Показатели естественной резистентности у свиней при профилактике микотоксикозов, вызванных Т-2 токсином и афлотоксином В1, методом микробиологической ферментации кормов

УДК 619; 576; 579.62
DOI 10.33861/2071-8020-2025-6-12-14

Оригинальное эмпирическое исследование

Миронова А. А., Василенко В. Н. Северо-Кавказский зональный научноисследовательский ветеринарный институт – филиал Федерального
государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»,
Ростовская область, г. Новочеркасск
Миронова О. А. Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский университет дружбы
народов имени Патриса Лумумбы», г. Москва / Федеральное государственное бюджетное учреждение «Всероссийский центр
карантина растений», Московская область, г. Раменское
Миронова Л. П. Федеральное государственное бюджетное учреждение высшего образования «Донской государственный аграрный
университет», Ростовская область, пос. Персиановский / Северо-Кавказский зональный научноисследовательский
ветеринарный институт – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный
Ростовский аграрный научный центр», Ростовская область, г. Новочеркасск

Аннотация. Было установлено, что у поросят в возрасте трех месяцев, получавших с месячного возраста комбикорм, содержавший Т-2 токсин и афлатоксин в количествах 0,1-0,2 мг/кг: 1) содержание в крови общего белка, альбумина, ФАНК, БАСК, ЛАСК, В-лимфо-цитов, NK- лимфоцитов было достоверно ниже, СОЭ достоверно выше в сравнении с контрольной группой; 2) развивается лейкопения с уменьшением общего числа лейкоцитов в сравнении с контрольными животными на 35,5%. Сдвиг в лейкограмме происходит в сторону уменьшения относительного содержания палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов; увеличения процентного числа эозинофилов; уменьшения процентного содержания лимфоцитов; 3) у трехмесячных поросят, получавших ферментированный корм, содержащий до ферментации Т-2 токсин и афлатоксин в количествах 0,1-0,2 мг/кг, общее число лейкоцитов, структура лейкограммы, уровни общего белка, альбумина, глобулина, число Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, NK-лимфоцитов, ФАНК, БАСК, ЛАСК, СОЭ были близки к контролю.

Ключевые слова: микотоксины, биоферментация, клеточный и гуморальный иммунитет, лейкоформула, свиньи.

Серьезной проблемой свиноводства является все нарастающая динамика контаминации кормов микотоксинами – продуктами жизнедеятельности микроскопических грибов [7].

Рост грибов и плесеней и выработка микотоксинов зависят от сложного взаимодействия таких параметров, как температура, рН, влажность, уровни содержания кислорода и углекислого газа, состава субстрата, наличия конкурирующих микроорганизмов, превалирования различных штаммов. Знание этих экологических факторов очень важно для предотвращения выработки микотоксинов [10, 12].

При поедании таких кормов у животных возникают острые и хронические отравления. Так как загрязнение кормов происходит, как правило, не одним, а несколькими микотоксинами одновременно, то если даже уровень токсичности отдельных микотоксинов не превышает МДУ, они способны усиливать и пролонгировать патогенное действие друг друга на живой организм, вызывая иммуносупрессию, задержку роста, развития и продуктивности, снижая устойчивость к инфекционным заболеваниям [2].

Микотоксины через пищевую цепь могут попасть и к человеку, у которого действуют подавляюще на иммунитет и даже могут вызвать опухолевые заболевания [8, 11].

При попадании в организм животного микотоксины могут поражать печень, почки, нервную систему, эндокринную систему, репродуктивную систему, вызывать кожные патологии и влиять на метаболические процессы. Большие дозы микотоксина вызывают ярко-выраженные признаки, однако малые дозы вызывают хроническое течение с незначительными клиническими проявлениями, что затрудняет диагностику микотоксикоза [3, 5].

Большую актуальность приобретает оценка и контроль состояния иммунной системы организма продуктивных животных разного возраста с целью нормализации общего и иммунного состояния организма, повышения эффективности проводимых профилактических и лечебных мероприятий, способствующих интенсификации производства и улучшения качества продукции [9].

Многочисленными исследованиями доказано, что микробиологическое ферментирование значительно улучшает физико-химические свойства различных малоценных отходов сельского хозяйства и пищевой промышленности [4].

Поскольку процесс биоферментации закваской Леснова осуществляется при влажности сырья 45-55%, температуре 50-55°С в течение 12-42 часов, то есть условиях, подходящих для развития плесневых грибов и дрожжей, то надо понимать, какие изменения происходят в процессе микробиологической ферментации с микотоксинами [1, 6].

Целью исследований было изучение влияния ферментированного корма, содержавшего до ферментации Т-2 токсин и афлатоксин в количествах 0,1 - 0,2 мг/кг, на показатели клеточного и гуморального иммунитета у поросят.

Материалы и методы исследований. Для проведения сравнительных испытаний сформировали 3 группы из поросят-аналогов месячного возраста по 10 голов в каждой. Животные первой группы (контроль) получали корм основного рациона (ОР), содержащий Т-2 токсин и афлатоксин в количествах ниже ПДК; второй группы – с Т-2 токсином и афлатоксином из расчета 0,1-0,2 мг/кг и третьей группы – ферментированный корм, содержащий до ферментации Т-2 токсин и афлатоксин в количествах 0,1 - 0,2 мг/кг. Показатели крови поросят в двухмесячном и трехмесячном возрасте исследовали на ветеринарном гематологическом анализаторе Mindray BC-2800Vet; подсчет лейкоформулы, фагоцитарную активность лейкоцитов - методом световой микроскопии окрашенного мазка по Романовскому с фиксацией по Лейшману; БАСК, ЛАСК - нефелометрическим методом. Математическую обработку всех полученных данных осуществляли с использованием ПК и программы Microsoft Excel 2016. Достоверность различий сравниваемых величин определяли по t-критерию Стьюдента.

Результаты исследований и их обсуждение. Обобщенные данные приведены в таблицах 1, 2.

Таблица 1 Активность клеточного и гуморального иммунитета у подопытных поросят

Показатели, ед. измерения	Группа (n=10)
	Первая (ОР)	Вторая (корм с мико­токсинами)	Третья
2 месяца
Общий белок, г/л	63,36±3,79	52,3±3,68′	65,07±4,18
Альбумин, г/л	27,86±1,98	23,52±2,42′	29,52±4,11
Глобулин, г/л	36,04±3,83	32,3±4,13	38,24±4,21
СОЭ, мм/ч.	2,21±0,95	2,84±1,1′	2,43±0,24
Т-лимфоциты, %	54,22±0,32	49,48±0,38	56,24±0, 43
В-лимфоциты, %	32,32±0,28	28,21±0,32	34,01±0,17
NK- лимфоциты, %	15,08±0,33	11,13±0,34′	13,85±0,18
ФАНК, %	56,42±0,84	51,20±1,18	58,40±0,36
БАСК, %	54,39±0,40	49,02±0,24	58,20±0,50
ЛАСК, %	41,28±0,57	39,72±0,56	48,54±0,53
3 месяца
Общий белок, г/л	69,45±4,20	50, 47±3, 28′	71,54±4,22
Альбумин, г/л	36,22±3,29	23,95±2,71′	38,34±3,28
Глобулин, г/л	32,73±4,14	28,62±2,18	35,17±2,83
СОЭ, мм/ч.	3,04±0,32	8,34±1,13′′′	3,11±0,35
Т-лимфоциты, %	50,42±0,28	44,46±0,36	56,38±0,36
В-лимфоциты, %	29,30±0,34	26,21±0,32	36,01±0,24′
NK- лимфоциты, %	20,61±0,19	10, 13±0,34′′	23,33±0,28
ФАНК, %	53,20±1,08	41,20±1,18′	69,42±0,29′
БАСК, %	48,08±0,24	36,02±0,33′	59,20±0,49′
ЛАСК, %	39,72±0,56	33,70±0,51′	47,52 4±0,63′

Согласно данным таблицы 1, у животных второй группы, получавших в течение месяца корм ОР с Т-2 токсином и афлатоксином в количествах 0,1-0,2 мг/кг, содержание общего белка в крови было меньше в сравнении с контрольной группой на 17,5% (p<0,05); альбумина – на 15,6% (p<0,05); глобулина – на 10,4%, процент Т-лимфоцитов ниже на 8,8%, В-лимфоцитов – на 12,4%, ФАНК – на 9,3%, БАСК – на 9,9%, ЛАСК – на 3,8% (разница во всех случаях недостоверна); NK- лимфоцитов – на 26,2% (p<0,05). СОЭ у поросят второй опытной группы была выше в сравнении с контролем на 28,5% (p<0,05).

У этих же животных в возрасте трех месяцев содержание общего белка в крови было меньше в сравнении с контрольной группой на 27,3% (p<0,05); альбумина – на 33,9% (p<0,05); ФАНК – на 22,6% (p<0,05), БАСК – на 25,1 % (p<0,05), ЛАСК – на 15,2% (p<0,05); NK – лимфоцитов – на 50,8% (p<0,01); процент Т-лимфоцитов был ниже на 12,1%, глобулина – на 14,0%; В-лим-фоцитов – на 10,5% (разница во всех случаях недостоверна). СОЭ у поросят второй опытной группы была выше в сравнении с контролем в 2,7 раза (p<0,001).

В третьей опытной группе, животные которой потребляли ферментированный комбикорм, содержавший до ферментации Т-2 токсин и афлатоксин в количествах 0,1-0,2 мг/кг, уровни общего белка, альбумина, глобулина, число Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, NK-лимфоцитов, ФАНК, БАСК, ЛАСК, СОЭ были близки к контролю (разница недостоверна).

В трехмесячном возрасте число Т-лимфоцитов было выше в сравнении с контролем на 11,8% (разница недостоверна), В-лим-фоцитов – на 22,9% (p<0,05), NK-лимфоцитов – на 13,2% (разница недостоверна); ФАНК – на 30,5% (p<0,05), БАСК – на 23,1% (p<0,05), ЛАСК – на 19,6% (p<0,05).

СОЭ, уровни общего белка, альбумина, глобулина были близки к контролю.

Таким образом, у поросят в возрасте трех месяцев, получавших с месячного возраста комбикорм, содержавший Т-2 токсин и афлатоксин в количествах 0,1-0,2 мг/кг, содержание в крови общего белка, альбумина, ФАНК, БАСК, ЛАСК, В-лимфоцитов, NK - лимфоцитов было достоверно ниже, СОЭ достоверно выше в сравнении с контрольной группой; в опытной группе, животные которой употребляли ферментированный комбикорм, содержавший до ферментации Т-2 токсин и афлатоксин в количествах 0,1 – 0,2 мг/кг, уровни общего белка, альбумина, глобулина, число Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, NK- лимфоцитов, ФАНК, БАСК, ЛАСК, СОЭ были близки к контролю.

Таблица 2 Содержание лейкоцитов и лейкограмма у подопытных поросят

Показатели, ед. измерения	Группа (n=10)
	Первая (ОР)	Вторая (корм с мико­токсинами)	Третья
2 месяца
Лейкоциты, ×109 г/л	12,16±0,77	10,33±1,55′	11,89±0,98
Эозинофилы, %	2,9±0,3	4,6±0,5′′′	2,8±0,7
Юные, %	-	10,8±0,44	-
Палочкоядерные нейтрофилы, %	19,1±2,8	14,9±0,8′	19,4±3,6
Сегментоядерные нейтрофилы, %	37,1±7,6″	31,6±6,1′	40,3±5,5
Лимфоциты, %	38,3±4,4	34,5±5,8	35,1±4,3
Моноциты, %	2,6±1,6	3,6±0,4′′	2,4±0,5
3 месяца
Лейкоциты, ×109 г/л	12,04±2,29	9,15±3,03′′	12,88±3,17
Эозинофилы, %	2,5±0,8	11,5±1,2′′′	3,4±1,4
Юные, %	-	18,8±0,6	1,7±0,2
Палочкоядерные нейтрофилы, %	23,8±0,9	18,9±2,7′	24,3±1,8
Сегментоядерные нейтрофилы, %	30,1±6,4	21,9±6,7′	35,8±7,2
Лимфоциты, %	39,1±4,7	26,5±3,9′′	30,9±2,4
Моноциты, %	4,5±1,3	2,4±0,6′′′	3,9± 0,8

У двухмесячных поросят второй опытной группы, получавших с месячного возраста корм ОР с Т-2 токсином и афлатоксином в количествах 0,1-0,2 мг/кг, средний уровень лейкоцитов был на 15,1% ниже, чем в контроле (p<0,05).

Процентное число эозинофилов в лейкограмме у поросят второй опытной группы было выше, чем в контроле в 1,6 раза – эозино-пения (p<0,001). Процент палочкоядерных нейтрофилов у поросят второй группы был на 22,0 % ниже (p<0,05), сегментоядерных нейтрофилов – 14,8 % ниже (p<0,05) в сравнении с контролем. Среднее число лимфоцитов в лейкограмме у животных второй опытной группы было на 9,9 % ниже в сравнении с контролем (разница недостоверна), моноцитов выше на 38,5 % (p<0,01), чем в контроле. У двухмесячных поросят третьей группы общее число лейкоцитов и структура лейкограммы были близки к контролю.

У трехмесячных поросят второй опытной группы средний уровень лейкоцитов был на 35,5 % ниже, чем в контроле (p<0,01) - лейкопения; процентное число эозинофилов в лейкограмме у поросят второй опытной группы было в 4,6 раза выше, чем в контроле (p<0,001). Количество палочкоядерных нейтрофилов (%) у поросят второй группы было достоверно ниже на 22,0 % (p<0,05), сегментоядерных нейтрофилов – на 27,3 % (p<0,05) - нейтрофилия в сравнении с контрольными животными. Среднее число лимфоцитов в лей-кограмме у животных второй опытной группы было в 1,5 раза ниже (p<0,01), моноцитов – в 1,9 (p<0,001) раза ниже, чем в контроле.

У трехмесячных поросят третьей группы общее число лейкоцитов и структура лейкограммы были близки к контролю.

Заключение. Таким образом, у трехмесячных поросят, получавших с месячного возраста корм ОР с Т-2 токсином и афлатоксином в количествах 0,1 - 0,2 мг/кг, развивается лейкопения с уменьшением общего числа лейкоцитов в сравнении с контрольными животными на 35,5 %. Сдвиг в лейкограмме происходит в сторону уменьшения относительного содержания палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов; увеличения процентного числа эозинофилов – эозинофилия; уменьшения процентного содержания лимфоцитов. У трехмесячных поросят третьей группы, получавших ферментированный корм, содержащий до ферментации Т-2 токсин и афлатоксин в количествах 0,1 - 0,2 мг/кг, общее число лейкоцитов и структура лейко-граммы были близки к контролю.

Список литературы:

1. Ахмадышин Р. А., Канарский А. В., Канарская З. А. Микотокси-ны-контаминанты кормов. Вестник Казанского технологического университета. 2007; (2): 88-103.

2. Бурдов Л. Г. Мониторинг микотоксинов, профилактика и лечение микотоксикозов в Удмурдской республике. 2013: 28 с.

3. Конноли Э., Сулливан Д. О. Серия семинаров по микотоксинам: Почему сейчас? Значения для Европы и Европейского союза. Европейский семинар по микотоксинам. Оценка воздействия микотоксинов в Европе. 2005: 2-26.

4. Лазаревич А. Н., Леснов А. П., Иванова О. В. Технология производства и применения кормового продукта и концентрата на основе пивной дробины. Saarbrucken. LAP LAMBERT Academic Publishing. 2015: 55 с.

5. Ле Бра Э. Микотоксикозы. Профилактика и лечение. Комбикорма. 2008; (3): 93-94.

6. Леснов П. А. Патент RU 2 122 330 С1. Способ использования закваски в кормосмеси. Закваска Леснова для приготовления кормов. 1998.

7. Попов, В.С. Проблемы микотоксикозов в современных условиях и принципы профилактических решений / В.С. Попов, Н.В. Самбуров, Н.В. Воробьева // Монография. - Курск, 2018. - С.157.

8. Чулков, А.К. О профилактике микотоксикозов животных / А. К. Чулков, М. Я. Тремасов, А. В. Иванов // Ветеринария. – 2007. – № 12. – С. 8-10.

9. Шахов, А.Г. Методические рекомендации по оценке и коррекции иммунного статуса животных / А. Г. Шахов, Ю. Н. Масьянов, М. И. Рецкий, Ю. Н. Бригадиров, А. И. Ануфриев, М. В. Бирюков, С. И. Першина, А. М. Кардашов, М. Г. Петрова, Е. В. Батищева, В. И. Беляев, А. И. Золотарев, Г. Н. Близнецова, В. С. Бузлама, С. М. Сулейманов // Воронеж. - 2005 - С.115.

10. Binding of aflatoxin Bl to Bifidobacteria in vitro / J. T. Oatley, M. D. Rarick, G. E. Ji, J. E. Linz // Journal of Food Protection. – 2000. – Vol. 63, Iss. 8. – P. 1133-1136.

11. Efficacite d’adsorbants contre les mycotoxines de Fusarium chez le porc / A. Gutzwiller, L. Czegledi, P. Stoll, L. Bruckner // Revue Suisse d’Agriculture. – 2005. – Vol. 37, № 3. – P. 121-124.

12. Prevention of ochratoxin A in cereals / M. Olsen, N. Jonsson, N. Magan [et al.] // Advances in Food Micology. – 2006. – Vol. 571. – P. 317-342.

Сведения об авторах:

Василенко Вячеслав Николаевич, доктор сельскохозяйственных наук, член-корреспондент РАН, главный научный сотрудник Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института – филиала ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, Ростовское шоссе, 0.

Миронова Ольга Анатольевна, кандидат биологических наук, доцент, заведующий базовой кафедрой биологии и безопасности экосистем института экологии ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов имени Патриса Лумумбы»; ФГБУ «Всероссийский центр карантина растений»; 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6.

Миронова Людмила Павловна, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры терапии и пропедевтики ФГБОУ ВО «Донской государственный аграрный университет»; главный научный сотрудник Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института – филиала ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346493, Ростовская область, Октябрьский район, поселок Персиановский, ул. Кри-вошлыкова, 24; e-mail: mironova_lp@mail.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Миронова Анна Анатольевна, доктор ветеринарных наук, главный научный сотрудник творческого коллектива по изучению инвазионных заболеваний животных Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института – филиал ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, Ростовское шоссе, 0; тел.: 8-903-4718275; e-mail: aa_mironova@mail.ru.

Заявленный вклад авторов: рукопись была написана благодаря вкладу всех авторов. Все авторы одобрили окончательную версию рукописи.

Конфликт интересов: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей