Moraxella spp. у собак и кошек с респираторными и урогенитальными патологиями: бактериологический скрининг и оценка зоопатогенной роли

УДК 619:616.98:579.842:636.7+636.8
DOI 10.33861/2071-8020-2025-6-25-28

Оригинальное эмпирическое исследование

Пименов Н. В., Бузмакова Н. А., Смирнова Е. А. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего
образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии – МВА имени К.И. Скрябина»,
г. Москва

Аннотация. Представители рода Moraxella традиционно известны как комменсалы слизистых оболочек, однако среди них есть представители оппортунистических патогенов. Несмотря на отдельные сведения об инцидентности при инфекционно-воспалительных патологиях животных-компаньонов идентификации бактерий этого рода, остается до конца неопределенным их вклад в этиологию и патогенез, в частности респираторных и урогенитальных заболеваний у собак и кошек. Целью работы явилось изучение распространённости Moraxella spp., их видового состава и ассоциативной микрофлоры у животных-компаньонов с пиелонефритами и респираторной/ ЛОР-патологией в условиях ветеринарных клиник и питомников. Обследовано 20 животных (10 собак и 10 кошек) с клиническими признаками инфекций верхних и нижних дыхательных путей и/или урогенитального тракта. Отбирали мочу (цистоцентез, катетеризация, моча из почечной лоханки), биоптаты и аспираты из среднего и внутреннего уха, бронхоальвеолярный лаваж, биоптаты поражённых тканей и содержимое жёлчного пузыря. Проводили бактериологический посев на стандартные питательные среды с полуколичественной оценкой роста, индикацию и идентификацию Moraxella spp. по морфологическим и биохимическим признакам, MALDI-TOF MS, а также определение антибиотикочувствительности. Moraxella spp. были выявлены в 5 из 20 (25%) случаев: у 3 кошек (аспираты из уха, бронхоальвеолярный лаваж, биоптат тканей) и у 2 собак (аспират среднего уха, биоптат жёлчного пузыря). Определены виды M. canis и M. osloensis. Во всех случаях пиелонефрита и инфекций мочевыводящих путей у собак и кошек Moraxella spp. не обнаружены; эти процессы ассоциировались преимущественно с Escherichia coli и Enterococcus faecalis. Морфологические и фенотипические характеристики штаммов Moraxella spp., а также их участие в полимикробных ассоциациях позволяют рассматривать этот род как важный компонент ассоциированных респираторных и гепатобилиарных/ЛОР-инфек-ций у животных-компаньонов, требующий учёта при построении диагностических и терапевтических алгоритмов.

Ключевые слова: собаки, кошки, пиелонефрит, инфекции мочевыводящих путей, респираторные заболевания, Moraxella canis, Moraxella osloensis, бактериологический посев, антибиотикочувствительность, ассоциированная инфекция.

Инфекционные заболевания мочевыделительной и дыхательной систем остаются одной из наиболее частых причин обращения владельцев собак и кошек в ветеринарные клиники. Пиелонефрит у животных-компаньонов рассматривается как потенциально угрожающее жизни состояние, сопровождающееся лихорадкой, болью, нарушением функции почек, а также высокой частотой назначения системных антимикробных препаратов. По данным международных рекомендаций ISCAID и клинических обзоров, бактериальные инфекции мочевыделительного тракта (ИМП) составляют значимую долю обращений, при этом в структуре возбудителей преобладают энтеробактерии и стафилококки, но отмечается участие и менее изученных родов микроорганизмов [1, 3]. Российские данные также подтверждают разнообразие микробиоты при патологии мочевыделительной системы мелких домашних животных и актуальность поиска ассоциированных и условно-патогенных агентов [2].

Современный подход к диагностике ИМП и пиелонефритов у собак и кошек предполагает обязательное выполнение бактериологического посева мочи, оценку чувствительности к антимикробным препаратам и по возможности – корреляцию с клинико-лабораторными признаками поражения паренхимы почек [1, 3, 4]. При этом в рутинной практике основное внимание уделяется традиционным «ядровым» возбудителям, тогда как редкие или медленно растущие микроорганизмы, в том числе представители рода Moraxella, могут оставаться недооценёнными либо ошибочно отнесёнными к «фоновой» флоре. Это создаёт риск неполной оценки этиологической структуры пиелонефритов и может влиять на выбор терапии и прогноз.

Респираторные заболевания собак, включая трахеобронхиты, бронхопневмонию и хронические формы патологии верхних дыхательных путей, также характеризуются полиэтиологичностью и частым формированием бактериально-ассоциированных осложнений. Значимое место в структуре проблем у собак занимают хронический наружный отит и сопутствующее вовлечение носоглотки и слуховой трубы, что отражается в высоком уровне повторных обращений и устойчивости к терапии [5, 6]. Показано, что при рецидивирующем наружном отите и хронических воспалительных процессах микробиом кожи и слухового прохода животных существенно изменяется, формируются устойчивые микробные ассоциации и биоплёнки, что способствует сохранению очага инфекции и росту антибиотикорезистентности [6, 7, 8].

Ряд исследований, выполненных с использованием методов высокопроизводительного секвенирования, показал, что бактериальные сообщества кожи, наружного слухового прохода и дыхательных путей собак значительно более разнообразны, чем предполагалось ранее, и включают помимо классических возбудителей (Staphylococcus, Pseudomonas, Enterococcus и др.) широкий спектр условно-патогенных микроорганизмов, в том числе рода Moraxella [7, 8]. Это ставит вопрос о роли таких микроорганизмов как маркеров дисбиотических состояний и/или активных участников патологического процесса.

Род Moraxella включает грамотрицательные оксидазоположительные коккобациллы, колонизирующие слизистые оболочки дыхательного и мочеполового тракта человека и животных. Наиболее изученным представителем является Moraxella catarrhalis, в настоящее время признанная значимым респираторным патогеном человека, ассоциированным с отитом, синуситом и обострениями хронической обструктивной болезни лёгких [9]. У сельскохозяйственных животных М. bovis рассматривается как ведущий этиологический агент инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, что подчёркивает зоопатогенный потенциал отдельных видов Moraxella и их способность вызывать тяжёлые воспалительные процессы на слизистых и роговице [13].

В последние годы накапливаются сведения о других видах Moraxella, проявляющих патогенные свойства у иммунокомпро-метированных пациентов. Так, Moraxella osloensis описана как возможный возбудитель инфекционного эндокардита у людей [10], а также как этиологический агент фибринозного перикардита у кошки [11]. Для Moraxella canis, ранее считавшейся преимущественно комменсальной флорой, показана связь с язвенными поражениями роговицы у собак [12]. Эти наблюдения свидетельствуют о том, что представители рода Moraxella способны выходить за рамки «сапрофитной» флоры и занимать место в структуре инвазивных и потенциально тяжёлых инфекций у животных-компаньонов.

Несмотря на это, данные о распространённости и клинико-микробиологических характеристиках Moraxella spp. при пиелонефритах и респираторных заболеваниях собак и кошек крайне ограничены, а систематические исследования в условиях ветеринарных клиник и питомников практически отсутствуют. В большинстве публикаций внимание сосредоточено либо на отдельных клинических случаях, либо на патологии у сельскохозяйственных животных [9, 10, 13]. Отсутствует чёткое представление о частоте выделения моракселл из патологического материала при урогенитальных и респираторных синдромах у животных-компаньонов, их ассоциативном микробном окружении, биологических свойствах и профиле чувствительности к антимикробным препаратам.

В этих условиях возрастает практическая значимость скрининговых бактериологических исследований патологического и клинического материала (моча, содержимое почечных лоханок, смывы из дыхательных путей и др.) с целенаправленной индикацией Moraxella spp., их видовой идентификацией и оценкой ассоциативного микробного представительства. Дополнительный интерес представляет изучение биологических свойств и патогенности выделенных штаммов с привлечением экспериментальных моделей, что позволяет уточнить их зоопатогенную роль и потенциальные риски для животных-компаньонов и человека.

Целью стал анализ инцидентности выделения и зоопатоген-ную роль Moraxella spp. при пиелонефритах и респираторных патологиях у собак и кошек в условиях ветеринарных клиник и питомников на основе: стандартизированного отбора проб пато-логического/клинического материала, проведения скрининговых бактериологических исследований, индикации и видовой идентификации моракселл, изучения ассоциативного представительства микрофлоры, оценки биологических свойств и патогенности выделенных штаммов.

Материалы и методы исследований. В анализ клинико-микробиологического исследования. включено 20 животных-компаньонов – 10 собак и 10 кошек, поступавших в частные ветеринарные клиники и питомники (Москва и Московская область) с признаками респираторных и/или урогенитальных заболеваний.

Все бактериологические исследования и последующий анализ изолятов Moraxella spp. проводились на кафедре иммунологии и биотехнологии ФГБОУ ВО «МГАВМиБ – МВА имени К. И. Скрябина» в микробиологической лаборатории кафедры с использованием стандартного набора диагностического оборудования (термостаты, ламинарный бокс, CO2-инкубатор, центрифуги, микроскопы, масс-спектрометр MALDI-TOF).

Исследование носило наблюдательный характер, проводилось на спонтанно заболевших животных; дополнительных экспериментов на лабораторных животных не выполнялось. Все диагностические манипуляции были согласованы с владельцами животных в рамках стандартной клинической практики.

В исследование включали собак и кошек с клиническими признаками поражения мочевыводящих путей (дизурия, полла-киурия, гематурия, повышение температуры тела, изменения в общем анализе мочи) и подтверждённым/предполагаемым пиелонефритом по совокупности клинико-лабораторных данных [1, 2, 3, 4]; с клиническими признаками респираторной и/ или ЛОР-патологии (кашель, одышка, выделения из носа, ринит, конъюнктивит, признаки бронхопневмонии, наружного/среднего отита, гепатобилиарной патологии) [5, 6, 7, 8]. Включались как амбулаторные пациенты, так и животные из условий скученного содержания (питомники, приюты, гостиницы для животных). Возраст, пол, порода, анамнез (включая сведения о предшествующей антибактериальной терапии) фиксировались в индивидуальных картах.

Отбор материала проводился с соблюдением правил асептики и руководств по диагностике бактериальных инфекций мочевыводящих путей и респираторных заболеваний у мелких домашних животных [1, 5, 7]. Фрагменты поражённых тканей и содержимое жёлчного пузыря – при проведении хирургических вмешательств по поводу гепатобилиарной или другой патологии.

Бактериологические исследования и индикацию Moraxella spp. При первичном скрининге всех проб проводили на стандартный набор питательных сред: кровяной агар (5-10% де-фибринированной крови), шоколадный агар; агар Мак-Конки; дополнительные селективные и/или хромогенные среды (для энтеробактерий, стафилококков, энтерококков и др.). Чашки инкубировали при 35-37°С в течение 24-48 часов в атмосфере воздуха; для требовательных штаммов – в атмосфере, обогащённой до 5% CO2. Для всех выделенных колоний проводили микроскопию мазков, окрашенных по Граму; предварительную оценку морфологических и тинкториальных признаков; первичные биохимические тесты (каталазная и оксидазная активность, рост на селективных средах и др.).

Индикация Moraxella spp. основывалась на совокупности признаков: мелкие грамотрицательные кокки/коккобациллы (часто диплококки) без спор и капсул, неподвижные, оксидаза- и каталазоположительные, с характерной морфологией колоний на кровяном/шоколадном агаре. Подозрительные колонии выделяли в чистую культуру и далее направляли на масс-спектрометрическая идентификация (MALDI-TOF MS).

Чувствительность выделенных изолятов (включая Moraxella spp., энтеробактерии, стафилококки, энтерококки и др.) к антимикробным препаратам оценивали диско-диффузионным методом на агаре Мюллера-Хинтона с использованием коммерческих наборов бумажных дисков.

Во всех пробах, где выделялись Moraxella spp., проводили детальное описание состава сопутствующей микрофлоры: перечень видов микроорганизмов, выделенных из данного образца; полуколичественная оценка роста; выделение типов ассоциаций: монокультура Moraxella, простые (2-3 вида) и сложные (? 4 видов) ассоциации. Полученные данные использовали далее при анализе инцидентности, структуры микробных ассоциаций и обсуждении возможной роли Moraxella spp. в патогенезе респираторных и урогенитальных заболеваний.

Статистическую обработку проводили с помощью стандартных офисных пакетов (Microsoft Excel). Рассчитывали долю животных, у которых выделены Moraxella spp., среди всей выборки и отдельно среди собак и кошек, а также частоту выявления различных видов бактерий и типов микробных ассоциаций. Результаты представляли в виде абсолютных значений (n) и относительных величин (%). При необходимости для сравнения долей применяли критерий ?? с уровнем значимости p < 0,05.

Результаты исследований и их обсуждение. В совокупности из 20 обследованных животных (10 собак и 10 кошек) Moraxella spp. были выделены у 5 (25%): у кошек 3 из 10 (30%) Moraxella osloensis (бронхоальвеолярный лаваж); Moraxella canis (аспират из уха); Moraxella canis (биоптат поражённых тканей); у собак 2 из 10 (20%) Moraxella canis (аспират среднего уха); Moraxella osloensis (содержимое жёлчного пузыря при гепатобилиарной патологии).

Таким образом, в реальных клинических условиях были идентифицированы два вида – M. canis и M. osloensis, что согласуется с единичными описаниями их оппортунистической патогенности у животных-компаньонов [10, 11, 12].

Урогенитальные случаи: Moraxella spp. не выявлены. Во всех исследованных пробах мочи и материала из верхних отделов мочевыводящих путей (моча из мочевого пузыря, из почечных лоханок) роста Moraxella spp. не отмечено. Спектр возбудителей урогенитальной патологии соответствовал «классическому» для собак и кошек [1, 2, 3]:

• Escherichia coli как доминирующий уропатоген;
• Enterococcus faecalis – частый компонент при осложнённом или хроническом течении;
• единичные находки других грамположительных и грамотри-цательных бактерий.

Это подтверждает, что в рамках данной выборки Moraxella spp. не играли роли уропатогенов, и поддерживает данные рекомендаций ISCAID и клинических обзоров, где род Moraxella не фигурирует в числе типичных возбудителей ИМП у мелких домашних животных [1, 2, 3], таким образом, при пиелонефритах и ИМП основной диагностический и терапевтический фокус остаётся на E. coli и энтерококках, а Moraxella в рутинных посевах мочи, по крайней мере в схожих условиях, ожидать не приходится

В пяти Moraxella-позитивных случаях возбудитель был обнаружен в нерутинных биотопах: нижние дыхательные пути (бронхоальвеолярный лаваж); ухо (аспираты при отите); поражённые мягкие ткани; содержимое жёлчного пузыря. То есть Moraxella в нашей серии проявляли себя как участники воспалительного процесса в респираторной, ЛОР- и гепатобилиарной зонах, но не в мочевыделительной системе, что согласуется с литературными данными:

• M. osloensis описана как оппортунистический возбудитель инвазивных процессов (эндокардит, перикардит) у человека и кошек [10, 11];
• M. canis ассоциирована с поражениями глаз и ЛОР-зоны у собак [12];
• у крупного рогатого скота представители рода Moraxella (M. bovis, M. bovoculi) давно признаны важными патогенами глаз [13].

Наши данные подтверждают, что у собак и кошек клинически значимая Moraxella находится прежде всего на слизистых и в органах, анатомически связанных с дыхательной и пищеварительной системами, а не в мочевых путях. Во всех пяти Moraxella-позитивных случаях возбудитель выявлялся в составе микробных ассоциаций, а не в виде монокультуры.

Типичные сочетания при отите – M. canis + Malassezia pachydermatis (бактериально-дрожжевая ассоциация, характерная для хронического наружного/среднего отита [5, 6, 7, 8]); при поражении лёгких – M. osloensis на фоне другой условно-патогенной флоры дыхательных путей; при поражении мягких тканей – M. canis в составе смешанной бактериальной популяции; при гепатобилиарном процессе – M. osloensis вместе с другими микроорганизмами (по протоколам). Таким образом, Moraxella spp. редко доминируют в посеве, чаще вплетены в уже существующее полимикробное сообщество. Это согласуется с данными по M. catarrhalis у человека, которая участвует в биоплёночных сообществах и взаимодействует с другими респираторными патогенами [9], а также с микробиомными исследованиями кожи и ушного канала собак [7, 8].

С практической точки зрения это значит, что при интерпретации посевов нельзя автоматически считать Moraxella «случайной находкой»: её роль нужно оценивать в контексте всей микробной ассоциации и клиники (тяжесть процесса, хрониза-ция, рецидивы).

По антибиотикограммам, выполненным диско-диффузионным методом, штаммы Moraxella spp. в большинстве случаев были чувствительны к ряду ?-лактамов (особенно к защищённым аминопенициллинам); чувствительны к тетрациклинам, ко-тримоксазолу; чувствительность к фторхинолонам варьировала (у части изолятов отмечалось снижение чувствительности). Выраженных картин широкой множественной устойчивости, сопоставимой с наиболее проблемными штаммами M. catarrhalis у людей [9], мы не увидели, но небольшая выборка не позволяет делать окончательные выводы. Исходя из вышеизложенного можно предположить, что если Moraxella spp. выделена из клинически значимого биотопа, эмпирическая терапия должна быть начата, но окончательный выбор препарата лучше всегда корректировать по антибиотикограмме.

Заключение. При пиелонефритах и ИМП Moraxella не участвовала. На практике при урогенитальной патологии у собак и кошек в первую очередь основными целями остаются E. coli и другие уропатогены [1, 2, 3]. При респираторных, ЛОР- и гепатобилиарных процессах Moraxella появлялась как компонент ассоциированной инфекции. Это укладывается в концепцию оппортунистического зоопатогена, описанную в клинических случаях M. osloensis и M. canis [10, 11, 12], и перекликается с классическим примером M. bovis у крупного рогатого скота [13]. В условиях уже нарушенного местного иммунитета (отит, бронхопневмония, гепатобилиарная патология, предшествующая АБ-терапия) Moraxella способна: поддерживать хроническое воспаление, участвовать в формировании устойчивых микробных сообществ, усложнять выбор терапии. При выделении Moraxella spp. из глубокого клинического материала (БАЛ, содержимое полых органов при операции, аспират среднего уха) в заметной концентрации, на фоне выраженной клиники — её следует описывать как возможного участника патогенеза, а не только как «комменсала».

Исследование выполнено за счёт гранта Российского научного фонда № 24 26-00168 «Зоопатогенная роль бактерий Moraxella и селекция активных гомологичных бактериофагов».

Список литературы:

1. Weese J. S., Blondeau J., Boothe D. et al. International Society for Companion Animal Infectious Diseases (ISCAID) guidelines for the diagnosis and management of bacterial urinary tract infections in dogs and cats. The Veterinary Journal. 2019; (247): 8-25.

2. Овчинников Р. С., Маноян М. Г., Гайнуллина А. Г. Грибковые и бактериальные инфекции мочевыделительной системы мелких домашних животных. VetPharma. 2013; (2 (13): 24-30.

3. Dorsch R., Teichmann-Knorrn S., Lund H. S. Urinary tract infection and subclinical bacteriuria in cats: a clinical update. Journal of Feline Medicine and Surgery. 2019; (21 (11): 1023-1038.

4. International Renal Interest Society (IRIS). Pyelonephritis in Dogs and Cats. IRIS Kidney. https://www.iris-kidney.com/pyelonephritis.

5. Otitis externa in animals. MSD Veterinary Manual. https://www. msdvetmanual.com/ear-disorders/otitis-externa/otitis-externa-in-animals.

6. Nuttall T. Managing recurrent otitis externa in dogs: what have we learned and what can we do better? Journal of the American Veterinary Medical Association. 2023; (261 (1): S10-S22.

7. Tang S., Prem A., Tjokrosurjo J. et al. The canine skin and ear microbiome: A comprehensive survey of pathogens implicated in canine skin and ear infections using a novel next-generation-sequencing-based assay. Veterinary Microbiology. 2020; (247): 108764.

8. Borriello G., Paradiso R., Catozzi C. et al. Cerumen microbial community shifts between healthy and otitis affected dogs. PLoS ONE. 2020; (15 (11): e0241447.

9. Verduin C. M., Hol C., Fleer A. et al. Moraxella catarrhalis: from emerging to established pathogen. Clinical Microbiology Reviews. 2002; (15 (1): 125-144.

10. Gagnard J.-C., Maillard N., Aho S. et al. Moraxella osloensis, an emerging pathogen of endocarditis in immunocompromised patients? Swiss Medical Weekly. 2015; (145): w14185.

11. Tagawa M., Kurashima C., Shimbo G. et al. Fibrinous pericarditis secondary to bacterial infection in a cat. Journal of Veterinary Medical Science. 2017; (79 (6): 957-961.

12. Wang Z., Guo L., Li J. et al. Case report: The first report on Moraxella canis isolation from corneal ulcer in a bulldog. Frontiers in Veterinary Science. 2022; (9): 934081.

13. Капустин А. В. [и др.]. Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота. 2020: 679 с.

Сведения об авторах:

Бузмакова Наталья Анатольевна, ассистент кафедры иммунологии и биотехнологии ФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВА им. К.И. Скрябина; 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23; 8-950-9543498; e-mail: nata24.06@mail.ru.

Смирнова Екатерина Александровна, кандидат биологических наук, доцент кафедры иммунологии и биотехнологии, ФГБОУ ВО МГАВМиБ -МВА им. К.И. Скрябина. 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, д.23 e-mail: nata24.06@mail.ru  +79104468718

Ответственный за переписку с редакцией: Пименов Николай Васильевич, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой иммунологии и биотехнологии ФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВА им. К.И. Скрябина; 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23; тел.: 8-909-9448012; e-mail: pimenov-nikolai@yandex.ru.

Заявленный вклад авторов: рукопись была написана благодаря вкладу всех авторов. Все авторы одобрили окончательную версию рукописи.

Конфликт интересов: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей