Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта собак в зависимости от степени тяжести парвовироза

УДК 619:579:61634-078

Марченко Э.В. Луганский национальный аграрный университет, г. Луганск, Украина

Введение. В питомнике, в условиях искусственно созданного биоценоза, иммунная система организма собак, лишившись влияния вирулентной микрофлоры, детренируется и оказывается неспособной выполнять свою прямую функцию по защите организма от проникновения чужеродных микробов. Именно поэтому, на фоне снижения резистентности организма животных чаще регистрируются желудочно-кишечные заболевания, в этиологии которых важную роль играют условно патогенные микроорганизмы, которые ранее считались сапрофитной микрофлорой.

Выявление изменения видового состава и количественного соотношения кишечной микрофлоры, а также взаимоотношения между микроорганизмами, которые происходят в желудочно-кишечном тракте, позволит установить ведущую роль нормальной микрофлоры, которая играет регулирующую и защитную функцию в организме животного, а также изучить механизмы развития дисбиотических состояний у собак [1, 2, 3, 5].

Материалы и методы. Для проведения исследования от собак в возрасте от четырех недель до 12-NB лет с признаками дисбактериоза (диарея, вздутие живота, рвота, отказ от корма, обезвоживание) были отобраны пробы фекалий и биологический материал. У подопытных животных отбирали образцы фекалий для бактериологических исследований.

Бактериологические исследования, а также изучение биологических свойств изолированных культур микроорганизмов проводили в лаборатории факторных инфекций кафедры эпизоотологии, патана-томии и судебной ветеринарии факультета ветеринарной медицины Луганского НАУ, а также на базе Луганской областной государственной лаборатории ветеринарной медицины.

Роль бактериальной микрофлоры в этиологии дисбактериозов собак изучали общепринятыми методами бактериологических исследований клинического материала с использованием искусственных дифференциально-диагностических питательных сред: Эндо и МПА, МПА соляной, ЖСА, среда Клиглера, среда Сименса. Видовую и типовую принадлежность выделенных чистых культур определяли на основе изучения морфологических, культуральных и биохимических свойств [4].

Результаты исследований. С целью установления роли ассоциаций микроорганизмов в механизмах возникновения и развития желудочно-кишечных инфекций у собак проведены бактериологические исследования. Из внутренних органов 36-ти животных, павших в результате парвовироза, изолировано 228 культур 14 видов условно патогенных бактерий.

Из изолированных культур микроорганизмов 98 были грамполо-жительными, а 130 - грамотрицательными. Чаще всего изолировали Staphylococcus aureus (68) и Escherichia coli (35); реже - Streptococcus faecalis (18), Morganella morganii (18), Pseudomonas aeruginosa (15), Staphylococcus epidermidis (12), Enterobacter aerogenes (12) и Proteus vulgaris (10); редко - Citrobacter freundii (9), Proteus mirabilis (7), Enterobacter cloacae (7), Klebsiella pneumoniae (7), Citrobacter koseri (7) и Acinetobacter calcoaceticus (3 культуры). Следует добавить, что по нашим исследованиям установлено, что парвовироз у собак в 100,0% случаев осложняется условно патогенными бактериями.

Результаты анализа по изучению дисбактериоза кишечника у собак, больных парвовирусным энтеритом, осложненным ассоциациями условно патогенных бактерий, в зависимости от степени тяжести болезни приведены в таблице 1.

Таблица 1. Изучение дисбактериоза кишечника у собак, больных парвовирусным энтеритом, осложненным ассоциациями условнопатогенных бактерий, в зависимости от степени тяжести болезни

Род микро­организ­ма

Био­метри­ческие пока­затели

Клини­чески здоровые собаки,
n=12

Больные собаки с соответствующей степенью тяжести течения болезни

I,n=16

II,n=13

III,n = 7

Bifidobac­terium

M±m

9,7±0,20

7,1±0,23***

5,1±0,41***

1,8±0,35***

lim

8,6-11,2

5,9-9,1

2,5-7,1

0-3,0

Lacto­bacillus

M±m

8,6±0,14

6,6±0,22***

3,9±0,29***

1,9±0,53***

lim

7,9-9,6

4,9-8,1

2,1-5,5

0-4,7

Escheri­chia

M±m

5,7±0,23

6,1±0,22

6,7±0,20**

7,8±0,26***

lim

4,9-7,5

4,4-7,4

 5,6-8,3

6,9-8,9

Staphylo­coccus

M±m

2,2±0,24

4,0±0,26***

4,1±0,34***

7,3±0,39***

lim

0-3,1

2,0-5,7

2,2-6,1

5,4-8,9

Strepto­coccus

M±m

4,9±0,29

4,8±0,32

6,6±0,28***

7,5±0,24***

lim

3,2-6,7

2,6-7,8

5,4-8,9

6,7-8,7

Bacillus

M±m

2,0±0,26

2,8±0,18*

4,3±0,18***

5,2±0,42***

lim

0-3,9

1,5-4,2

3,2-5,1

3,9-7,3

Enterobacter

M±m

2,3±0,18

3,7±0,16***

4,2±0,27***

6,5±0,40***

lim

1,1-3,3

2,9-5,2

2,3-5,6

4,5-7,9

Citrobacter

M±m

2,2±0,25

3,4±0,23**

4,2±0,20***

6,7±0,43***

lim

0-3,3

1,5-4,8

2,9-5,3

4,3-7,9

Klebsi­ella

M±m

2,7±0,23

4,1±0,18***

5,3±0,27***

6,4±0,39***

lim

1,1-3,7

2,9-5,2

3,3-6,7

5,2-8,1

Proteus

M±m

0

0,8±0,27

2,3±0,36***

3,4±0,41***

lim

0

0-3,4

0-4,5

1,9-5,5

Pseudo­monas

M±m

0

1,5±0,27**

2,8±0,43***

4,7±0,45***

lim

0

0-3,2

0-5,2

3,2-7,2

Candida

M±m

2,1±0,28

3,1±0,20**

4,7±0,30***

5,8±0,28***

lim

0-3,3

1,9-4,5

2,9-6,4

4,5-6,8

Концентрация бифидобактерий в фекалиях клинически здоровых и больных парвовирусным энтеритом собак при разных степенях тяжести течения заболевания существенно отличались между собой, что установлено анализом Крускала-Уоллиса (Н = 38,3; р<0,001). Установлено, что в фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненным ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, установили достоверное уменьшение концентрации бифидобактерий в 1,4 раза при I степени тяжести течения заболевания (U = 14,0; р<0,001), в 1,9 раза при II степени тяжести течения заболевания (U = 0, р <0,001), в 5,4 раза при Ill степени тяжести заболевания (U = 0; р<0,001). Также установлена достоверная корреляция (г = - 0,89; р<0,001) между концентрацией бифидобактерий в фекалиях больных собак и степенью тяжести течения заболевания.

Установлено, что в фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненным ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное уменьшение количества бактерий рода Lactobacillus в 1,3 раза (U = 15,5; р<0,001) при I степени тяжести течения заболевания, в 2,2 раза (U = 0; р<0,001) при II степени тяжести, в 4,5 раза при Ill степени тяжести течения заболевания (U = 0; р<0,001). Также установлена достоверная корреляция (г = - 0,92; р<0,001) между количеством лактобактерий в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни.

Расчетом критерия Манна-Уитни установлено, что у больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное повышение концентрации бактерий рода Escherichia в 1,2 раза при II степени тяжести заболевания (U = 26,5; р< 0,01), в 1,4 раза при Ill степени тяжести (U = 3,5; р<0,001). Также установлена достоверная корреляция (г = -0,32; р < 0,05) между концентрацией эшерихий в фекалиях больных собак и степенью тяжести течения заболевания.

Расчетом критерия Манна-Уитни установлено, что у больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное повышение концентрации бактерий рода Staphylococcus в 1,8 раза при I степени тяжести течения болезни (U = 17,0; р<0,001), в 1,9 раза при II степени тяжести (U = 10,0 р<0,001), в 3,3 раза при lll степени (U = 0; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (г = 0,7; р<0,001) между концентрацией стафилококков в фекалиях больных собак и степенью тяжести течения заболевания.

Расчетом критерия Манна-Уитни установлено, что у больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное повышение концентрации стрептококков в 1,4 раза при II степени тяжести течения (U = 14,0; р<0,001) в 1,5 раза при lll степени (U = 0,5; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (г = 0,68; р<0,001) между концентрацией стрептококков в фекалиях больных собак и степенью тяжести течения заболевания.

Методами вариационной статистики (анализ Крускала-Уоллиса) установлено, что концентрация бактерий рода Bacillus в фекалиях собак различных групп значительно отличалась (Н = 30,5; р<0,001). Расчетом критерия Манна-Уитни установлено, что у больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, проявляли достоверное повышение концентрации бактерий рода Bacillus в 1,4 раза при I степени тяжести течения заболевания (U = 43,0; р< 0,05), в 2,2 раза при II степени тяжести (U = 4,0; р<0,001), в 2,6 раза при lll степени тяжести течения болезни (U = 0,5; р<0,001).

Установлена достоверная корреляция (г = 0,79; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Bacillus в фекалиях больных собак и сте-пентю тяжести течения заболевания.

По концентрации бактерий рода Enterobacter в фекалиях клинически здоровых и больных собак установлена достоверная разница между всеми исследовательскими группами (Н = 33,5; р<0,001). В фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверный рост концентрации бактерий рода Enterobacter при I степени тяжести течения болезни в 1,6 раза, при II степени тяжести течения - в 1,8 раза и при lll степени - в 2,3 раза. Установлена достоверная корреляция (r = 0,81; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Enterobacter в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни.

Концентрация бактерий рода Citrobacter в фекалиях клинически здоровых и больных собак достоверно отличалась между всеми исследовательскими группами (Н = 32,6; р<0,001). В фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверный рост концентрации бактерий рода Citrobacter при I степени тяжести течения заболевания в 1,6 раза, при II степени тяжести течения - в 1,9 раза и при III степени тяжести -в 3,1 раза. Установлена достоверная корреляция (r = 0,82; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Citrobacter в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни.

Количество микроорганизмов рода Klebsiella в фекалиях клинически здоровых и больных собак достоверно отличалось между всеми исследовательскими группами (Н = 35,0; р<0,001). В фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, проявляли достоверный рост концентрации бактерий рода Klebsiella при I степени тяжести течения заболевания в 1,5 раза, при II степени тяжести - в 2,0 раза и при lll степени - в 2,4 раза. Установлена достоверная корреляция (r = 0,85; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Klebsiella в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни.

В фекалиях клинически здоровых собак не изолировали бактерий рода Proteus. Однако в фекалиях больных осложненным парововирусным энтеритом собак при I, II и III степенях тяжести течения заболевания концентрация указанных микроорганизмов равнялась 0,8 ± 0,27; 2,3 ± 0,36 и 3,4 ± 0,41 lg КОЕ/см3, соответственно, что оказалось статистически значимым при анализе по критерию Крус-кала-Уоллиса (Н = 28,8; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (r = 0,77; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Proteus в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни.

В фекалиях клинически здоровых собак также не изолировали бактерий рода Pseudomonas. Однако в фекалиях больных осложненным парововирусным энтеритом собак концентрация указанных микроорганизмов варьировала от 0 до 7,2 lg КОЕ/см3, что зависело от степени тяжести заболевания. Указанные изменения оказались статистически значимыми при анализе по критерию Крускала-Уоллиса (Н = 32,8; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (r = 0,82; р<0,001) между концентрацией бактерий рода Pseudomonas в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни.

Количество бактерий рода Candida в фекалиях клинически здоровых и больных парвовирусным энтеритом собак при разных степенях тяжести течения заболевания существенно отличались между собой, что установлено при анализе критерия Крускала-Уоллиса (Н = 33,4; р<0,001). Установлено, что в фекалиях больных парвовирусным энтеритом собак, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, по сравнению с клинически здоровыми, выявляли достоверное уменьшение количества бактерий рода Candida в 1,5 раза (U = 39,5; р<0,01) при I степени тяжести течения заболевания, в 2,2 раза (U = 3,5; р<0,001) при II степени тяжести, в 2,8 раза при Ill степени тяжести течения болезни (U = 0; р<0,001). Установлена достоверная корреляция (г = 0,83; р<0,001) между количеством бактерий рода Candida в фекалиях собак и степенью тяжести течения болезни.

Заключение. Резюмируя изменения количества микроорганизмов в фекалиях собак, больных парвовирусным энтеритом, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, можно констатировать развитие дисбактериоза кишечника, который проявляется уменьшением концентрации лакто- и бифидобактерий и повышением количества эшерихий, стафило-, стрептококков, бацилл, энтеро- и цитробактеры, клебсиелл, протеус, псевдомонас и грибков рода кандида.

Список литературы.

  1. Апатенко В. М. Проблема паразитоценозов и задачи паразитоценоло-гии / В. М. Апатенко // Проблемы и перспективы паразитоценологии: Материалы 5 межсъездовской конференции паразитоценологов Украины (29-30 октября 1997 г.). - Харьков-Луганск. - 1997. - С. 4-10.
  2. Воецька О. 0. Удосконалення технологи виробництва комбiкормiв для собак: автореф. дис. на здобуття наук.ступеня канд. тех. наук: спец. 05.18.02 "Технолопязернових, бобових, круп’янихпродукпв та комбiкормiв" / О. 0. Воецька. - Одеса, 2007. - 15 с.
  3. Руденко П. А. Эволюционно экологические аспекты заболеваний животных, вызванных условно-патогенной микрофлорой / П. А. Руденко,В. А. До-ценко, А. Ф. Руденко. - Луганск: Ветеринарные науки, 2001. - С. 69-71.
  4. Определитель бактерий Берджи. В 2-х т. Т. 1: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Хоула, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уилльямса. - М.: Мир, 1997. - 800 с.
  5. Хан Э. Р. Микробиоценоз и имунитет при постнатальных инфекциях новорожденных / Э. Р. Хан // НИИ педиатрии Рос. АМН. - М., 1996. - С. 43.

Резюме. В настоящее время наблюдается тенденция к увеличению популяции собак, соответственно, и вопросы ветеринарного обслуживания встают более остро. В данной статье описаны результаты изучения роли бактериальной микрофлоры в этиологии дисбактериозов собак при парвовирусном энтерите различной степени тяжести течения заболевания. Применяли общепринятые методы бактериологических исследований клинического материала, с использованием искусственных дифференциально-диагностических питательных сред: Эндо и МПА, МПА соляной, ЖСА, среда Клиглера, среда Сименса. Видовую и типовую принадлежность выделенных чистых культур определяли на основе изучения морфологических, культуральных и биохимических свойств. Из внутренних органов 36 животных, павших в результате парвовироза, изолировано 228 культур 14 видов условно патогенных бактерий. Изучив изменения количества микроорганизмов в фекалиях собак, больных парвовирусным энтеритом, осложненном ассоциациями условно патогенных бактерий, при различных степенях тяжести, установлено развитие дисбактериоза кишечника, который проявляется уменьшением концентрации лакто- и бифидобактерий и повышением количества эшерихий, стафило-, стрептококков, бацилл, энтеро- и цитробактеры, клебсиелл, протеус, псевдомонас и грибков рода кандида. При анализе критерия Крускала-Уоллиса установлена достоверная корреляция между концентрацией условно патогенных бактерий и степенью тяжести течения болезни.

Ключевые слова: микрофлора, бактерии, парвовироз, условно патогенный, собаки, концентрация, степень тяжести, желудочно-кишечный тракт, критерий Крускала-Уоллиса, питательная среда, дисбактериоз, корреляция.

Сведения об авторе: Марченко Элла Викторовна,ассистенткафедры заразных болезней, патанатомии и судебной ветеринарии Луганского национального аграрного университета;91008, Украина, г. Луганск, городок ЛНАУ; тел.: 095-801-19-91, e-mail: ella-marc@mail.ru - ответственный за переписку с редакцией.

http://vetkuban.com/num3_201608.html