Микробиоценоз толстого отдела кишечника при цитробактериозе кроликов

УДК 619:616.33/.34:619:616.9]:636.92
DOI 10.33861/2071-8020-2021-3-19-21

Дыптан О.Н., Ожередова Н.А., Светлакова Е.В., Веревкина М.Н., Дмитриев А.Ф., Заерко В.И. 
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования
«Ставропольский государственный аграрный университет», г. Ставрополь

Кролиководство в наши дни одна из востребованных отраслей в сельском хозяйстве, особенно оно развивается в личных подсобных хозяйствах (далее, ЛПХ). Имеются и единичные промышленные предприятия в этой отрасли, налаживаются связи поставщиков с потребителями диетического и вкусного мяса кроликов.

Желудочно-кишечные заболевания бактериальной природы, вызванные микроорганизмами из сем. Enterobacteriaceae, периодически идентифицируются и являются одним из сдерживающих факторов эффективного разведения животных. Мониторинг микробиоценоза желудочно-кишечного тракта, изменений нормофлоры и наличия патогенных энтеробактерий, занесенных из внешней среды, необходим для обоснования этиологии расстройства желудочнокишечного тракта.

Профилактические мероприятия при таких болезнях сводятся к улучшению содержания и кормления с включением в рацион пробиотических и синбиотических препаратов, которые нормализуют микробиоценоз кишечника и улучшают микробиологические показатели мяса кроликов [2, 4, 6, 9, 10, 12, 14, 15].

Проводилось сравнение количественного состава микрофлоры кишечника человека и различных видов лабораторных животных. В кишечнике кроликов по сравнению с человеком наблюдается пониженное содержание бифидобактерий и кишечной палочки, что связано с образом жизни и питанием животных [8].

Оценка микробного пейзажа кишечника крольчат в возрасте от 2 до 60 суток изучалась в слепой и прямой кишке. Выявлено доминирование лакто- (1*105) и бифидобактерий (1*107), а также Bacillus subtilis (1*107), которая в молочный период подкисляет среду и обладает антагонистической активностью к патогенным микроорганизмам [7].

В 45-суточном возрасте при отъёме крольчат от матери увеличивается количество бифидобактерий, уменьшается количество лактобактерий, энтеробактерий, энтерококков и дрожжеподобных грибов [5].

Кишечная микрофлора обеспечивает постоянство внутренней среды макроорганизма, осуществляется неспецифическая защита живого организма от бактерий, вызывающих кишечные инфекции, вырабатываются факторы иммунной защиты, влияющие на тяжесть течения инфекционного процесса [3].

Неизвестно, как модифицируется персистентный потенциал условно-патогенных микроорганизмов в условиях микросимбиоцено-за. Между тем, установление условий, способствующих формированию патологического микробиоценоза, на фоне которого возникает факторное заболевание и происходит его хронизация, является первостепенной задачей ветеринарной науки и практики [11].

Цитробактериоз - заболевание, встречаемое не так часто поскольку диагностировать его можно только с помощью микробиологических исследований [1]. Представители рода цитробактер широко распространены и в окружающей среде [13], откуда и попадают в организм животных и человека.

Целью исследования стало изучение изменений микробиоценоза толстого отдела кишечника при цитробактериозе кроликов.

Материалы и методы исследований. Исследования выполнялись в трёх ЛПХ Ставропольского края на кроликах породы Советская Шиншилла в возрасте от 1 до 3 месяцев. Микробиологические исследования осуществлялись в научно-испытательной лаборатории кафедры эпизоотологии и микробиологии Ставропольского госагро-университета. Отбирали кроликов с расстройством желудочно-кишечного тракта: из 24 у 12 животных бактериологическим методом идентифицировали патогенную Citrobaoter freundii (МУ 13-7-2/1759 «Методические указания по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными энтеробактериями»). В каждом ЛПХ для контроля отобрали по 3 кролика без признаков заболевания. Микробиологическими исследованиями в отобранных свежих фекалиях определяли качественный и количественный состав микрофлоры толстого отдела кишечника.

Результаты исследований и их обсуждение. Микробиоценоз живого организма формируется с учётом условий, в которых он находится. Цитробактерии усиленно размножаются эндогенно, когда имеются благоприятные для этого факторы. При загрязнении окружающей среды, при антисанитарных условиях содержания животных, они могут попадать орально и из внешней среды. Дисбактериозы имеют разную этиологию, увеличение цитробактерий в микробиоценозе желудочно-кишечного тракта способствует расстройству желудочно-кишечного тракта. Данные наших исследований представлены в таблицах 1, 2 и 3.

Таблица 1 Микробиоценоз толстого отдела кишечника у кроликов при цитробактериозе в ЛПХ № 1, lg КОЕ/г

№ п/п	Наименование микроорганизмов	Группы животных
		1 (опытная), n=5	2 (контрольная), n=3
1	Патогенные энтеробактерии	0	0
2	Е. coli-lac.(+)	4,2+0,02	4,1+0,10
3	Е. coli-lac.(-)	5,3+0,04	2,2+0,02
4	Е. coli гемолизирующие	5 культур	0
5	Citrobacter spp.	5,1+0,12	2,3+0,01
6	Enterococcus spp.	8,5+0,18*	7,3+0,13
7	Staphylococcus aureus	2,8+0,05	2,6+0,45**
8	Lactobacillus spp.	5,4+0,21	7,2+0,03
9	Bifidobacterium spp.	7,4+0,32**	8,3+0,42
10	Proteus spp.	0	0
11	Candida spp.	2,6+0,01	2,3+0,54
12	Клостридии	2,3+0,06	2,1+0,31

Примечание: * - Р <0,05; ** - Р <0,01

Из анализа данных таблицы 1 видно, что при наличии повышенного содержания цитробактерий (на 82,1%) по сравнению с контрольной группой, наблюдается снижение нормофлоры молочнокислых микро- 19 организмов лактобактерий и бифидобактерий - на 25,0% и 10,8%, соответственно; повышается количество Enterococcus spp. на 16,4%; незначительно повышается количество E. coli-lac.(+).

Таблица 2 Микробиоценоз толстого отдела кишечника у кроликов при цитробактериозе в ЛПХ № 2, lg КОЕ/г

№ п/п	Наименование микроорганизмов	Группы животных
		1 (опытная), n=7	2 (контрольная), n=3
1	Патогенные энтеробактерии	5 культур	0
2	Е. coli-lac.(+)	4,3±0,15	4,0±0,02
3	Е. coli-lac.(-)	5,6±0,01	2,1±0,31
4	Е. coli гемолизирующие	5 культур	0
5	Citrobacter spp.	5,4±0,05*	3,1±0,23
6	Enterococcus spp.	8,3±0,43	7,2±0,04*
7	Staphylococcus aureus	2,3±0,04	1,1±0,01
8	Lactobacillus spp.	5,2±0,25	7,2±1,31**
9	Bifidobacterium spp.	6,3±0,16	8,1±0,26
10	Proteus spp.	0	0
11	Candida spp.	2,1±0,34	2,4±0,52
12	Клостридии	2,6±0,12	1,3±0,21

Примечание: * - Р <0,05; ** - Р <0,01

Из анализа данных таблицы 2 видно, что при наличии повышенного содержания цитробактерий (на 74,2%) по сравнению с контрольной группой, наблюдается снижение нормофлоры молочнокислых микроорганизмов лактобактерий и бифидобактерий - на 27,8% и 17,2%; повышается количество Enterococcus spp. на 15,3%; незначительно повышается количество E. coli-lac.(+).

Таблица 3 Микробиоценоз толстого отдела кишечника у кроликов при цитробактериозе в ЛПХ № 3, lg КОЕ/г

№ п/п	Наименование микроорганизмов	Группы животных
		1 (опытная), n=12	2 (контрольная), n=3
1	Патогенные энтеробактерии	7 культур	0
2	E. coli-lac.(+)	5,3+022	4,2+0,15
3	E. coli-lac.(-)	7 3+0 43	2,1+0,62*
4	Е. coli гемолизирующие	7 культур	0
5	Citrobacter spp.	7,1+0,31	2,2+0,12
6	Enterococcus spp.	8,2±0,67**	7,3+0,03
7	Staphylococcus aureus	2,2+0,12	2,0+0,33
8	Lactobacillus spp.	4,1+0,42	8,3+0,87**
9	Bifidobacterium spp.	6,2+0,07*	8,1+0,05
10	Proteus spp.	0	0
11	Candida spp.	1,2+0,03	1,3+0,37
12	Клостридии	2,4+0,51	2,1+0,06

Примечание: * - Р <0,05; ** - Р <0,01

Из анализа данных таблицы 3 видно, что при наличии повышенного содержания цитробактерий (на 69%) по сравнению с контрольной группой, наблюдается снижение нормофлоры молочнокислых микроорганизмов лактобактерий и бифидобактерий - на 50,6% и 22,2%; повышается количество Enterococcus spp. на 12,3%; незначительно повышается количество E. coli-lac.(+).

Заключение. Цитробактериоз кроликов - это инфекционное заболевание бактериальной природы, которое характеризуется расстройством желудочно-кишечного тракта, повышением температуры, отказом от корма, а иногда и гибелью животных. Возбудителем являются различные виды цитробактерий, основной - Citrobacter freundii. Исследование микробиоценоза толстого отдела кишечника в трёх ЛПХ Ставропольского края у 24 кроликов породы Советская шиншилла с признаками диареи выявило повышенное содержание Citrobacter spp. по сравнению с контрольными животными на 69,0-82,1%. При этом снизилось наличие молочнокислых микроорганизмов Lactobacillus spp. на 25,0-50,6%, Bifidobacterium spp. - на 10,822,2%. Повышение количества Enterococcus spp. на 12,3-16,4% и E. coli-lac.(+) может также способствовать расстройству пищеварительной функции организма животных. Мониторинг микробиоты позволит своевременно скорректировать нежелательные изменения нормофлоры и не допустить развитие дисбактериоза.

Список литературы:

1. Азнабаев, Г.К. Биологические свойства бактерий рода Citrobacter, выделенных при моно- и ассоциированных бактериальных инфекциях: автореф. дисс.канд. мед. наук/ Г.К. Азнабаев// Оренбург, 2003. 23 с.
2. Асадулина И.И., Галиуллина А.М. Микробиоценоз кишечника и микробиологические показатели мяса кроликов при ассоциативной болезни и после лечения// Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2011. № 4 (32). С. 134-136.
3. Бурцева Т.В. Экологические аспекты применения пробиотиков в ветеринарии// Аграрный вестник Урала. 2013. № 7. С. 15-17.
4. Гриценко В.А. Эндогенные бактериальные инфекции как фундаментальная проблема медицины и оптимизация подходов к их терапии и профилактике// Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал). 2013. № 3. 24 с.
5. Громова А.В. Биологический состав микрофлоры кишечника кроликов породы советская шиншилла в возрастном аспекте/ А.В. Громова, Г.А. Ноздрин, А.А. Леляк// Вестник НГАУ. 2015. 3 (36). С. 54-58.
6. Дансарунова О.С., Цыдыпов В.Ц. Применение композиционного препарата в кролиководстве// Вестник НГАУ. 2015. № 2 (35). С. 88-93.
7. Кудреватых И.А., Шумилина Н.Н. Оценка микробного пейзажа кишечника крольчат// Пермский аграрный вестник. - 2018. - №1(21). - С.21-24.
8. Макарова М.Н. Характеристика микрофлоры кишечника у человека и лабораторных животных/ М.Н. Макарова, К.Л. Крышень, А.А. Алякринская, В.Г. Макаров// Международный вестник ветеринарии. 2016. № 4. С. 86-94.
9. Мелентьев О.Н. Принципы лечения кроликов с болезнями желудочно-кишечного тракта// Кролиководство и звероводство. 2013. № 5. С. 29-31.
10. Омельченко Н.Н. Микробиоценоз желудочно-кишечного тракта кроликов при использовании кормовой пробиотической добавки «Бацелл-М»/ Н.Н. Омельченко, И.М. Калошкина, А.А. Лысенко// Ветеринария Кубани. 2017. №1. С. 17-19.
11. Пашкова, Т.Н. Роль факторов персистенции условно-патогенных микроорганизмов в инфекционном процессе: автореф:. доктор биол. наук:/ Т.Н. Пашкова// Уфа. 2018. С. 42.
12. Пономарёва Е.А., Воеводина Ю.А. Нормализация микрофлоры кишечника пробиотическими препаратами// Наука сегодня: задачи и пути из решения: материалы международной научно-практической конференции. 2018. С. 122-125.
13. Пульчаровская Л.П. Выделение бактерий рода Citrobacter/ Л.П. Пуль-чаровская, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин// Вестник Ульяновской ГСХА. 2017. № 3 (39). С.83.
14. Цыремпилова Н.А., Цыбикжапов А.Д. Влияние гемопрепарата на микробиоценоз желудочно-кишечного тракта кроликов и его практическая значимость в коррекции дисбиозов// Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова. 2011. № 4 (25). С.28-32.
15. Ozheredova, N.A. The influence of a complex of probiotic cultures oniIntensity of development the animals/ N.A. Ozheredova, E.V. Svetlakova, M.N. Verevkina, A.N. Simonov, N.V. Vasiliev// Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2016. - № 7 (2). - P. 1638-1642.

Резюме. Желудочно-кишечные заболевания бактериальной природы, вызванные микроорганизмами из сем. Enterobacteriaceae, периодически идентифицируются и являются одним из сдерживающих факторов эффективного разведения животных. Мониторинг микробиоценоза желудочно-кишечного тракта, изменений нормофлоры и наличия патогенных энтеробактерий, занесенных из внешней среды, необходим для обоснования этиологии расстройства желудочно-кишечного тракта. Исследования выполнялись в трёх личных подсобных хозяйствах Ставропольского края на кроликах породы Советская Шиншилла в возрасте 1-3 месяцев. Микробиологические исследования осуществлялись в научно-испытательной лаборатории кафедры эпизоотологии и микробиологии Ставропольского госагроуниверситета. Отбирали кроликов с расстройством желудочно-кишечного тракта: из 24 у 17 животных бактериологическим методом идентифицировали Citrobacter freundii. В каждом ЛПХ для контроля отобрали по 3 кролика без признаков заболевания. Цитробактериоз кроликов - это инфекционное заболевание бактериальной природы, которое характеризуется расстройством желудочно-кишечного тракта, повышением температуры, отказом от корма, а иногда и гибелью животных. Возбудителем являются различные виды цитробактерий, основной - С^гоЬасТег freundii. Исследование микробиоценоза толстого отдела кишечника у 24 кроликов породы Советская шиншилла с признаками диареи выявило повышенное содержание Citrobacter spp. по сравнению с контрольными животными на 69,0-82,1%. При этом снизилось наличие молочнокислых микроорганизмов Lactobacillus spp. на 25,0-50,6%, Bifidobacterium spp. - на 10,8-22,2%. Авто-ры считают, что повышение количества Enterococcus spp. - на 12,3-16,4% и E. coli-lac.(+) может также способствовать расстройству пищеварительной функции организма животных. Мониторинг микробиоты позволит своевременно скорректировать нежелательные изменения нормофлоры и не допустить развитие дисбактериоза.

Ключевые слова: кролики, цитробактериоз, микробиоценоз, кишечная микрофлора, толстый отдел кишечника, бактериологическая диагностика, С^гоЬасТег freundii, нормофлора, дисбактериоз, патогенные энтеробактерии.

Сведения об авторах:

Дыптан Ольга Николаевна, аспирант кафедры эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; тел.: 8-928-354-90-72; e-mail: olenka.martynenko95@mail.ru.

Светлакова Елена Валентиновна, кандидат биологических наук, доцент кафедры эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; тел.: 8-903-416-83-55; e-mail: alenka61219@mail.ru.

Веревкина Марина Николаевна, кандидат биологических наук, доцент кафедры эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; тел.: 8-919-741-40-67; e-mail: staffmwb@mail.ru.

Дмитриев Анатолий Федорович, доктор биологических наук, профессор, профессор кафедры эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; тел.: 8-962-018-74-75; e-mail: anatolidmitriev@yandex.ru.

Заерко Виктор Иванович, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; тел.: 8-919-111-89-62; e-mail: fvm-fvm@gmail.com.

Ответственный за переписку с редакцией: Ожередова Надежда Аркадьевна, доктор ветеринарных наук, доцент, заведующая кафедрой эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; тел.: 8-918-768-40-66; e-mail: ogeredova-sgau@mail.ru.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей