Токсикологическая оценка нового железодекстранового комплекса на белых крысах

УДК 619:615.015.4

Соколова Е.А. ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет», г. Ставрополь

Введение. Развитие алиментарной железодефицитной анемии у молодняка разных видов животных является одной из самых серьезных проблем промышленного животноводства, которая наносит большой экономический ущерб хозяйствам. В свиноводстве распространенность железодефицитной анемии среди поросят носит наиболее угрожающий характер, что связано с предрасположенностью молодняка данного вида животных к этой болезни. Заболевание возникает вследствие малого запаса железа в организме новорожденного и высокой потребности в этом микроэлементе у интенсивно растущих поросят [2]. Суточная потребность в железе в первые недели жизни поросенка составляет 7-10 мг, тогда как с молоком матери он может получить только 1 мг в день. Ограниченность запасов железа в организме новорожденного поросенка (около 40-47 г) и низкое содержание его в материнском молоке (2 мг на 100 г) приводят к развитию анемии. Этому способствуют также физиологические особенности поросят, в частности весьма интенсивный рост. Согласно литературным данным, при интенсивном ведении свиноводства, анемией заболевают до 100% новорожденных поросят, причем смертность доходит до 30-35% [1].

Дефицитом железа объясняется повышенная частота инфекционных заболеваний, связанных с недостатком данного микроэлемента, что приводит к нарушениям деятельности ферментов, содержащих железо в клетках иммунной системы [5, 6].

Особую актуальность в современных условиях ведения свиноводства приобретает разработка и применение новых железосодержащих препаратов содержащих наряду с железом и ряд жизненно важных микроэлементов [3].

Цель исследования - провести оценку острой токсичности нового железодекстранового комплекса на белых крысах.

Опыт проводился на базе вивария факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет». В качестве модели для проведения токсикологических исследований были выбраны белые крысы (массой 150-200 г). Токсическую оценку нового железосодержащего комплекса для лечения и профилактики железодефицитной анемии определяли, согласно методическим рекомендациям Самохина В.Т. (Воронеж, 1987 г.) [4].

В опыте при нахождения максимально переносимых доз при однократном введении нового разработанного железодекстранового препарата, животных разделили на 6 групп: пять опытных и одна контрольная (6-я) группа, по 10 особей в каждой. Лабораторным животным, вводили препарат в возрастающих дозах. В первой группе мышей стартовая доза составила 1 000 мг/кг массы тела. Крысам в группах 2-5 вводили препарат в дозах 1 700, 2 400, 3 100 и 3 800 мг/ кг, соответственно. Животным контрольной группы вводили соответствующий объем дистиллированной воды. В группах 1-4 и 6-й группе у крыс не было выявлено изменений в поведении, аппетит сохранился, также не было отмечено ухудшения физиологического состояния животных, животные были клинически здоровы. Доза 3 800 мг/кг, введенная крысам 5-й группы хотя и не вызвала смерти ни одного животного, но после введения наблюдались: вялость, учащенное дыхание, аппетит был снижен, что сказалось на потреблении корма, которое продолжалось 1,5-2 часа. Затем состояние всех животных нормализовалось. В связи с нашими наблюдениями у животных 5-й группы были отмечены первые признаки токсического отравления, исходя из этого доза 3 800 мг/кг была принята как максимально переносимая (МПД) и стартовая для определения летальных доз (ЛД).

С целью определения летальных доз разработанного железодекстранового препарата, было сформировано 5 опытных групп по 8 особей разного пола в каждой (4 самца и 4 самки). Железо-декстрановый препарат вводили внутрижелудочно в объеме 0,5 мл по всем правилам асептики, антисептики и личной гигиены, согласно методическим рекомендациям [4]. Контрольным животным вводили соответствующий объем дистиллированной воды. За состоянием животных наблюдали в течение 14 дней. Учитывали общее состояние и поведение животных, а также наличие или отсутствие симптомов токсического отравления животных, сроки наступления гибели в случае ее возникновения.

Железодекстрановый препарат вводили в возрастающих дозах с возрастающих концентрациях, при этом учитывали количество павших и выживших животных, процент летальности и ее выражение в пробитах (табл. 1).

Таблица 1. Схема опыта и результаты изучения острой токсичности железодекстранового препарата на белых крыс

№ группы	Доза препарата, мг/кг	Количество животных в группе на начало опыта, голов	Пало животных, голов	Выжило животных, голов	Леталь­ность %	Пробиты
1	3 800	8	0	8	0	3,13
2	5 100	8	1	7	12,5	3,85
3	6 400	8	2	6	25	4,33
4	7 700	8	5	3	62,5	5,32
5	9 000	8	8	0	100	6,87

Расчёт среднесмертельной дозы производили по формуле:

ЛД50 = (сумма (А + В)х(М - Н )) / 200,

где А и В - величины смежных доз, мг/кг, М и Н - частоты летальных исходов смежных доз, %, 200 - постоянный коэффициент.

Для белых мышей среднесмертельная доза составила: ЛД50 = ((8900х12,5) + (11500x12,5) + (14100x37,5) + (16700х37,5))/200 = 1410000/200 = 7 050 мг/кг.

На основании полученных данных построили пробитной график (по А.А. Ступникову, 1975) (рисунок 1). Величины ЛД16 и ЛД84 определили графически на основании доз в мг в соответствующих пробитах, по графику первой величине соответствует пробит 4, второй - пробит 6, соответственно.

Рис. 1. Пробитной график разработанного железодекстранового препарата для белых крыс

Показатель ошибки средней дозы эффекта МЛД50 рассчитали по формуле:

МЛД50 = (ЛД84 – ЛД16) / 2n,

где ЛД16 и ЛД84 -дозы эффекта, мг/кг, n - суммарное количество животных в группах, для которых значения пробитов находятся в пределах 3,5-6,5.

МЛД50 при расчете острой токсичности для белых мышей составила: МЛД50 = (8190,4-5740,1)/(24х2) = 2450,3/48 = 51,04 мг/кг (табл. 2).

Таблица 2. Показатели токсичности разработанного железодекстранового препарата для белых крыс

Вид животного	Показатель токсичности
	МПД	ЛД16	ЛД60	ЛД84	ЛД100	МЛД60
Белые крысы	3 800,0	5 740,1	7 050,0	8 190,4	8 250,0	51,04

Заключение. Поскольку показатель ЛД50 исследуемого железодекстранового препарата при однократном внутрижелудочном введении белым крысам составил 7050,0 мг/кг то в соответствии с ГОСТ 12.007-76 железодекстрановый препарат относится к 4 классу опасности, то есть вещества малотоксичные.

Список литературы:

1. Дельцов А.А. Фармакопрофилактика железодефицитной анемии поросят ферранималом-75 с кобальтом // Ветеринарная медицина. 2008. № 2-3. С. 25-27.
2. Денисова О.Ф. Эффективность применения тирозината меди для профилактики железодефицитной анемии поросят //Денисова О.Ф., Слесарева Е.В., Сологуб А.А., Абдуллаев И.А./ Ульяновский медико-биологический журнал. 2015. № 4. С. 116-120.
3. Карпуть И.М., Николадзе М.Г Диагностика и профилактика алиментарной анемии поросят. //Ветеринария 2003. №4. Москва С.34-37
4. Самохин, В. Т. Методические указания по токсикологической оценке новых препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных / В. Т. Самохин. - Воронеж, 1987. - 22 с.
5. Beard J. L. Iron metabolism: a comprehensive review / J.L. Beard, H. Dawson, D.J. Pinero // Nutr. Rev., 54 (1996), pp. 295-317.
6. Herbert V. Vitamin C-driven free radical generation from iron/ V. Herbert, S. Shaw, E. Jayatilleke // J. Nutr., 126 (1996), pp. 1213-1220.

Резюме. Недостаточность железа в организме вызывает разнообразные нарушения физиологических функций, снижая уровень переносчиков кислорода, нарушая кроветворную функцию костного мозга, уменьшая уровень ферментативных окислительно-восстановительных и иммунобиологических процессов, может привести к преждевременным родам, недоразвитию плода, или его асфикации, нарушению родовой деятельности. Если процессы всасывания железа нарушаются, а запасы железа истощаются, то возникает состояние железодефицита и развивается патология - железодефицитная анемия, нарушаются ферментативные, окислительно-восстановительные и иммунобиологические процессы. Данная проблема до сих пор остается не решенной наукой и ветеринарной практикой. Автором проведена оценка острой токсичности нового хелатного железосодержащего препарата, предназначенного для лечения и профилактики болезней, связанных с дефицитом железа для сельскохозяйственных животных, на белых крысах. В качестве модели для проведения токсикологических исследований были выбраны белые крысы (массой 150-200 г). В ходе проведенных исследований была определена максимально переносимая доза препарата на лабораторных животных, летальная доза и среднесмертельная доза, отсюда можно сделать вывод, что комплекс в соответствии с ГОСТ 12.00776 относится к 4 классу опасности, то есть вещества малотоксичные.

Ключевые слова: крысы, анемия, железо, декстраны, токсикологическая оценка, токсичность, летальная доза, максимально переносимая доза, среднесмертельная доза.

Сведения об авторе: Соколова Екатерина Александровна, аспирант кафедры терапии и фармакологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 356240 г. Михайловск, ул. Ленина 32; тел.: 8-988-7579317; e-mail: katerina.momotowa@yandex.ru - ответственный за переписку с редакцией.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей