Обнаружение стафилококков в сборном молоке на молочно-товарных фермах московской области в зимний период

УДК 619:614.31
DOI 10.33861/2071-8020-2024-4-17-19

Попов П. А., Осипова И. С. Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии,
гигиены и экологии - филиал Федерального государственного бюжетного научного
учреждения «Федеральный научный центр -Всероссийский научно-исследовательский
институт эспериментальной ветеринарии имени К. И Скрябина и
Я. Р. Коваленко Российской академии наук», г. Москва

Молоко, как естественный продукт питания, играет важную роль в рационе детей и является неотъемлемой частью кормления молодняка животных. Для обеспечения жизненно важных питательных веществ и соблюдения санитарных норм молоко должно соответствовать высоким стандартам качества. Высокое содержание питательных веществ, в первую очередь белков, делает молоко практически идеальной средой для различных видов микроорганизмов, включая вредоносные бактерии. В условиях сельского хозяйства и фермерства важно поддерживать высокие санитарно-микробиологические стандарты при производстве молока [1, 2, 3].

Одним из способов улучшения качества и безопасности молочной продукции является применение эффективных методов контроля за содержанием микроорганизмов. Для этого используются различные методы и технологии, включая бактериологические и молекулярно-генетические исследования. Новые среды и методы, основанные на выявлении ферментов и антигенов, помогают быстро и точно определять типы микроорганизмов в молоке. Такие методы, как полимеразная цепная реакция и иммуномагнитная сепарация, обеспечивают надежное обнаружение возбудителей инфекций и обеспечивают безопасность потребления молочной продукции.

Поскольку качество молока чаще всего снижается из-за высокой микробной обсемененности, исследователи считают, что в молоке, полученном непосредственно от здорового животного, содержится лишь незначительное количество микроорганизмов. Однако после выдаивания происходит вторичное микробное обсеменение на всех этапах производства и переработки.

Для улучшения качества и безопасности молочной продукции в России важно использовать эффективные методы санитарно-микробиологического контроля. Бактериологический метод остается ведущим при диагностике инфекций, так как он позволяет выделить чистую культуру возбудителя и идентифицировать его по характерным признакам.

Для ускоренной идентификации полученных культур обычно используют дифференцирующие субстраты и соответствующие индикаторы.

Получение результатов стандартизированного бактериологического исследования микроорганизмов осуществляется с помощью ускоренных методов выявления антигенов возбудителей в биологических объектах и на объектах внешней среды. Методы, используемые в таких исследованиях, включают иммуноферментный метод, метод флуоресцирующих антител, реакцию коагглютинации, реакцию иммунодиффузии в агаре, реакцию торможения пассивной гемагглютинации [2, 5].

Некоторые из наиболее специфичных и чувствительных методов тестирования включают методы молекулярной ДНК-диагностики. Такие методы позволяют проводить анализ без предварительного обогащения материала, даже в присутствии родственной микрофлоры. Среди методов ДНК-диагностики наиболее часто применяют методы, основанные на ДНК-гибридизации и полимеразной цепной реакции. ПЦР-диагностика является самым современным, быстрым и точным методом исследования в микробиологии для выявления многих заболеваний. ПЦР-диагностика позволяет обнаружить наличие инфекционных возбудителей, в случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это невозможно.

В последние годы развитие получили методы иммуномаг-нитной сепарации, которые обеспечивают быстрое, надежное и высокочувствительное обнаружение бактерий в автоматическом режиме. Также активно используется лазерная флуоресцентная диагностика, позволяющая определить бактериальную обсемененность за считанные секунды [4, 6, 7].

Традиционные микробиологические методы обычно не обладают универсальностью и экспрессностью, и их реализация возможна только при наличии хорошей лабораторной базы и специалистов.

В связи с этим, для обеспечения санитарно-микробиологического контроля сырого молока на производстве необходимо активно разрабатывать и совершенствовать методы санитарно-гигиенического мониторинга. Микробиологический мониторинг позволяет более точно определить уровень санитарно-показательной микрофлоры в сыром молоке и своевременно принять корректирующие санитарные меры, чтобы обеспечить безопасность продукции.

Особое внимание в группе санитарно-значимых микроор- ганизмов заслуживает род стафилококков. Они часто являются возбудителями мастита коров и загрязняют сырое молоко и молочные продукты. Встречаются энтеротоксигенные штаммы стафилококков, вызывающие тяжелые токсикозы у людей.

Материалы и методы исследований. Метод работы - экспериментально-лабораторный. Работа проводилась в лаборатории ветеринарно-санитарной экспертизы ВНИИВСГЭ - филиала ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН. Образцы сырого молока отбирались на молочных фермах Московской области и подготавливались к исследованиям в соответствии с ГОСТ 26809.1-2014 «Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу». Было исследовано 217 проб сырого сборного молока.

Выделение стафилококков из сырого молока и определение их плазмокоагулирующей способности проводили согласно «Методическим указаниям по бактериологическому исследованию молока и секрета вымени коров» (1983) и ГОСТ 303472016 Молоко и молочные продукты. «Методы определения Staphylococcus aureus». Виды стафилококков были выделены только в монокольтурах.

Результаты исследований и их обсуждение. Обнаружение стафилококков в сборном молоке на молочно-товарных фермах Московской области проводилось в зимний и весенний период.

Результаты исследований проб сырого сборного молока на наличие Staphylococcus aureus и коагулазоотрицательных стафилококков представлены на рисунке 1.

Рис. 1. Индикация стафилококков в сборном молоке в различных хозяйствах Московской области в зимний период

Как видно на рисунке 1, стафилококки в зимний период на молочно-товарных фермах Московской области обнаруживались в 18,9% проб сборного молока в среднем по хозяйствам.

Результаты исследований по определению плазмокоагулирующей способности стафилококков представлены на рисунке 2.

Рис. 2. Соотношение Staphylococcus aureus и коагулазоотрицательных стафилококков в сборном молоке на фермах Московской области в зимний период

Как видно из данных рисунка 2, коагулазоотрицательные стафилококки в среднем по фермам выделялись в 73,3% случаев, а золотистый стафилококк регистрировали в 2,8 раза реже (26,7%).

Далее был изучен видовой состав коагулазоотрицательных стафилококков, выделенных из сырого сборного молока. Результаты анализа проб сборного молока, полученного на фермах Московской области, представлены на рисунке 3.

В соответствии с данными рисунка 3, коагулазоотрицательные стафилококки, выделенные из сборного молока во всех хозяйствах Московской области, были представлены видами Staphylococcus epidermidis (45,5% от числа выделенных коагу-лазоонегативных стафилококков), Staphylococcus haemolyticus (27,3%), Staphylococcus saprophyticus (18,2%) и Staphylococcus chromogenes (9,1%).

Рис. 3. Результаты идентификации коагулазоотрицательных стафилококков (%), выявленных в сборном молоке

На следующем этапе работы были проведены исследования по индикации и идентификации стафилококков в хозяйствах Московской области весной. На рисунке 4 представлены данные по выявлению стафилококков в сборном молоке в весенний период.

Рис. 4. Индикация стафилококков в различных хозяйствах Московской области в весенний период

Из данных рисунка 4 можно видеть, что весной уровень стафилококков был в среднем по фермам 38,1%, причем эти микроорганизмы обнаруживались в различных хозяйствах в пределах 42,9-61,5%, за исключением хозяйства 4, где стафилококки выявляли лишь в 14,3% случаев.

Сравнительные данные по уровню Staphylococcus aureus и коагулазоотрицательных стафилококков в весенний период лактации представлены на рисунке 5.

Рис. 5. Соотношение Staphylococcus aureus и коагулазоотрицательных стафилококков в сборном молоке на фермах Московской области в весенний период

Из представленных на рисунке 5 данных видно, что весной в сборном молоке чаще выявляли коагулазоотрицательные стафилококки (75,0% от числа исследованных проб), в 3 раза меньше - Staphylococcus aureus (25,0%).

Заключение. В течение 2023 года был проведен мониторинг видов коагулазоотрицательных стафилококков, которые были выделены из проб сборного молока на четырех молочно-товарных фермах и в частном секторе Московской области. В результате исследования была отмечена определенная взаимосвязь между частотой выделения коагулазонегативных стафилококков из сборного молока и сезонами года, а также учитывался фактор расположения обследуемых хозяйств. Также в ходе работы были выявлены наиболее распространенные представители коагулазоотрицательных стафилококков. Был проведен сравнительный анализ видов коагулазонегативных стафилококков, которые были обнаружены в течение двух лет в секрете вымени коров и сборном молоке на фермах Московской области.

Работа выполнена в соответствии с Государственным заданием по теме: FGUG-2022-0008 «Научно обосновать и разработать новые методы, средства и технологии обеспечения устойчивого ветеринарно-санитарного благополучия животноводства».

Список литературы:

1. Юшина, Ю. К. Качество и безопасность продуктов. Современные методы определения / Ю. К. Юшина // Мясные технологии. 2007. № 3. С. 22-23.

2. Артемов, А. А. Идентификация источников загрязнения пищевых продуктов стафилококками / А. А. Артемов, В. В. Ванханен // Рац. питание. 1983. Вып. 18. С. 101-103.

3. Ленченко, Е. М. Сравнительная оценка методов количественного учета бактерий / Е. М. Ленченко, В. С. Довбыш // Сельскохозяйственная биология. 2002. № 2. С. 123-126.

4. Перспектива применения биолюминесцентного метода при мониторинге продукции ветеринарного надзора / Е. А. Денисова, Г. М. Горяинова, Л. В. Арсеньева [и др.] // Ветеринария. 2023. № 7. С. 54-57.

5. Попов, П. А. Микробиологический состав молока и пути его контаминации / П. А. Попов // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. 2021. № 168. С. 208-216.

6. Попов, П. А. Применение метода АТФ-биолюминесценции для оценки качества санации доильного оборудования / П. А. Попов, Д. В. Грузнов, С. В. Токарев // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. 2020. № 4 (36). С. 468-472.

7. Попов, П. А. Гормональный состав молока продуктивных животных и его безопасность для человека // П. А. Попов, В. С. Бабу-нова // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. 2020. № 3 (35). С. 313-321.

Резюме. Сырое молоко, являющееся уникальным продуктом питания по своему составу и вкусу, занимает важное место в рационе большинства стран мира и используется для кормления сельскохозяйственных животных. В настоящее время, качество и безопасность сырого молока требуют постоянного контроля на всех этапах его производства для предотвращения пищевых отравлений, вызванных энтеротоксигенными стафилококками. Вспышки таких отравлений часто приводят к госпитализации больных, поэтому разделение стафилококков на патогенные и непатогенные виды имеет большое эпизоотологическое и эпидемиологическое значение. Большинство стафилококков является обычной микрофлорой слизистых оболочек и кожи без возбудителя заболевания. Однако, пищевые интоксикации, вызванные энтеротоксигенными штаммами стафилококков, особенно видом Staphylococcus aureus, представляют отдельную группу заболеваний такого рода. Немалая часть энтеро-токсигенных стафилококков не принадлежит к виду Staphylococcus aureus и даже к коагулазопозитивным стафилококкам в целом. Согласно некоторым данным, 11,2% энтеротоксигенных культур стафилококков, вызывающих пищевые интоксикации, являются коагулазонегативными. Из всего вышесказанного становится очевидной необходимость проводить исследования коагулазоотрицательных энтеротоксигенных стафилококков в сыром молоке, чтобы своевременно их выявлять и предотвращать токсикоинфекции и токсикозы, связанные с молочными продуктами.

Ключевые слова: сырое молоко, сборное молоко, молочные продукты, молочно-товарные фермы, стафилококк, токсикоинфек-ции, коагулазоотрицательные стафилококки, Московская область.

Сведения об авторах:

Попов Петр Александрович, доктор ветеринарных наук, руководитель Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной санитарии, гигиены и экологии - филиала ФНЦ ВИЭВ РАН; 123022, г. Москва, Звенигородское шоссе, 5; e-mail: popov.petr18@gmail.com.

Ответственный за переписку с редакцией: Осипова Ирина Сергеевна, кандидат ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной санитарии, гигиены и экологии - филиала ФНЦ ВИЭВ РАН; 123022, г. Москва, Звенигородское шоссе, 5; e-mail: irishka21062801@mail.ru.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей