Эффективность различных приемов повышения активности пестицидов против членистоногих вредителей с использованием тимола

УДК 619:615.285
DOI 10.33861/2071-8020-2024-6-46-48

Левченко М. А. Всероссийский научноисследовательский институт ветеринарной энтомологии и арахнологии -
филиал Федерального государственного бюджетного учреждения науки Федерального исследовательского
центра Тюменского научного центра Сибирского отделения Российской академии наук, г. Тюмень

В связи с низким уровнем риска использования биопестицидов в качестве альтернатив синтетическим инсектицидам, которые загрязняют окружающую среду и к которым некоторые насекомые могут быстро развивать устойчивость, в настоящее время перспективным направлением является разработка пестицидов на основе растительных активных компонентов [4, 9, 10, 18]. Эти компоненты представляют собой монотерпены и некоторые сесквитерпены, входящие в сложную смесь растительных эфирных масел. Они проявляют разнообразную биологическую активность в отношении целевых организмов, которые могут демонстрировать синергетические или антагонистические эффекты в результате сложных взаимодействий между их компонентами [23]. Также компоненты эфирных масел могут быть чувствительны к условиям окружающей среды, таким как температура, свет и кислород, что приводит к образованию фенок-сидных радикалов, которые в дальнейшем переходят в окислительные и полимеризационные реакции, что может привести к потере инсектицидной эффективности. Они являются безопасными и хорошими исходными материалами, допускающими структурные изменения, в частности, за счет гидроксильной группы, а получение производных может способствовать преодолению ограничений их стабильности, улучшению физико-химических свойств и получению соединений с улучшенной биологической активностью [13]. Тимол (2-изопропил-5-ме-тилфенол) является важным фенольным монотерпеном, полученными из эфирного масла некоторых представителей семейства Laminaceae, таких как орегано, тимьян и чабер [13]. Во многих исследованиях это вещество проявляет высокую эффективность против вредителей членистоногих, обладает инсектицидным, в том числе овицидным, репел-лентным и фумигантным действием [16, 22, 24]. Кроме того тимол, оказывая влияние, может ингибировать развитие насекомых [1]. Но при сравнении его с синтетическими веществами может выявляться его значительно меньшая токсичность против целевых вредителей [7, 11].

Целью настоящих исследований являлось, на основе литературного анализа, оценить некоторые способы повышения активности пестицидов с использованием тимола против вредных членистоногих ветеринарного, медицинского и сельскохозяйственного значения.

Материалы и методы исследований. Проведен обзор опубликованных научных статей об эффективности монотерпенов с использованием тимола против насекомых и клещей в результате направленных превращений и сочетаний этого вещества с активными соединениями растительного и синтетического происхождения. Для этого использовались литературные источники из баз Pubmed, Elibrary за 2001-2024 годы, поисковые слова включали в себя «монотерпены», «тимол», «инсектицид», «акарицид» «пестицид», «токсичность», «активность» «модификация», «синтез», «синергизм». Материал статей учитывался, если работа была выполнена с отдельно взятым или выделенным веществом тимола.

Результаты исследований и их обсуждение. С целью улучшения стабильности в окружающей среде, физико-химических свойств и получения соединений с улучшенной биологической активностью проводятся различные исследования в области модификации молекулярной структуры тимола. Так, результаты таких превращений показаны в работе Tharamak S. et al. (2019), где авторы произвели модификацию этого вещества в десять тимиловых эфиров путем этерификации с использованием нового реагента PPh3/Br3CSO2Ph. При исследовании инсектицидной активности этих соединений в отношении второго возраста личинок Spodoptera liturao, известной как табачная совка или хлопковая листовертка, которая является серьезным многоядным вредителем в Азии, Океании и на Индийском субконтиненте, выяснено, что среди десяти оцененных эфиров тимила, циннамат тимила оказался наиболее токсичным образцом, у которого полулетальная доза ЛД50 составила 0,41 и 0,34 г/личинка через 24 и 48 ч после обработки, соответственно. Оказалось, что тимилциннамат проявляет токсичность против S. litura в 2,41-2,46 раза большую чем тимол. Кроме того, в этих исследованиях выявлено, что личинки, обработанные тимилциннаматом, показали повышение активности карбоксиэстеразы и ацетилхолинэстеразы в эксперименте in vivo, тогда как активность глутатион s-трансферазы не показала существенной разницы [20]. В другой исследовательской работе Pengsook A et al. (2022) оценили тимол и его восемь структурно модифицированные сложных эфиров против одного из самых известных насекомых-вредителей сельского хозяйства - свекловичной совки, Spodoptera exigua. В результате нанесения этих образцов на их личинки наиболее токсичным соединением со средней летальной дозой (далее, ЛД50) 2,33 и 1,62 мкг/личинка после 24 и 48 ч после обработки был тимилбутаноат, который продемонстрировал в 15,5 раз более высокую токсичность в отношении Spodoptera exigua, чем тимол, и в 6,5 раз, чем тимилциннамат. Все тимиловые эфиры были потенциально лучше по своей эффективности против Spodoptera exigua, чем исходное соединение тимола, за исключением тимилдибромацетата. Авторами в данном исследовании установлено три уровня активности по отношению к используемым соединениям, по величине ЛД50 в диапазоне от 1,5 до 5,0, от 7,0 до 15,0 и >20 мкг/личинка, соответственно. Также авторами выявлено, что имилбутаноат, обработанный личинками, ингибировал активность глутатиона S-трансферазы, карбоксилэстеразы и ацетилхо-линэстеразы [17]. В другой работе, по направленным превращениям, проведенными Novato, T. et al., 2018, были получены ацетилированные производные тимола в реакции с фенольными соединениями, уксусным ангидридом/пиридином, которые при воздействии на вредоносного клеща для скота Rhipicephalus microplus не проявили повышение токсичности по сравнению с тимолом. При изучении биологической активности выявлено, что тимол приводил к 100% смертности, начиная с концентрации 2,5 мг/мл, тогда как то же самое наблюдалось для его ацетата, начиная с концентрации 5,0 мг/мл. При этом ЛД50 для этих соединений составила 1,26 и 2,97 мг/мл, соответственно [14]. В другом исследовании, проведенном Zhao M. (2023), авторы предположили, что сложный эфир карбоновой кислоты, а также атом хлора в боковых цепях природных производных, могут повышать инсектицидную активность, поэтому было решено получить аналоги тимола. Для этого авторами были синтезированы различные производные и аналоги изомеров тимола, у которых гидроксильная группа была трансформирована в простые эфиры с различными алифатическими цепями, например, пропилбез или с гидроксильной группой, или с атомом хлора в качестве концевых, а также бициклические эфиры с ненасыщенной цепью, имеющие группу карбоновой кислоты. Кроме того, получен аналог природных изомеров, у которого все метильные группы заменены на метоксильную, 1-гидроксиэтильную и (3-хлорбензоил) оксигруппы. В ходе экспериментов были синтезированы путем аллильного гидроксилирования и последующей этерификации четыре оксигенированных производных DMNT (dimethyl-1,3,7-nontriene). При проведении биопроб на личинках капустной моли Plutella xylostella выявлено, что эти соединения DMNT-OCH3 (2), DMNT-OCy (3) и DMNT-OAc (4) были более токсичны для личинок, чем только DMNT. Наиболее выраженный эффект наблюдался для соединения 2, которое показало увеличение летальности на 22,23%. Кроме того ЛД50 для соединений 2, 3 и 4 против личинок P. xylostella при учете через 48 ч составила 0,98, 1,13 и 1,11 мг/мл, соответственно, а при сравнении их с коммерческим инсектицидом на основе тимола, для которого ЛД50 составила 2,45 мг/мл, выявлено, что направленные превращения тимола улучшают токсическое действие на P. xylostella более чем в 2 раза [25].

Таблица 1 Синергизм тимола с растительными или синтетическими активными веществами против вредных членистоногих

Вредители	Вид	Стадия развития	Способ воздействия	Комбинация, соотношение	Биологический эффект
Клещи	Rhipicephalus microplus	имаго	контактное	циперметрин (3700 мкг/мл) + тимол (1300 мкг/мл)	усиление действия циперметри- на более чем 4 раза [2]
Клопы	Cimex lectularius L.	имаго	контактное	карвакрол и эвгенол (1:1:1)	синергизм [5]
	Cimex lectularius L.	имаго	контактное	1х ЛД25 дозы тимола с дельтаметрином	усиление действия дельтаметри- на более чем в 3 раза [6]
Комары	Aedes aegypti	личинки третьего возраста	контактное	тимол + транс-анетол (1:1), тимол +карвакрол (1:1) тимол+лимо- нен (1:1)	синергизм [3]
	Aedes aegypti	личинки третьего возраста	контактное	Тимол +транс-анетол + карва­крол + лимонен (1:1:1:1), тимол+ транс-анетол + лимонен (1:1:1)	аддитивный [3]
	Culex pipiens	личинки третьего возраста	контактное	карвакрол (1:4)	синергизм [24]
	Culex pipiens	яйца	контактное	карвакрол (1:4)	аддитивный [24]
	Aedes albopictus	имаго самок	репеллентное	ванилин (1:2)	увеличение защитного действия смеси более чем в 2 раза [15]
	Culex pipiens	имаго	фумигантное	Тимол+карвакрол (1:1)	синергизм [12]
Мухи	Musca domestica L.	имаго	фумигантное	Тимол+пиперанилбутоксид (ППБ) в дозах от 0,5 мг/л до 18 мг/л) с предварит. Обработанными му­хами ППБ в дозе 10 мкл/насек	аддитивное действие [19]
Мотыльки	Spodoptera litura	личинки четвер­того возраста	контактное	Тимол+транс-анетол (1:1)	синергизм [8]
Вши	Pediculus humanus capitis	имаго	фумигантное, репеллентное	Тимол+эвгенол (1:3)	синергизм [21]

Синергизм. Согласно литературным источникам, сочетание тимола с различными активными веществами, в том числе синтетического происхождения, показывает разные эффекты их биологической активности (таблица 1). Так, в работе Tavares C. et al. (2022) исследована его акарицидная эффективность при комбинации тимол + циперметрин против клеща крупного рогатого скота Rhipicephalus microplus, который является наиболее экономически значимым эктопаразитом в мире. В этих исследованиях комбинация с различными концентрациями ци-перметрина и фиксированными концентрациями тимола (1300 мкг/ мл для личинок с низкой восприимчивостью к циперметрину: 690 мкг/ мл для популяции с высокой восприимчивостью к циперметрину) показала, что ЛД50 циперметрина без потери эффективности снижалась (от 232,4 до 52,7 мкг/мл) в популяции с низкой восприимчивостью. При этом из анализов ВЭЖХ сделан вывод о том, что более высокая концентрация циперметрина (pop. 1:30,3±6,9 и pop. 2:45,4±17,7 нг/мг) была обнаружена в тканях, наполненных кровью самок, получавших комбинацию тимол+циперметрин, по сравнению с концентрациями аналита в группах, получавших только циперметрин (pop. 1:12,4±4,4 pop. 2:25,5±9,4 нг/мг). Это указывает на то, что присутствие тимола увеличивает концентрацию циперметрина во внутренних тканях, наполненных кровью самок, через возможный механизм увеличения проникновения циперметрина на кутикулярном уровне [2]. В других тестах, проведенными Gaire S. et al. (2021), при изучении бинарных смесей, содержащих 1хЛД25 дозы тимола с дельтаметрином против постельных клопов (Cimex lectularius L.), обладающих 72000-кратной резистентностью к дельтаметрину, выявили значительное усиление токсичности дельтаметрина (более чем в 3 раза) по сравнению с препаратами, содержащими только дельтаметрин (при учете смертности через 24 часа). Кроме того, тимол значительно ингибировал активность ферментов P450 (ингибирование 27-50%) в резистентной популяции по сравнению с контролем [6]. В другой работе, проведённой Dhinakaran S. et al. (2019), в результате скрининга в отношении личинок комаров третьего возраста Aedes aegypti четырёх монотерпенов (после 48-часового периода воздействия): Y-терпинена (T), R-(+)-лимонена (L), карвакрола (C), транс-анетола (A), Монотерпены Y—терпинен, R-(+)-лимонен, транс-анетол и карвакрол, зафиксировано проявление ларвицидной активности со значением ЛД50, соответственно, 9,76, 11,88, 50,19, 48,57 частей на миллион, а значение ЛД90 составило, соответственно, 16,99, 17,78, 65,21, 75,02 частей на миллион при индивидуальном тестировании.

Синергетические взаимодействия на основе фактора котоксичности (CTF): бинарных комбинаций (в соотношении 1:1) ЛД20 значений (Т+А; Т+L; Т+С; А+L; А+С; L+С) показали синергетические взаимодействия (CTF > 20) по методу Abbassy et al., 2009. Также, этими же авторами для точной оценки синергетического действия по методикам: Tak et al. (2016), Wadley (1945), в результате экспериментов, показали синергию бинарные соотношения: L+Т и L+C, у которых коэффициент синергии составил (R>1,5). А при тройных: Т+L+A (1:1:1) и четвертичных: T+L+C+A (1:1:1:1) комбинациях монотерпенов выявлено проявление аддитивного эффекта (1,5>R>0,5) или проявление антагонизма (R<0,5) [3]. В другом литературном источнике приводятся результаты о достижении синергетического эффекта комбинации смеси расчетных ЛД50 тимола и карвакрола в соотношении 1:4 против личинок Culex pipiens. При этом на яйцах этого вида насекомых данная комбинация смеси вызывала аддитивный эффект [24]. В других опытах у исследователей Park Y. (2012) при изучении репеллентной эффективности бинарной смеси тимола и ванилина 1:2 (0,05:0,1 мл на см2) против самок комаров Aedes albopictus оказалось, что эта композиция обладает более длительным защитным действием (до 120 мин), чем тимол и ванилин в отдельности, у которых эффективное репеллентное действие достигало только 60 мин при 0,1 мл/см2 [15]. В другом исследовании авторами Gaire S. et al. (2020) при изучении совместного инсектицидного действия тимола в третичной смеси карвакрола, эвгенола в соотношении 1:1:1 против постельных клопов Cimex lectularius также выявлен синергетический токсический эффект (коэффициент взаимодействия 1,96). В данных опытах раствор наносили местно на вентральную часть задней части груди в объеме 0,5 мкл, Оценку смертности всех обработанных насекомых проводили через 24 ч после обработки [5]. В другом литературном источнике Ma W. et al. (2014) приводятся данные синергизма между активными компонентами смеси карвакрола и тимола (1:1) со значением коэффициента токсичности (CTC) 174,1 и значением ЛД50 0,16 мг/л воздуха при фумигантном воздействии против комаров Culex pipiens. Кроме того выявлено, что фактическая эффективность бинарной смеси по коэффициенту нокдауна (КТ) при 300 мг/мат (КТ50 = 7,9, 15,8 и 22,0 мин после 0, 2 и 4 ч предварительного нагрева, соответственно) была сопоставима с эффективностью d-аллетрина при 30 мг/мат (КТ50 = 8,7, 17,9 и 21,2 мин после 0, 2 и 4 ч предварительного нагрева, соответственно), испытанного в испаряющих матах методом стеклянной камеры (70Х70Х70 см) [12]. В другой работе, проведенной Scalerandi E. et al. (2018) при фумигантном воздействии в отношении комнатных мух Musca domestica для тимола в отдельности ЛД50 составила 13 (2,4-68,7), а для тимола с пиперанилбутоксидом (ППБ) ЛД50 = 12,8 (9,8-18,1) в соотношении. В пересчете индекс комбинации (CI) для этих веществ составил CI = 1,0, что соответствует аддитивному эффекту [19]. В следующем исследовании, проведенном Hummelbrunner L. et al. (2001), в отношении личинок табачной совки Spodoptera litura раннего четвертого возраста при топикальном нанесении и учете смертности через 24 часа в соотношении 1:1 выявлен синергетический эффект тимола с транс-анетолом [8]. В другом исследовании Toloza A. et al. (2024) при изучении педикулицидной эффективности эвгенол усиливает тимоловую активность. Авторами установлен тип взаимодействия между компонентами в каждой смеси по индексу комбинации (IC), где коэффициент нокдауна КТ50 значения были 6,07, 8,83, 7,17 и 27,23 ч для линалоола, 1,8-цинеола, эвгенола и тимола, соответственно. Смеси эвгенола и тимола демонстрируют синергетическое взаимодействие (индекс взаимодействия, IC<1) для комбинаций 3:1 и 1:1, в то время как для комбинации 1:3 взаимодействие не наблюдалось [21].

Заключение. По результатам проведенного литературного обзора выявлено, что приемы направленного превращения молекулы тимола на порядок могут повышать его активность, при этом комбинации данного соединения с различными веществами растительного и синтетического происхождения против вредителей членистоногих ветеринарного, медицинского и сельскохозяйственного значения в большинстве случаев эффективны.

Данное исследование выполнено во Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной энтомологии и арахнологии Тюменского научного центра Сибирского отделения Российской академии наук в рамках государственного задания Министерства науки и высшего образования Российской Федерации (тема № FWRZ-2021-0018).

Список литературы:

1. Bovornnanthadej T. et al. Effect of thymol on reproductive biology of Helicoverpa armigera Hubner (Lepidoptera: Noctuidae) // Commun Agric Appl Biol Sci. 2013. Vol. 78. No. 2. P. 311-315.

2. Tavares C. et al. Combination of cypermethrin and thymol for control of Rhipicephalus microplus: Efficacy evaluation and description of an action mechanism // Ticks Tick Borne Dis. 2022. Vol. 13. No. 1. P. 101874.

3. Dhinakaran S. et al. Synergistic terpene combinations as larvicides against the dengue vector Aedes aegypti Linn // Drug Development Research. 2019.

4. Dos Santos V. et al. The Potential of plant-based biorational products for the Drosophila suzukii control: Current status, opportunities, and limitations // Neotrop. Entomol. 2023. Vol. 53. P. 236-243.

5. Gaire S. et al. Synergistic Toxicity Interactions between Plant Essential Oil Components against the Common Bed Bug (Cimex lectularius L.) // Insects. 2020. Vol. 11. No. 2. P. 133.

6. Gaire S. et al. Plant essential oil constituents enhance deltamethrin toxicity in a resistant population of bed bugs (Cimex lectularius L.) by inhibiting cytochrome P450 enzymes // Pesticide Biochemistry and Physiology. 2021. Vol. 175. P. 104829.

7. Hieu T. et al. Toxicity of Zanthoxylum piperitum and Zanthoxylum armatum oil constituents and related compounds to Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae). J Med Entomol. 2012. Vol. 49. No. 5. P. 1084-1091.

8. Hummelbrunner L. et al. Acute, sublethal, antifeedant, and synergistic effects of monoterpenoid essential oil compounds on the tobacco cutworm, Spodoptera litura (Lep., Noctuidae) // J Agric Food Chem. 2001. Vol. 49. No. 2. P. 715-720.

9. Isman M. Commercial development of plant essential oils and their constituents as active ingredients in bioinsecticides // Phytochem. Rev. 2020. Vol. 19. P. 741.

10. Kumar R. et al. Menace of acaricide resistance in cattle tick, Rhipicephalus microplus in India: Status and possible mitigation strategies. Vet Parasitol. 2020. Vol. 278. P. 108993.

11. Lee D. et al. Laboratory and Simulated Field Bioassays to Evaluate Larvicidal Activity of Pinus densiflora Hydrodistillate, Its Constituents and Structurally Related Compounds against Aedes albopictus, Aedes aegypti and Culex pipiens pallens in Relation to Their Inhibitory Effects on Acetylcholinesterase Activity // Insects. 2013. Vol. 4 No. 2. P. 217-229.

12. Ma W.-B. et al. Fumigant activity of eleven essential oil compounds and their selected binary mixtures against Culex pipiens pallens (Diptera: Culicidae) // Parasitology Research. 2014. Vol. 113. No. 10. P. 3631-3637.

13. Natal C. et al. New carvacrol and thymol derivatives as potential insecticides: synthesis, biological activity, computational studies and nanoencapsulation // RSC Adv. 2021. Vol. 11. No. 54. P. 34024-34035.

14. Novato T. et al. In vitro assessment of the acaricidal activity of carvacrol, thymol, eugenol and their acetylated derivatives on Rhipicephalus microplus (Acari: Ixodidae) // Veterinary Parasitology. 2018. Vol. 260. P. 1-4.

15. Park Y. et al. Chemical Composition, Larvicidal Action, and Adult Repellency of Thymus magnus Against Aedes albopictus. Journal of the American Mosquito Control Association. 2012. Vol. 28. No. 3. P. 192-198.

16. Park J. et al. Insecticidal toxicities of carvacrol and thymol derived from Thymus vulgaris Lin. against Pochazia shantungensis Chou & Lu., newly recorded pest // Scientific Reports. 2017. Vol. 7. No. 1.

17. Pengsook A. et al. Insecticidal and growth inhibitory effects of some thymol derivatives on the beet armyworm, Spodoptera exigua (Lepidoptera: Noctuidae) and their impact on detoxification enzymes // Pest Manag Sci. 2022. Vol. 78. No. 2. P. 684-691.

18. Regnault-Roger C. et al. Essential oils in insect control: Low-risk products in a high-stakes world // Annu. Rev. Entomol. 2012. Vol. 57. P. 405-424.

19. Scalerandi E. et al. Understanding Synergistic Toxicity of Terpenes as Insecticides: Contribution of Metabolic Detoxification in Musca domestica // Front Plant Sci. 2018. Vol. 9. P. 1579.

20. Tharamak S. et al. Synthesis of thymyl esters and their insecticidal activity against Spodoptera litura (Lepidoptera: Noctuidae) // Pest Management Science. 2019.

21. Toloza A. et al. Efficiency and chemical insights: Exploring interactions between nanomicelles and monoterpenoids for head lice treatment. Pestic Biochem Physiol. 2024. Vol. 201. P. 105886.

22. Xie Y. et al. Toxicity of the essential oil from Thymus serpyllum and thymol to larvae and pupae of the housefly Musca domestica L. (Diptera: Muscidae). Environmental Science and Pollution Research. 2020.

23. Yoon J. et al. Cuticular property affects the insecticidal synergy of major constituents in thyme oil against houseflies, Musca domestica. Sci Rep. 2023. Vol. 13. No. 1. P. 12654.

24. Youssefi M. et al. Efficacy of Two Monoterpenoids, Carvacrol and Thymol, and Their Combinations against Eggs and Larvae of the West Nile Vector Culex pipiens. Molecules. 2019. Vol. 24. No. 10. P. 1867.

25. Zhao M. et al. Structural modification of (3E)-4,8-dimethyl-1,3,7-nontriene enhances its ability to kill Plutella xylostella insect pests // Pest Manag Sci. 2023. Vol. 79. No. 9. P. 3280-3289.

Резюме. Необходимость применения безопасных и эффективных инсектицидов с каждым годом возрастает. К таким средствам, в том числе, относят активные вещества растительного происхождения, которые оказывают высокую биологическую эффективность против вредных членистоногих. Тимол (2-изопропил-5-метилфенол) является важным фенольным монотерпеном, полученными из эфирного масла некоторых представителей растений семейства Laminaceae. При сравнении его с растительными соединениями он проявляет высокую активность, а при сопоставлении с синтетическими веществами может выявляться его значительно меньшая токсичность против целевых насекомых. Поэтому целью данной работы являлось провести оценку некоторых способов повышения активности пестицидов с использованием тимола против вредных членистоногих ветеринарного, медицинского и сельскохозяйственного значения. Для этого проведен литературный анализ баз данных Pubmed, Elibrary за 2001-2024 гг., поисковые слова включали в себя «монотерпены», «тимол», «инсектицид», «акарицид» «пестицид», «токсичность», «активность», «активность» «модификация», «синтез», «синергизм». Материал статей учитывался если работа была выполнена с отдельно взятым или выделенным веществом тимола. В результате проведенной работы выявлено, что для повышения эффективности пестицидов с использованием тимола, их стабильности в окружающей среде основными приемами являются: способ направленного превращения молекулы тимола и его сочетание с другими активными веществами природного и синтетического происхождения. В первом случае опубликованы результаты о повышении токсичности этого вещества против вредных членистоногих более чем в 15 раз, во втором оно в определенных комбинациях с другими соединениями усиливало их действие: циперметрина более чем в 4 раза, дельтаметрина в 3 раза. Также при различном сочетании с активными веществами растительного происхождения обеспечивал синергизм их смеси.

Ключевые слова: тимол, монотерпены, пестициды, акарициды, инсектициды, токсичность, активность, модификация, синтез, синергизм.

Сведения об авторе: Левченко Михаил Алексеевич, кандидат ветеринарных наук, заведующий лабораторией ветеринарных проблем в животноводстве Всероссийского научно-исследовательского институт ветеринарной энтомологии и арахнологии - филиала ФГБУН Федерального исследовательского центра Тюменского научного центра Сибирского отделения Российской академии наук; 625041, Тюменская область, г. Тюмень, ул. Институтская, 2; тел.: 8-3452-258558; e-mail: levchenko-m-a@mail.ru - ответственный за переписку с редакцией.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей