Анализ патогенной микрофлоры при эндометрите собак: определение её чувствительности к антибактериальным препаратам различных групп

УДК: 619:618-019:579.8
DOI 10.33861/2071-8020-2024-4-37-39

Сазонова Е. А., Авраменко М. В., Чекрышева В. В., Ларин А. Д. Северо-Кавказский зональный научноисследовательский
ветеринарный институт - филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный
Ростовский аграрный научный центр», г. Новочеркасск

Эндометрит - это акушерско-гинекологическое заболевание воспалительного характера. Данная патология характеризуется возникновением воспалительного процесса в слизистой оболочке матки (эндометрий). По данным многих литературных источников заболевание чаще всего регистрируется у сук от 4- до 6-ти летнего возраста.

Основными причинами развития эндометрита принято считать: ложная щенность (беременность), тяжело проходящая два раза в год, сопровождающаяся сильным набуханием сосков, увеличением живота, набором веса и появлением молока; травмы репродуктивной системы, разрывы и эрозии на стенках матки, если собака вынашивала крупных щенков, различные патологии при родах; после родов плохо сокращающаяся матка не до конца очищается, что может привести к инфицированию; гибель щенков в момент родов или в утробе, неполное выведение или рассасывание плода, заражение во время родов нестерильными приборами; острые и хронические заболевания внутренних органов инфекционной и паразитарной этиологии; передача инфекции от кобеля суке во время вязки. Эндометрит проявится после проникновения инфекции из влагалища в полость матки собаки. При этом многие специалисты склонны к мнению, что основным фактором, провоцирующим эндометрит, считается эндокринное расстройство, повышающее уровень эстрогенов в крови питомца. Эта патология приводит к трансформации стенок сосудов. Наличие в матке патогенных организмов вызывает поражение эндометрия. Поэтому вторым фактором является вирусно-бактериальная инфекция, запускающая воспалительные процессы с интоксикацией организма собаки. Вагиниты, болезни половых органов, мочеполовой системы могут стать причиной заболевания.

Цель исследований - установить основной состав микрофлоры половых путей у собак с клиническими признаками эндометрита, а также установить чувствительность выделенных культур к антибактериальным веществам.

Задачи:

1) отбор проб экссудата из половых путей здоровых и с клиническими признаками эндометрита сук;

2) определение видового состава микрофлоры матки и влагалища у контрольной и опытной групп;

3) определение антибактериальной чувствительности выделенных культур к антибактериальным препаратам различных групп;

4) анализ и систематизация полученных данных.

Материалы и методы исследований. Исследования проводились на базе ветеринарной клиники СКЗНИВИ, а также в лаборатории творческого коллектива по изучению инфекционной патологии животных СКЗНИВИ-филиал ФГБНУ ФРАНЦ, в период с 2022 по 2023 гг. Для исследования были отобраны две группы собак (по 10 голов), имеющих одинаковые условия кормления и содержания в возрасте от 4-х до 6-ти лет. Контрольная группа - 10 голов собак без клинических проявлений акушерско-гинекологических патологий. Опытная группа - 10 голов собак с ярко выраженной симптоматикой эндометрита.

Отбор проб из половых ходов обеих исследуемых групп осуществляли при помощи зонд-тампона с транспортной средой. Определение видового состава микрофлоры проводили при помощи бактериологического анализа методом посева культур с мясо-пептонного бульона (МПБ) на дифференциально-диагностические среды (желточно-солевой агар (ЖСА), эндо, кандида агар, стрептококковый агар, лакто- и бифидум среды, кровяной агар), а также при помощи тест-системы KB005AR для определения стрептококков. Количественный метод подсчета микроорганизмов проводили в камере Горяева на 1 мл с разведением культуры 1:10. Диско-диффузионным методом определили чувствительность выделенных культур к антибактериальным препаратам в количестве 48 шт. На заключительном этапе исследований провели анализ и систематизацию полученных данных.

Результаты исследований и их обсуждение. В результате исследования отобранного патологического материала из половых путей сук обеих исследуемых групп установлен основной видовой состав микрофлоры (табл. 1, 2)

Таблица 1 Видовой состав микрофлоры контрольной группы n=10

Анализируя данные таблиц 1 и 2, установлено, что у животных опытной группы наблюдается угнетение микрофлоры половых ходов со стороны микроорганизмов рода Lactobacillus -10Л2±0,02 К0Е/мл и Bacterium bifidum - 10л1±0,04 кое/мл и активный рост патогенной и условно-патогенной микрофлоры (Е. ooli -10л8±0,02КОЕ/мл, Candida albicans - 10л6±1,0 КОЕ/мл, Staphylococcus aureus - 10л8±0,02 КОЕ/мл, Klebsiella - 10л7±0,5 КОЕ/мл) в сравнении с показателями от контрольной группы здоровых животных - Lactobacillus - 10л6±0,3 КОЕ/мл, Bacterium bifidum - 10л5±0,1 КОЕ/ мл, Е. соН - 10Л2±0,05 КОЕ/мл, Candida albicans - 10л1±0,01 К0Е/мл, Staphylococcus aureus - 10л3±0,7 КОЕ/мл.

Таблица 2 Видовой состав микрофлоры опытной группы n=10

Также проводя исследования микрофлоры матки и влагалища опытной группы, была обнаружена гемолитическая форма E. coli и бактерия рода Klebsiella (рисунок 1 и 2).

Рис. 1. Гемолитическая форма E. eoli Рис. 2. Klebsiella под микроскопом (окраска по Грамму)

В таблице 3 представлены результаты проверки резистентности выделенных патогенов к антибактериальным препаратам в процентном соотношении. Исследование проводили с применением диско-диффузионного методы. Результаты учитывали по зоне лизиса вокруг бумажного диска, пропитанного антибактериальным препаратом на чашке Петри. Резистентные (-) - вокруг бумажного диска нет зоны лизиса, то есть данный препарат не подействовал на патоген. Слабочувствительные (+) - диаметр зоны лизиса составил 0-10 мм. Среднечувствительные (++) -диаметр зоны лизиса 11-14 мм. Чувствительные (+++) - диаметр зоны лизиса 15-25 мм. Сильночувствительные - диаметр зоны лизиса > 25 мм.

Из таблицы 3 видно, что большинство антибактериальных препаратов показали положительную динамику в борьбе с патогенными микроорганизмами.

Заключение. Анализируя полученные нами данные по проведенным нами сравнительным исследованиям у животных опытной группы наблюдается угнетение микрофлоры половых ходов со стороны микроорганизмов рода Lactobacillus - 10Л2±0,02 КОЕ/мл и Bacterium bifidum - 10Л1±0,04 КОЕ/мл и активный рост патогенной и условно-патогенной микрофлоры (Е. соП - 10л8±0,02 кое/ мл, Candida albicans - 10Л6±1,0 КОЕ/мл, Staphylococcus aureus -10Л8±0,02 коЕ/мл, Klebsiella - 10Л7±0,5 коЕ/мл) в сравнении с показателями от контрольной группы здоровых животных - Lactobacillus - 10Л6±0,3 коЕ/мл, Bacterium bifidum -10Л5±0,1 кое/мл, е. сон - 10л2±0,05 кое/мл, Candida albicans -10Л1±0,01 коЕ/мл, Staphylococcus aureus - 10Л3±0,7 коЕ/мл. Проведенные исследования по антибиотикорезистентно-сти у опытной группы, выявили высокую резистентность микроорганизмов к доксициклину и фузидину (80%). Низкая резистентность микроорганизмов к антибактериальным препаратам выявлена у цефалоспоринов III поколения (цефтриаксон, цефатоксим), к хинолонам (норфлоксацин, ципрофлоксацин, офлоксацин), а также к аминогликозидам (канамицин, стрептомицин, неомицин).

Таблица 3 Резистентность выделенные патогенов к антибактериальным препаратам, %

	Рези­стент­ные (-)	Слабо­чувстви­тельные (+)	Средне­чувстви­тельные (++)	Чувстви­тельные (+++)	Сильно­чувстви­тельные (++++)
Цефалоспорины
I поколение
Цефазолин	60			20	20
Цефалексин	60				40
II поколение
Цефтазидим			20	40	40
Цефуроксим	60				40
Цефаклор	60				40
III поколение
Цефоперазон	50			20	30
Цефтриаксон					100
Цефотаксим					100
IV поколения
Цефепим	20				80
Хинолоны
Норфлоксацин				20	80
Энрофлоксацин				40	60
Ципрофлоксацин				20	80
Офлоксацин				20	80
Тетрациклины
Тетрациклин	60			20	20
Доксициклин	80			20
Аминогликозиды
Канамицин				80	20
Стрептомицин				100
Неомицин				80	20
Гентамицин				40	60
Амикацин				40	60
Тобрамицин	20			60	20
Противогрибковые
Клотримазол	20			60	20
Кетоконазол	60			20	20
Нистатин	20			60	20
Фузидин	80			20

Список литературы:

1. Андрос, Н. О. Сезонность эндометрита у собак / Н. О. Андрос, В. В. Чекрышева // Актуальные вопросы развития отраслей сельского хозяйства: теория и практика : Материалы IV Всероссийской конференции молодых ученых АПК. 2022. С. 134-137.

2. Андрос, Н. О. Клиническая картина эндометрита у собак / Н. О. Андрос, В. В. Чекрышева // Ветеринария Северного Кавказа. 2022. № 4.

3. Грязнева, Т. Н. Эндометриты у собак и пробиотикотерапия / Т. Н. Грязнева, Р. С. Ласковец // Сборник научных трудов Десятой Всероссийской межвузовской конференции по клинической ветеринарии в формате Purina Partners. НПО «Сельскохозяйственные технологии». 2020. С. 321-330.

4. Диагностика и лечение острого эндометрита у собак и кошек / Н. В. Шульгин, С. А. Михалевская, И. Н. Мягков [и др.] // Наука, образование, общество: актуальные вопросы и перспективы развития : Сборник научных трудов по материалам Международной научно-практической конференции. 2015. С. 84-85.

5. Дроздник, В. А. Коррекция патологических процессов при экспериментальном эндометрите у собак гомеопатическим препаратом мастометрин / В. А. Дрозд-ник, В. Н. Бочкарев // Ветеринарная патология. 2009. № 4 (31). С. 60-65.

6. Лечение гнойных эндометритов у собак / Н. А. Мыслович, В. С. Лыхина, А. А. Газин, В. Д. Родионов // Теоретические и прикладные проблемы современной науки и образования : Материалы Международной научно-практической конференции. 2017. С. 277-283.

7. Лечение собак мелких пород при эндометрите / О. М. Облап, М. О. Беляева, Л. Г. Войтенко, Г. В. Ильин // Актуальные проблемы и методические подходы к диагностике, лечению и профилактике болезней животных. 2017. С. 67-69.

8. Мордашева, Э. Б. Дифференциальная диагностика эндометрита и гиперплазии эндометрия у собак. 2002. 20 с.

9. Ооржак, Д. Р. Гнойный эндометрит (пиометра) у собак / Д. Р. Ооржак // Студенческая наука в современном развитии АПК : Материалы Всероссийской студенческой научно-практической конференции с международным участием, посвященной 110-летию со дня рождения Василия Родионовича Филиппова. 2023. С. 29-32.

10. Пензурова, С. А. Гистопатология хронических эндометритов собак / С. А. Пен-зурова, И. В. Чекуров // Известия ОГАУ. 2014. № 1.

11. Романович, А. А. Эндометрит у собак / А. А. Романович, А. С. Баркова // Молодежь и наука. 2021. № 3.

12. Чекрышева, В. В. Сочетанная патология при эндометрите у собак / В. В. Че-крышева, А. К. Гаркуша // Вестник Мичуринского государственного аграрного университета. - 2018. - № 4. - С. 153-156.

Заключение. В статье приведены данные о видовом составе микрофлоры матки и влагалища собак с клиническими признаками эндометрита, а также чувствительность данной микрофлоры к различным антибактериальным веществам. Исследования проводились по принципу сравнительного анализа двух групп животных. Для контрольной группы были отобраны здоровые животные (10 голов), для опытной группы, также 10 голов собак, имеющих клинические признаки эндометрита. Отбор образцов для проведения опыта осуществлялся на базе ветеринарной клинике СКЗНИВИ. Бактериологическое исследование проб экссудата из половых путей животных проводили в лаборатории творческого коллектива по изучению инфекционной патологии животных СКЗНИВИ-филиал ФГБНУ ФРАНЦ. В ходе исследования установлено, что у собак с диагнозом «эндометрит» наблюдается угнетение микрофлоры со стороны бактерий рода Lactobacillus и Bacterium bifidum - 10Л2±0-03 КОЕ/мл. Среди микрофлоры, провоцирующей развитие воспалительного процесса были обнаружены E. coli гемолитическая -1Ол8±о,о2 кое/мл, Candida albicans - 10л6±1-° КОЕ/мл, St. aureus - 10Л8±0-02 КОЕ/мл, Klebsiella - 10л7±0-5 КОЕ/мл. Чувствительность выделенных культур к антибактериальным препаратам проводили дискодиффузным методом к 48 препаратам.

Ключевые слова: собаки, эндометрит, микрофлора, бактериологическое исследование, антибактериальные препараты, воспаление слизистой оболочки матки, антибиотикорезистентность.

Сведения об авторах:

Авраменко Мария Владиславовна, младший научный сотрудник, аспирант Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института - филиала ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, Ростовское шоссе, 0; e-mail: gunkomasha1995@gmail.com.

Чекрышева Виктория Владимировна, доктор ветеринарных наук, директор Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института - филиала ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, Ростовское шоссе, 0; тел.: 8-908-5110139; e-mail: veterinar1987@mail.ru.

Ларин Алексей Дмитриевич, аспирант Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института - филиала ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, Ростовское шоссе, 0; e-mail: medicamente9@yandex.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Сазонова Екатерина Александровна, научный сотрудник Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института - филиала ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, Ростовское шоссе, 0; e-mail: yek.sazonowa2013@yandex.ru.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей