|
УДК 619:579:61634-078 Марченко Э.В. Луганский национальный аграрный университет, г. Луганск, Украина Введение. В питомнике, в условиях искусственно созданного биоценоза, иммунная система организма собак, лишившись влияния вирулентной микрофлоры, детренируется и оказывается неспособной выполнять свою прямую функцию по защите организма от проникновения чужеродных микробов. Именно поэтому, на фоне снижения резистентности организма животных чаще регистрируются желудочно-кишечные заболевания, в этиологии которых важную роль играют условно патогенные микроорганизмы, которые ранее считались сапрофитной микрофлорой. Выявление изменения видового состава и количественного соотношения кишечной микрофлоры, а также взаимоотношения между микроорганизмами, которые происходят в желудочно-кишечном тракте, позволит установить ведущую роль нормальной микрофлоры, которая играет регулирующую и защитную функцию в организме животного, а также изучить механизмы развития дисбиотических состояний у собак [1, 2, 3, 5]. Материалы и методы. Для проведения исследования от собак в возрасте от четырех недель до 12-NB лет с признаками дисбактериоза (диарея, вздутие живота, рвота, отказ от корма, обезвоживание) были отобраны пробы фекалий и биологический материал. У подопытных животных отбирали образцы фекалий для бактериологических исследований. Бактериологические исследования, а также изучение биологических свойств изолированных культур микроорганизмов проводили в лаборатории факторных инфекций кафедры эпизоотологии, патана-томии и судебной ветеринарии факультета ветеринарной медицины Луганского НАУ, а также на базе Луганской областной государственной лаборатории ветеринарной медицины. Роль бактериальной микрофлоры в этиологии дисбактериозов собак изучали общепринятыми методами бактериологических исследований клинического материала с использованием искусственных дифференциально-диагностических питательных сред: Эндо и МПА, МПА соляной, ЖСА, среда Клиглера, среда Сименса. Видовую и типовую принадлежность выделенных чистых культур определяли на основе изучения морфологических, культуральных и биохимических свойств [4]. Результаты исследований. С целью установления роли ассоциаций микроорганизмов в механизмах возникновения и развития желудочно-кишечных инфекций у собак проведены бактериологические исследования. Из внутренних органов 36-ти животных, павших в результате парвовироза, изолировано 228 культур 14 видов условно патогенных бактерий. Из изолированных культур микроорганизмов 98 были грамполо-жительными, а 130 - грамотрицательными. Чаще всего изолировали Staphylococcus aureus (68) и Escherichia coli (35); реже - Streptococcus faecalis (18), Morganella morganii (18), Pseudomonas aeruginosa (15), Staphylococcus epidermidis (12), Enterobacter aerogenes (12) и Proteus vulgaris (10); редко - Citrobacter freundii (9), Proteus mirabilis (7), Enterobacter cloacae (7), Klebsiella pneumoniae (7), Citrobacter koseri (7) и Acinetobacter calcoaceticus (3 культуры). Следует добавить, что по нашим исследованиям установлено, что парвовироз у собак в 100,0% случаев осложняется условно патогенными бактериями. Результаты анализа по изучению дисбактериоза кишечника у собак, больных парвовирусным энтеритом, осложненным ассоциациями условно патогенных бактерий, в зависимости от степени тяжести болезни приведены в таблице 1. Таблица 1. Изучение дисбактериоза кишечника у собак, больных парвовирусным энтеритом, осложненным ассоциациями условнопатогенных бактерий, в зависимости от степени тяжести болезни Род микроорганизма | Биометрические показатели | Клинически здоровые собаки, n=12 | Больные собаки с соответствующей степенью тяжести течения болезни | I,n=16 | II,n=13 | III,n = 7 | Bifidobacterium | M±m | 9,7±0,20 | 7,1±0,23*** | 5,1±0,41*** | 1,8±0,35*** | lim | 8,6-11,2 | 5,9-9,1 | 2,5-7,1 | 0-3,0 | Lactobacillus | M±m | 8,6±0,14 | 6,6±0,22*** | 3,9±0,29*** | 1,9±0,53*** | lim | 7,9-9,6 | 4,9-8,1 | 2,1-5,5 | 0-4,7 | Escherichia | M±m | 5,7±0,23 | 6,1±0,22 | 6,7±0,20** | 7,8±0,26*** | lim | 4,9-7,5 | 4,4-7,4 | 5,6-8,3 | 6,9-8,9 | Staphylococcus | M±m | 2,2±0,24 | 4,0±0,26*** | 4,1±0,34*** | 7,3±0,39*** | lim | 0-3,1 | 2,0-5,7 | 2,2-6,1 | 5,4-8,9 | Streptococcus | M±m | 4,9±0,29 | 4,8±0,32 | 6,6±0,28*** | 7,5±0,24*** | lim | 3,2-6,7 | 2,6-7,8 | 5,4-8,9 | 6,7-8,7 | Bacillus | M±m | 2,0±0,26 | 2,8±0,18* | 4,3±0,18*** | 5,2±0,42*** | lim | 0-3,9 | 1,5-4,2 | 3,2-5,1 | 3,9-7,3 | Enterobacter | M±m | 2,3±0,18 | 3,7±0,16*** | 4,2±0,27*** | 6,5±0,40*** | lim | 1,1-3,3 | 2,9-5,2 | 2,3-5,6 | 4,5-7,9 | Citrobacter | M±m | 2,2±0,25 | 3,4±0,23** | 4,2±0,20*** | 6,7±0,43*** | lim | 0-3,3 | 1,5-4,8 | 2,9-5,3 | 4,3-7,9 | Klebsiella | M±m | 2,7±0,23 | 4,1±0,18*** | 5,3±0,27*** | 6,4±0,39*** | lim | 1,1-3,7 | 2,9-5,2 | 3,3-6,7 | 5,2-8,1 | Proteus | M±m | 0 | 0,8±0,27 | 2,3±0,36*** | 3,4±0,41*** | lim | 0 | 0-3,4 | 0-4,5 | 1,9-5,5 | Pseudomonas | M±m | 0 | 1,5±0,27** | 2,8±0,43*** | 4,7±0,45*** | lim | 0 | 0-3,2 | 0-5,2 | 3,2-7,2 | Candida | M±m | 2,1±0,28 | 3,1±0,20** | 4,7±0,30*** | 5,8±0,28*** | lim | 0-3,3 | 1,9-4,5 | 2,9-6,4 | 4,5-6,8 | Концентрация бифидобактерий в фекалиях клинически здоровых и больных парвовирусным энтеритом собак при разных степенях тяжести течения заболевания существенно отличались между собой, что установлено анализом Крускала-Уоллиса (Н = 38,3; р<0,001). Установлено, что в фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненным ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, установили достоверное уменьшение концентрации бифидобактерий в 1,4 раза при I степени тяжести течения заболевания (U = 14,0; р<0,001), в 1,9 раза при II степени тяжести течения заболевания (U = 0, р <0,001), в 5,4 раза при Ill степени тяжести заболевания (U = 0; р<0,001). Также установлена достоверная корреляция (г = - 0,89; р<0,001) между концентрацией бифидобактерий в фекалиях больных собак и степенью тяжести течения заболевания. Установлено, что в фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненным ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное уменьшение количества бактерий рода Lactobacillus в 1,3 раза (U = 15,5; р<0,001) при I степени тяжести течения заболевания, в 2,2 раза (U = 0; р<0,001) при II степени тяжести, в 4,5 раза при Ill степени тяжести течения заболевания (U = 0; р<0,001). Также установлена достоверная корреляция (г = - 0,92; р<0,001) между количеством лактобактерий в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни. Расчетом критерия Манна-Уитни установлено, что у больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное повышение концентрации бактерий рода Escherichia в 1,2 раза при II степени тяжести заболевания (U = 26,5; р< 0,01), в 1,4 раза при Ill степени тяжести (U = 3,5; р<0,001). Также установлена достоверная корреляция (г = -0,32; р < 0,05) между концентрацией эшерихий в фекалиях больных собак и степенью тяжести течения заболевания. Расчетом критерия Манна-Уитни установлено, что у больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное повышение концентрации бактерий рода Staphylococcus в 1,8 раза при I степени тяжести течения болезни (U = 17,0; р<0,001), в 1,9 раза при II степени тяжести (U = 10,0 р<0,001), в 3,3 раза при lll степени (U = 0; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (г = 0,7; р<0,001) между концентрацией стафилококков в фекалиях больных собак и степенью тяжести течения заболевания. Расчетом критерия Манна-Уитни установлено, что у больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное повышение концентрации стрептококков в 1,4 раза при II степени тяжести течения (U = 14,0; р<0,001) в 1,5 раза при lll степени (U = 0,5; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (г = 0,68; р<0,001) между концентрацией стрептококков в фекалиях больных собак и степенью тяжести течения заболевания. Методами вариационной статистики (анализ Крускала-Уоллиса) установлено, что концентрация бактерий рода Bacillus в фекалиях собак различных групп значительно отличалась (Н = 30,5; р<0,001). Расчетом критерия Манна-Уитни установлено, что у больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, проявляли достоверное повышение концентрации бактерий рода Bacillus в 1,4 раза при I степени тяжести течения заболевания (U = 43,0; р< 0,05), в 2,2 раза при II степени тяжести (U = 4,0; р<0,001), в 2,6 раза при lll степени тяжести течения болезни (U = 0,5; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (г = 0,79; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Bacillus в фекалиях больных собак и сте-пентю тяжести течения заболевания. По концентрации бактерий рода Enterobacter в фекалиях клинически здоровых и больных собак установлена достоверная разница между всеми исследовательскими группами (Н = 33,5; р<0,001). В фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверный рост концентрации бактерий рода Enterobacter при I степени тяжести течения болезни в 1,6 раза, при II степени тяжести течения - в 1,8 раза и при lll степени - в 2,3 раза. Установлена достоверная корреляция (r = 0,81; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Enterobacter в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни. Концентрация бактерий рода Citrobacter в фекалиях клинически здоровых и больных собак достоверно отличалась между всеми исследовательскими группами (Н = 32,6; р<0,001). В фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверный рост концентрации бактерий рода Citrobacter при I степени тяжести течения заболевания в 1,6 раза, при II степени тяжести течения - в 1,9 раза и при III степени тяжести -в 3,1 раза. Установлена достоверная корреляция (r = 0,82; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Citrobacter в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни. Количество микроорганизмов рода Klebsiella в фекалиях клинически здоровых и больных собак достоверно отличалось между всеми исследовательскими группами (Н = 35,0; р<0,001). В фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, проявляли достоверный рост концентрации бактерий рода Klebsiella при I степени тяжести течения заболевания в 1,5 раза, при II степени тяжести - в 2,0 раза и при lll степени - в 2,4 раза. Установлена достоверная корреляция (r = 0,85; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Klebsiella в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни. В фекалиях клинически здоровых собак не изолировали бактерий рода Proteus. Однако в фекалиях больных осложненным парововирусным энтеритом собак при I, II и III степенях тяжести течения заболевания концентрация указанных микроорганизмов равнялась 0,8 ± 0,27; 2,3 ± 0,36 и 3,4 ± 0,41 lg КОЕ/см3, соответственно, что оказалось статистически значимым при анализе по критерию Крус-кала-Уоллиса (Н = 28,8; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (r = 0,77; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Proteus в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни. В фекалиях клинически здоровых собак также не изолировали бактерий рода Pseudomonas. Однако в фекалиях больных осложненным парововирусным энтеритом собак концентрация указанных микроорганизмов варьировала от 0 до 7,2 lg КОЕ/см3, что зависело от степени тяжести заболевания. Указанные изменения оказались статистически значимыми при анализе по критерию Крускала-Уоллиса (Н = 32,8; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (r = 0,82; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Pseudomonas в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни. Количество бактерий рода Candida в фекалиях клинически здоровых и больных парвовирусным энтеритом собак при разных степенях тяжести течения заболевания существенно отличались между собой, что установлено при анализе критерия Крускала-Уоллиса (Н = 33,4; р<0,001). Установлено, что в фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное уменьшение количества бактерий рода Candida в 1,5 раза (U = 39,5; р<0,01) при I степени тяжести течения заболевания, в 2,2 раза (U = 3,5; р<0,001) при II степени тяжести, в 2,8 раза при Ill степени тяжести течения болезни (U = 0; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (г = 0,83; р<0,001) между количеством бактерий рода Candida в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни. Заключение. Резюмируя изменения количества микроорганизмов в фекалиях собак, больных парвовирусным энтеритом, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, можно констатировать развитие дисбактериоза кишечника, который проявляется уменьшением концентрации лакто- и бифидобактерий и повышением количества эшерихий, стафило-, стрептококков, бацилл, энтеро- и цитробактеры, клебсиелл, протеус, псевдомонас и грибков рода кандида. Список литературы. - Апатенко В. М. Проблема паразитоценозов и задачи паразитоценоло-гии / В. М. Апатенко // Проблемы и перспективы паразитоценологии: Материалы 5 межсъездовской конференции паразитоценологов Украины (29-30 октября 1997 г.). - Харьков-Луганск. - 1997. - С. 4-10.
- Воецька О. 0. Удосконалення технологи виробництва комбiкормiв для собак: автореф. дис. на здобуття наук.ступеня канд. тех. наук: спец. 05.18.02 "Технолопязернових, бобових, круп’янихпродукпв та комбiкормiв" / О. 0. Воецька. - Одеса, 2007. - 15 с.
- Руденко П. А. Эволюционно экологические аспекты заболеваний животных, вызванных условно-патогенной микрофлорой / П. А. Руденко,В. А. До-ценко, А. Ф. Руденко. - Луганск: Ветеринарные науки, 2001. - С. 69-71.
- Определитель бактерий Берджи. В 2-х т. Т. 1: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Хоула, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уилльямса. - М.: Мир, 1997. - 800 с.
- Хан Э. Р. Микробиоценоз и имунитет при постнатальных инфекциях новорожденных / Э. Р. Хан // НИИ педиатрии Рос. АМН. - М., 1996. - С. 43.
Резюме. В настоящее время наблюдается тенденция к увеличению популяции собак, соответственно, и вопросы ветеринарного обслуживания встают более остро. В данной статье описаны результаты изучения роли бактериальной микрофлоры в этиологии дисбактериозов собак при парвовирусном энтерите различной степени тяжести течения заболевания. Применяли общепринятые методы бактериологических исследований клинического материала, с использованием искусственных дифференциально-диагностических питательных сред: Эндо и МПА, МПА соляной, ЖСА, среда Клиглера, среда Сименса. Видовую и типовую принадлежность выделенных чистых культур определяли на основе изучения морфологических, культуральных и биохимических свойств. Из внутренних органов 36 животных, павших в результате парвовироза, изолировано 228 культур 14 видов условно патогенных бактерий. Изучив изменения количества микроорганизмов в фекалиях собак, больных парвовирусным энтеритом, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, при различных степенях тяжести, установлено развитие дисбактериоза кишечника, который проявляется уменьшением концентрации лакто- и бифидобактерий и повышением количества эшерихий, стафило-, стрептококков, бацилл, энтеро- и цитробактеры, клебсиелл, протеус, псевдомонас и грибков рода кандида. При анализе критерия Крускала-Уоллиса установлена достоверная корреляция между концентрацией условно патогенных бактерий и степенью тяжести течения болезни. Ключевые слова: микрофлора, бактерии, парвовироз, условно патогенный, собаки, концентрация, степень тяжести, желудочно-кишечный тракт, критерий Крускала-Уоллиса, питательная среда, дисбактериоз, корреляция. Сведения об авторе: Марченко Элла Викторовна,ассистенткафедры заразных болезней, патанатомии и судебной ветеринарии Луганского национального аграрного университета;91008, Украина, г. Луганск, городок ЛНАУ; тел.: 095-801-19-91, e-mail: ella-marc@mail.ru - ответственный за переписку с редакцией.
|
|