группы положительного контро­ля наблюдали снижение общего количества лейкоцитов относительно животных из группы отрицательного контроля (интактные животные). В результате произошло заметное изменение в соотношении клеток бе­лой крови, составляющих их общий пул, на фоне отмеченной лейкопе­нии. Так, относительное количество лимфоцитов снизилось, в то время как количество нейтрофильных гранулоцитов выросло. При этом было установлено, что если у крыс из первой группы на долю лимфоцитов приходилось 85,0% всех лейкоцитов, а нейтрофилов 14,3%, то у живот­ных из 3-5-й групп, которым ввели анатоксин в дозах 0,15 / 0,3 / 0,6 мл, количество этих клеток составило 64,7, 67,0, 66,0 и 29,7, 29,3, 30,6%, соответственно.

Таблица 1. Гемограмма крыс через 1 час после введения анатоксина

Гематологи­ ческим показатель	Группы животных (ns10)
	1	2	3	4	5
Лейкоциты, 109/л	9,8±1,2	8,7±0,8	7,3±0,4	7,0±0,2*	6,8±0,5*
Эритроциты, 1012/л	7,1±0,4	7,1±0,5	6,3±0,5	5,8±0,7	8,2±0,5
Гемоглобин, г/л	131,0± 10,0	124,0± 11,6	109,0± 9,2	103,0± 6,6*	137,0± 10,5
Лейкоформула, %: лимфоциты	85,0±3,5	71,5±1,6*	64,7±2,3*	67,0±2,9*	66,0±3,1*
моноциты	0,4±0,02	0	2,3±0,12*	1,0±0,03*	0,7±0,01*
эозинофилы	0,3±0,01	5,5±0,12*	3,3±0,09*	2,7±0,07*	2,7±0,09*
сегментоядерные	9,3±1,2	21,0±3,9*	28,4±2,6*	28,0±4,2*	29,3±2,2*
палочкоядерные	5,0±0,9	2,0±0,6*	1,3±1,0*	1,3±0,6*	1,3±0,7*
ЛИИ	0,17±0,1	0,3±0,13	0,45±0,3	0,47±0,3	0,46±0,18

* Р<0,05 относительно животных 1-й группы (интактные животные)

У животных из 2-й группы, которым ввели стерильный бульон,

было отмечено аналогичное изменение в лейкоформуле, но в мень­шей степени. По всей вероятности, наблюдаемый эффект может быть объяснен двумя причинами: во-первых, ответной реакцией системы гемопоэза на физический стресс (фиксация, внутримышечное введе­ние), во-вторых — непосредственным влиянием бульона и анатокси­на. При этом косвенно в пользу последнего фактора может свидетель­ствовать увеличение относительного количества эозинофилов в крови животных, которым инъецировали бульон и анатоксин.

Токсического и раздражающего действия бульона и анатоксина установлено не было, поскольку на месте их введения отсутствовали какие-либо местные изменения. Кроме того, ЛИИ крови увеличился только на 0,2-0,3 единицы, тогда как при выраженном токсикозе он может достигать 5 и более единиц [2].

Установлено, что спустя 3 ч после введения анатоксина, его раз­личные дозы неодинаково оказывали влияние на лейкоциты (табл. 2). Так если у животных из группы №3 (доза анатоксина 0,15 мл) их коли­чество относительно первого исследования снизилось на 0,7х109/л, то у животных из группы №№ 4 и 5, напротив, увеличилось на 4,4 и 7,4*109/л, соответственно.

Таблица 2. Гемограмма крыс через 3 ч после введения анатоксина

Гематологический показатель	Группы животных (ns10)
	1	2	3	4	5
Лейкоциты, 109/л	9,2±1,6	8,4±1,4	6,6±0,26	11,4±1,1	14,2±1,5*
Эритроциты, 1012/л	7,4±0,37	6,1±0,59	6,2±0,26*	7,7±0,5	6,7±0,2
Гемоглобин, г/л	121,0± 10,8	103,0± 8,7	104,0± 7,7	134,0± 10,6	116,0± 6,4
Лейкоформула, %: лимфоциты	81,0±4,6	62,7±5,0*	50,7±3,2*	48,0±4,8*	30,3±3,4*
моноциты	0,2±0,15	1,0±0,34	0,7±0,2	0,4±0,1	0,3±0,1
эозинофилы	1,5±0,8	2,7±0,16	1,3±0,7	2,2±0,56	1,3±0,9
сегментоядерные	13,3±2,0	31,3±3,9*	44,3±2,5*	48,0±4,8*	65,7±1,6*
палочкоядерные	4,0±0,2	2,3±0,5*	2,1±0,47*	1,4±0,78*	2,4±0,61*
ЛИИ	0,17±0,1	0,5±0,2	0,86±0,5	0,98±0,5	2,7±1,8

* Р<0,05 относительно животных 1 группы (интактные животные)

У крыс из группы № 2 (положительный контроль) этот показа­тель не изменился. При изучении лейкоформулы у животных в данных группах по-прежнему установлена динамика увеличения нейтрофиль- ных гранулоцитов на фоне уменьшения относительного количества лимфоидных клеток. При этом количество сегментоядерных нейтро- филов у крыс из 2-й группы достигло 31,3±1,1%, 3-ей - 44,3±0,8, 4­ой - 43,0±1,1 и 5-й - 65,7±0,6%. Наличие существенной разницы в лейкограммах у крыс из 2-й и 3-5-й групп может свидетельствовать о специфическом действии анатоксина. Данный факт подтверждается характерной особенностью: чем большей была вводимая доза, тем в большей степени уменьшалось количество лимфоцитов и увеличива­лось количество сегментоядерных нейтрофилов.

Количество эозинофилов и палочкоядерных нейтрофилов у крыс, которым инъецировали субстраты, было на таком же уровне, как и у интактных животных, что свидетельствует об отсутствии аллер- гизирующего или раздражающего действия введенных препаратов.

Через 6 и 12 ч после введения бульона и анатоксина (табл. 3, 4) у крыс из группы положительного контроля и опытных групп, содержа­ние в крови общего количества лейкоцитов достоверно не отличалось от такового у животных из группы отрицательного контроля.

Таблица 3. Гемограмма крыс через 6 ч после введения анатоксина 

Гематологический показатель	Группы животных (ns10)
	1	2	3	4	5
Лейкоциты, 109/л	8,8±1,2	7,6±2,5	8,8±4,2	9,44±3,7	9,0±4,2
Эритроциты, 1012/л	6,1±2,3	6,1±0,42	6,3±0,8	7,29±0,8	6,4±0,4
Гемоглобин, г/л	121,0±9,0	109,0±7,4	114,0±10,1	125,0±9,2	109,0±6,9
Лейкоформула, %: лимфоциты	82,0±4,9	69,3±3,4	55,4±2,3*	61,4±4,6*	52,0±2,1*
моноциты	1,4±0,3	1,7±0,21	0	2,2±0,45	1,7±0,25
эозинофилы	1,3±0,1	2,3±0,22*	3,0±0,24*	3,4±0,8*	2,3±0,45
сегментоядерные	11,3±1,0	24,7±2,6*	39,0±3,7*	32,2±4,6*	42,0±4,9*
палочкоядерные	4,0±0,9	2,0±0,1	2,3±0,45	0,8±0,2*	2,0±0,27
ЛИИ	0,17±0,1	0,36±0,15	0,7±0,8	0,53±0,3	0,8±0,3

* Р<0,05 относительно животных 1-й группы (интактные животные)

Однако у крыс из 2-5-й групп в лейкоформуле количество лим­фоцитов все ещё оставалось более низким, чем у крыс из 1-й группы. Так у животных из 2-й группы эта разница составляла 10,2-12,7%, 3­й группы - 26,6-28,0%, 4-й группы - 20,6-30,0%, 5-й группы - 30­42,0%. Количество нейтрофилов, напротив, было более высоким. Если у животных из 1-й группы данная популяция лейкоцитов состав­ляла 13,7-15,3%, то у животных из 2-5-й групп, соответственно, 24,3­26,7%, 41,3-43,3%, 33,0-41,6% и 44,0-54,7%.

Таблица 4. Гемограмма крыс через 12 ч после введения анатоксина

Гематологический показатель	Группы животных (ns10)
	1	2	3	4	5
Лейкоциты, 109/л	9,3±2,1	7,37±1,1	7,4±1,6	8,6±2,4	8,9±0,9
Эритроциты, 1012/л	6,85±0,9	6,61±0,48	7,04±0,5	7,3±0,5	6,85±0,3
Гемоглобин, г/л	122,7± 9,9	117,7± 5,5	125,0± 6,0	128,0± 12,0	121,0± 4,7
Лейкоформула, %: лимфоциты	83,0±5,4	72,7±4,7	55,0±4,3*	53,0±3,6*	41,0±1,7*
моноциты	0,3±0,6	0	0	1,8±0,3	0
эозинофилы	3,0±0,45	3,0±0,38	1,70±0,2*	3,6±0,27	4,3±0,1*
сегментоядерные	13,4±1,7	23,3±2,8*	40,3±3,2*	41,0±3,5*	51,7±2,7*
палочкоядерные	0,3±0,04	1,0±0,08*	3,0±0,9*	0,6±0,1*	3,0±1,0*
ЛИИ	0,16±0,08	0,31±0,16	0,65±0,40	0,80±0,60	1,25±0,30*

* Р<0,05 относительно животных 1-й группы (интактные животные)

Таким образом, в течение первых 12 ч после введения субстра­тов (как питательного бульона, так и анатоксина) у животных проис­ходит усиленный выброс в кровяное русло физиологически зрелых нейтрофильных гранулоцитов, осуществляющих захват и процессинг антигена. Между тем, по причине того, что в антигенном отношении анатоксин более активен, чем питательный бульон, после его введе­ния у подопытных животных количество сегментоядерных нейтрофи- лов повышалось в течение первых 12 ч, тогда как после введения бу­льона содержание этих клеток увеличивалось только в течение первых 3 ч, а затем начинало снижаться.

Через 24 ч после инъекции препаратов содержание в крови лейкоцитов у животных из контрольных и опытных групп было практи­чески одинаковым и достоверно не имело различий (табл. 5). Кроме того, у крыс из 2-й группы параметры лейкограммы достоверно не отличались от таковой у животных из 1-й группы, что свидетельствует о прекращении действия бульона на кровь. Между тем, у животных из 3-5-й групп по-прежнему наблюдали достоверно более низкое, чем у интактных крыс, содержание лимфоцитов и более высокое - нейтрофилов. Особенно выраженная разница была отмечена у животных из 5-й группы, которым анатоксин ввели в дозе 0,6 мл. У них относи­тельное количество лимфоцитов было на 27,0% ниже, а количество нейтрофилов на 22,0% выше, чем у интактных особей, что является свидетельством продолжающегося антигенного раздражения.

Таблица 5. Гемограмма крыс через 24 ч после введения анатоксина

Гематологи­ческий показатель	Группы животных (ns10)
	1	2	3	4	5
Лейкоциты, 109/л	8,64±0,19	7,42±2,1	8,98±1,1	7,37±0,5*	7,74±3,9
Эритроциты, 1012/л	6,28±0,2	6,66±0,42	6,97±1,1	7,9±0,19*	6,8±0,61
Гемоглобин, г/л	111,8± 10,4	110,7± 6,3	108,2± 4,3	97,3± 5,4	109,0± 8,0
Лейкоформула,%: лимфоциты	83,6±3,4	83,4±2,5	69,6±4,7*	67,6±3,9*	56,6±4,5*
моноциты	1,0±0,32	0,7±0,06	1,2±0,2	0,6±0,3	0,6±0,2
эозинофилы	0,2±0,01	0,2±0,01	2,6±0,23*	1,2±0,2*	5,4±0,5*
сегментоядерные	14,0±2,0	12,0±1,9	24,8±3,5*	28,2±3,4*	35,6±4,1*
палочкоядерные	1,2±0,3	2,7±0,21*	1,8±0,1	2,4±0,4*	1,8±1,0
ЛИИ	0,18±0,06	0,21±0,03	0,38±0,2	0,27±0,1	0,62±0,3

* Р<0,05 относительно животных 1 группы (интактные животные)

Через 3 дня после введения анатоксина (табл. 6) у всех подопыт­ных животных резко возросло общее количество лейкоцитов. Так, если у

крыс контрольных групп оно было на уровне 7,1±0,98 - 7,3±0,13*109/ л, то у крыс опытных групп - 11,3±0,29-11,9±0,37*109/л. Рас-чёт лейкограммы показал, что наблюдаемый лейкоцитоз произошел за счет увеличения ко-личества лимфоцитарных клеток.

Таблица 6. Гемограмма крыс через 3 дня после введения анатоксина

Гематологический показатель	Группы животных (ns10)
	1	2	3	4	5
Лейкоциты, 109/л	7,34±0,13	7,1±0,98	11,9±0,37*	11,3±0,29*	11,6±0,18*
Эритроциты, 1012/л	6,28±1,2	6,9±0,79	6,96±0,86	6,77±0,4	6,95±0,29
Гемоглобин, г/л	91,2±4,4	91,3±6,3	115,2±9,0	99,8±8,0	114,8±6,0
Лейкоформула,%: лимфоциты	82,0±5,0	82,5±4,2	83,6±4,4	71,4±4,7	73,5±4,7
моноциты	1,6±0,30	0	1,0±0,20	0,6±0,10	1,8±0,04
базофилы	0	0	0	0	0
эозинофилы	1,2±0,5	0,8±0,3	2,4±0,7	2,4±0,29	4,0±1,0*
сегментоядерные	14,0±1,1	15,0±1,57	12,6±2,7	23,0±3,9	20,0±4,0*
палочкоядерные	1,2±0,2	2,7±0,3*	0,4±0,08*	2,6±0,9	0,7±0,5
ЛИИ	0,18±0,06	0,38±0,16	0,12±0,3	0,32±0,1	0,27±0,17

* Р<0,05 относительно животных 1-й группы (интактные животные)

Спустя 7 дней после введения анатоксина количественные зна­чения контролируемых гематологических показателей у животных всех групп достоверно не отличались между собой, что может свиде­тельствовать о прекращении антигенного раздражения.

Как показали проведенные исследования, после инактивации формалином экзотоксины потеряли свои цитотоксические свойства. Поскольку наблюдаемые изменения в картине крови были диамет­рально противоположными, наблюдаемые при заражении животных нативными формами токсинов. Так было установлено, что после од­нократного введения нативной смеси экзотоксинов в картине крови подопытных животных стремительно развивались изменения, харак­теризующиеся резким угнетением лейкопоэза на фоне выраженной эозинофилии и нейтрофилии с преобладанием в популяции последних незрелых клеток. При этом даже спустя 24 ч у подопытных животных сохранялись признаки иммунносупресивных и воспалительно-дегене­ративных процессов, о чем свидетельствовало высокое содержание в периферической крови миелоцитов и метамиелоцитов и полное ис­чезновение моноцитов [6]. После введения инактивированной сме­си экзотоксинов, наблюдаемые в течение первых 24 ч изменения в картине крови у подопытных животных, свидетельствовали о вполне естественном развитии патофизиологических процессов в виде крат­ковременной умеренной лейкопении, сменяющейся лейкоцитозом с преобладанием в лейкоформуле сегментоядерных клеток. Спустя 72 ч эффект был обратным, у животных, которым ввели анатоксин, развивалась лейкопения с преобладанием в пуле клеток белой крови лимфоцитов. Через 168 ч после введения анатоксина картина крови подопытных животных была аналогичной таковой у контрольных жи­вотных, что может свидетельствовать о развитии эффекторной стадии иммунного ответа.

Таким образом, исследования показали, что после инактивации экзотоксины E. coli потеряли свои цитотоксические свойства, но со­хранили антигенные, поскольку наблюдаемые изменения в картине крови после введения анатоксина животным полностью вписываются в сценарий классического развития иммунного ответа на антигенное раздражение, а, именно, во временную последовательность развития стадии индукции, стадии иммунорегуляции и эффекторной стадии [2].

Следовательно, можно констатировать, что после введения рас­творимого антигена, коим является смесь инактивированных экзо­токсинов E. coli, первичное реагирование иммунной системы в виде увеличения количественного присутствия физиологически зрелых нейтрофилов (фагоцитов) продолжается в течение 24 ч, после чего ста­дия индукции иммунного ответа затухает и начинает реализовываться ее регуляторная стадия, проявляющаяся увеличением количества иммунокомпетентных клеток - лимфоцитов.

Дозозависимый эффект влияния анатоксина на картину крови весьма заметен, но насколько положительным является более высо­кое увеличение количества нейтрофильных гранулоцитов у животных, которым инъецировали анатоксин в более высоких дозах могут пока­зать исследования по развитию у них гуморального иммунного ответа. Однако то обстоятельство, что на протяжении первых 3-х дней после инъекции анатоксина в дозе 0,6 мл у животных сохранялось повы­шенное содержание в крови эозинофилов, может свидетельствовать о его возможном аллергизирующем действии на организм.

Заключение. Смесь инактивированных формалином экзотокси­нов E. coli (анатоксин) можно рассматривать в качестве претендента на вакцинный препарат, поскольку она потеряла своё цитопатологи- ческое действие, но сохранила антигенные и иммуностимулирующие свойства. Наблюдаемые в картине периферической крови позитив­ные изменения в течение первых 72 ч после введения анатоксина, характеризовались последовательно развивающейся умеренной нейтрофилией без ядерного сдвига и лимфоцитозом. Чем большей была доза вводимого анатоксина, тем более выраженными были из­менения в картине крови, в том числе проявляющиеся повышенным присутствием в кровяном русле эозинофилов.

Список литературы:

1. Джупина С.И. Профилактика колибактериоза или массовой желудочно­кишечной болезни приплода продуктивных животных / С.И. Джупина // Ветери­нарная патология. 2015. №4. С. 3-9.
2. Караулов А.В. Клиническая иммунология / А.В. Караулов. - М.: Меди­цинское информационное агентство, 1999. - 604 с.
3. Пирожков М.К. Биологические препараты для специфической профи­лактики и терапии эшерихио-за животных : дис. „.док. вет. наук (16.00.03 - вете­ринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотокси­кологией и иммунология) / М.К. Пирожков. М.: ВГНКИ, 2002. 298 с.
4. Скориков А.В. Эпизоотическая ситуация по колибактериозу поросят в Краснодарском крае / А.В. Скориков, В.И. Терехов, А.Ф. Дмитриев // Ветерина­рия Кубани. 2015. №4. С. 3-6.
5. 5 Терехов, В.И. Антигенный состав и патогенные свойства штаммов E. coli, изолированных от телят и поросят в Краснодарском крае / В.И. Терехов, Я.М. Караев, Н.В. Когденко, Н.В. Коткова // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. 2008. №4. С. 6-8.
6. Терехов, В.И. Влияние энтеротоксинов Escherichia ooli на картину кро­ви животных / В.И. Терехов // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. 2015. №4 (28). С. 66-72.
7. Терехов В.И. Патогенный потенциал энтеробактерий, выделенных от новорожденных телят при острых кишечных заболеваниях / В.И. Терехов, Т.В. Малышева, А.С. Тищенко, Н.С. Мусатова // Ветеринария Кубани. 2017. №2. С. 11—13.
8. Терехов В.И. Факторы адгезии и колициногенная активность Escherichia coli / В.И. Терехов, А.С. Тищенко, И.В. Сердюченко // Вестник ветеринарии. 2015. № 3 (74). С. 41—45.
9. Эшерихиозы. В книге: Инфекционные и паразитарные болезни раз­вивающихся стран : учебник для ВУЗов / Под ред. Н.В. Чебышева, С.Г Пака. - 2008. :http://vmede.org/sait/?id=Infekcionnye_boleznLparaz_4ebisheva_ 2008&menu=Infekcionnye_bolezni_paraz_4ebisheva_2008&page=5
10. Scheutz F. Genus I. Escherichia. The gammaproteobacteria: In Bergey's Manual of systematic Bacteriology. Vol. 2. Part B. / F. Scheutz, N.A. Strockbine. New York: Springer, 2005. Р. 607-624.
11. Allocati N. Escherichia coli in Europe: An Overview / N. Allocati, M. Masulli, M. F. Alexeyev, C. DiIlio // International Journal of Environmental Research and Public Health. 2013. Vol. 10. P. 6235-6254.
12. Hashish E.A. Epidemiological study of diarrheagenic Fscherichia coli virulence genes in newborn calves / E.A. Hashish, H.M. El Damaty, Y.H. Tartor, and
13. M. Abdelaal // Pakistan Veterinary Journal. 2016. Vol. 36(1). Р. 54-58.

Резюме. Эшерихиоз телят и поросят по-прежнему является широко рас­пространенной инфекционной патологией на фермах различных стран мира, в том числе и России, несмотря на проведение вакцинопрофилактики данной болезни. Это обстоятельство свидетельствует о несовершенстве применяемых средств иммунизации, причиной которой является несоответствие антигенного состава вакцин этиологическим и патогенетическим факторам, обуславливаю­щих развитие эшерихиоза. С учётом выше обозначенного, приобретает актуаль­ность вопрос совместного применения энтеротоксинов кишечной палочки в ка­честве комплексного вакцинного препарата (анатоксина), однако как они будут влиять на организм животного после введения, и какими будут обладать свойс­твами, неизвестно, что требует проведения специальных исследований. В свя­зи с этим целью работы являлось изучение влияния смеси инактивированных энтеротоксинов на картину крови животных. В результате исследований было установлено, что после введения анатоксина у крыс первичное реагирование иммунной системы выражалось в виде увеличения количественного присутс­твия физиологически зрелых нейтрофилов, после чего наблюдали увеличение количества иммунокомпетентных клеток - лимфоцитов. Доза вводимого ана­токсина также имела значение, чем она была выше, тем более выраженными были изменения в картине крови, в том числе проявляющиеся повышенным присутствием в кровяном русле эозинофилов. Инактивированные энтероток­сины E. coli не обладали токсическим и цитопатологическим действием при их введении в макроорганизм, в то же время они сохранили свои антигенные и иммуностимулирующие свойства, что позволяет их рассматривать в качестве претендента на комплексный вакцинный препарат.

Ключевые слова: эшерихиоз, экзотоксины, энтеротоксины, Escherichia coli, анатоксин, кровь, нейтрофильные гранулоциты, лимфоциты, белые крысы.

Сведения об авторах:

Тищенко Александр Сергеевич, кандидат ветеринарных наук, старший преподаватель кафедры микробиологии, эпизоотологии и вирусологии факуль­тета ветеринарной медицины ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина»; 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13; 8-928-4692399; e-mail: mephisto83@inbox.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Терехов Владимир Иванович, доктор биологических наук, профессор, ГБПОУ КК «Пашковский сельско­хозяйственный колледж»; 350910, г. Краснодар, пос. Пашковский, ул. Е. Бершанской, 220; тел.:8-988-4742115; e-mail: vterekhov@list.ru.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей