Распространение Dirofilaria repens Railliet & Henry, 1911 на территории азиатской части России

УДК 576.895.132.5
DOI 10.33861/2071-8020-2023-4-28-31

Коняев С. В., Прилепский Ю. О. Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт
систематики и экологии животных Сибирского отделения Российской академии наук, г. Новосибирск

Нематоды Dirofilaria repens Railliet & Henry, 1911 - паразитические черви, относящиеся к семейству Onchocercidae Chabaud Anderson, 1959 надсемейства Filarioidea Chabaud Anderson, 1959. Дефинитивными хозяевами для этих паразитов служат прежде всего домашние собаки, а промежуточными являются множество видов комаров. Прижизненное обнаружение Dirofilaria repens у собак затруднено тем, что серологических тестов, подобных тем, что проводятся для Dirofilaria immitis (Leidy, 1856) Railliet & Henry, 1911, не разработано. Как правило, выявление микрофилярий при микроскопии, а также полимеразная цепная реакция (далее, ПЦР) используются для выявления инвазии. Большинство случаев заражения домашних животных остаются недиагностированными, что позволяет инвазии распространяться незамеченной.

Человек является аберрантным хозяином для Dirofilaria repens. Подкожный дирофиляриоз человека встречается на территории России, причем количество случаев заболевания растет. Так, с 1915 по 1996 гг. в России и странах СНГ насчитывалось 113 случаев заболевания подкожным дирофиляриозом [3, 5]. К 2011 году был диагностирован уже 701 случай дирофиляриоза человека [6]. Азиатская часть России остается плохо изученной в части распространения Dirofilaria repens, как из-за малого количества проведенных исследований, в которых как правило представлены небольшие выборки животных, а также используются методы не позволяющие проводить точное определение видовой принадлежности находок.

Целью настоящего исследования стал анализ современного распространения Dirofilaria repens у домашних собак на территориях Урала, Сибири и Дальнего Востока России.

Материалы и методы исследований. Материалом послужила 851 проба цельной крови от собак, поступившая для исследования на наличие ДНК Dirofilaria repens и Dirofilaria immitis за период с 2018 по 2023 год в ветеринарную лабораторию «VETUNION» из разных городов России. Выделение ДНК производили с помощью набора «РеалБест экстракция 100» из цельной крови. Для выявления ДНК дирофилярий использовали «Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК Dirofilaria immitis и ДНК Dirofilaria repens методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени» V-5406 (Изготовитель: БЕСТ, г. Новосибирск). Применение набора ограничивается случаями, когда в крови имеются микрофилярии, при однополых инвазиях, либо в препатентный период (после заражения, но до начала размножения) - ДНК дирофилярий в крови не обнаруживается. Встречаемость положительных результатов ПЦР исследований рассчитана для населенных пунктов и субъектов РФ, откуда поступали пробы. Встречаемость D. repens определялась путем расчета экстенсивности инвазии с 95% доверительным интервалом (CI), определенным методом Клоппера-Пирсона. Экстенсивность инвазии рассчитывали по формуле - ЭИ% = Кол-во положительных проб*100/Общий объем

Результаты исследований и их обсуждение. Всего за указанный период из Дальневосточного, Сибирского и Уральского федеральных округов в лабораторию поступило 851 проб.

Результаты, сгруппированные по субъектам Российской Федерации и населённым пунктам, представлены в таблице 1. Если к личество проб из населенного пункта было менее 5, а также если не было положительной реакции - такие результаты учитывались в общем по региону, без указания отдельной строкой таблицы.

Таблица 1 Заражённость Dirofilaria repens собак в азиатской части Российской Федерации

Регион / населенный пункт	ЭИ%	Количество проб	CI, 95
Дальневосточный федеральный округ	2,23%	314	0,9-4,54
Приморский край	1,55%	194	0,32-4,45
Артем	3,33%	30	0,08-17,22
Владивосток	0,86%	116	0,02-4,71
Уссурийск	2,22%	45	0,06-11,77
Хабаровский край	2,41%	83	0,29-8,43
Комсомольск-на-Амуре	5,00%	20	0,13-24,87
Сибирский федеральный округ	5,24%	248	2,82-8,8
Алтайский край	7,41%	27	0,91-24,29
Барнаул	8,70%	23	1,07-28,04
Кемеровская область	4,35%	23	0,11-21,95
Новокузнецк	11,11%	9	0,28-48,25
Красноярский край	2,94%	34	0,07-15,33
Красноярск	5,26%	19	0,13-26,03
Новосибирская область	8,33%	60	2,76-18,39
Новосибирск	7,27%	55	2,02-17,59
Омская область	4,48%	67	0,93-12,53
Омск	4,48%	67	0,93-12,53
Томская область	5,26%	19	0,13-26,03
Томск	5,56%	18	0,14-27,29
Уральский федеральный округ	7,61%	289	4,83-11,3
Курганская область	21,43%	14	4,66-50,8
Курган	21,43%	14	4,66-50,8
Свердловская область	8,74%	103	4,07-15,94
Екатеринбург	8,79%	91	3,87-16,59
Тюменская область	15,15%	33	5,11-31,9
Тюмень	11,11%	27	2,35-29,16
Челябинская область	4,07%	123	1,33-9,23
Троицк	8,33%	12	0,21-38,48
Челябинск	4,65%	86	1,28-11,48

В таблицу не были включены Республика Бурятия, Еврейская Автономная область, Забайкальский край, Камчатский край, Республика Саха (Якутия), Сахалинскя область, Республика Алтай, Иркутская область, Республика Хакасия, Ханты-Мансийский автономный округ-Югра, Ямало-Ненецкий автономный округ, так как малые объемы выборок и отсутствие положительных проб не позволяют нам объективно оценить распространенность Dirofilaria repens в этих регионах.

В Уральском федеральном округе было выявлено максимальное количество положительных проб - 7,61%. На Урале у собак диро-филярии ранее обнаруживались в Тюменской области, в г. Тюмень, где был выявлен дирофиляриоз у служебных и домашних собак, не покидавших территорию города. Микрофилярии были выявлены при микроскопии и были определены, как Dirofilaria immitis [7, 16]. В Свердловской, Челябинской, Курганской областях, Ханты-Мансийском и Ямало-Ненецком автономных области ранее опубликованных случаев у животных найти не удалось. В Челябинской области были описаны случаи заражения человека [22, 27]. Высокая экстенсивность инвазии в городе Курган и Курганской области - 21,43% (n=14), свидетельствует о том, что данный регион является частью естественного ареала подкожных дирофилярий.

В Сибири подкожные дирофилярии достаточно обычны в Алтайском крае, как у домашних, так и у диких животных [13, 17, 18, 19, 25]. При этом в соседней Республике Алтай дирофиляриоз у животных не был описан. В Тыве и Кемеровской области также не было найдено описаний случаев подкожного дирофиляриоза у животных. В Хакасии данные нематоды были зарегистрированы в Абакане, однако небольшая выборка (всего 3 поступившие пробы) не позволяет определить распространённость этих нематод в регионе [26]. У собак из Иркутской области были отмечены случаи заражения D. repens среди служебных животных, прибывших в Уфу [12]. В исследовании было представлено только 14 отрицательных образцов, что не позволяет сделать однозначных выводов. В Кемеровской области отмечается умеренная степень инвазии Dirofilaria repens (ЭИ% = 4,35), однако небольшое количество образцов и отсутствие анамнестических данных не позволяет сделать однозначных выводов относительно распространения дирофилярий в регионе. В Красноярском крае не было описанных случаев Dirofilaria repens у собак, нами из 34 проб получен только один положительный результат ПЦР. Для части проб из Новосибирской области у нас имелись анамнестические данные для отдельных животных. Случаи инвазии Dirofilaria repens отмечены у собак, не покидавших территорию Новосибирска и Новосибирской области, у 5 животных ПЦР дало положительную реакцию из 60 представленных в лабораторию проб. Ближайший крупный очаг расположен в г. Барнаул Алтайского края, где имеется стационарное неблагополучие по дирофиляриозу [18]. В Омской области Dirofilaria repens регистрируется как у завозных, так и у местных собак. Так из 802 исследованных собак у 3% было выявлено ДНК Dirofilaria repens в крови, по результатам секвенирования [20, 24]. Нами были получены сходные результаты - 4,48%. В Томской области было проведено одно исследование - исследовано 453 собаки методом ларвоскопии, затем положительные пробы, дополнительно проверяли ПЦР. Таким образом было выявлено 9 случаев Dirofilaria repens и 5 случаев Dirofilaria immitis [9]. Нами из 19 проб, поступивших из Томска и Северска, отмечен один положительный результат на Dirofilaria repens (ЭИ% = 5,26). Республика Бурятия считается благополучной по дирофиляриозу. Однако два исследования выявили случаи Dirofilaria repens и Dirofilaria immitis у диких хищников - волков [2]. В нашем случае из Бурятии была получена одна отрицательная проба. В Забайкальском крае у домашних собак дирофиля-риоз не зарегистрирован. Вместе с тем имеется описание единственного случая выявления Dirofilaria immitis у волка, добытого на юге Забайкальского края на границе с Китаем в Ононском районе [15]. ПЦР для выявления D. repens из проб крови от 11 собак из Читы не выявила ни одного случая заражения.

Паразитофауна диких плотоядных хорошо исследована на территории Республики Саха (Якутии), были выявлены случаи дирофиляриоза вызываемого D. immitis у диких животных, а также отмечен случай обнаружения подкожных дирофилярий у одной кошки и шести собак, микрофилярий и взрослые формы обнаруживались при вскрытии [4, 11, 12, 19, 21]. Экстенсивность инвазии Dirofilaria spp. достигает 22%, при этом, к сожалению, уделяется недостаточно внимания видовому определению находок. М.В. Андреева с соавторами приводит данные, что у 14 из 30 исследованных животных установлена микрофиляремия, а также на вскрытии выявлены Dirofilaria immitis [1]. Несмотря на то, что явных указаний на автохтонность случаев нет, заболевание выявлялось у крупных собак сторожевых пород, которые вряд ли могли покидать территорию республики. Положительных проб по Dirofilaria repens в нашем исследовании не было, однако не смотря на высокую заражённость животных в регионе, в лабораторию было отправлена только одна проба.

На Дальнем Востоке дирофиляриоз описан в СССР. В Хабаровском крае исследования проводились ранее у собак и диких животных. Так, при исследовании 659 проб от собак методами видоспецифической ПЦР, иммунохроматографического анализа и ларвоскопией у 17,29% животных было выявлено заражение ди-рофиляриями, при этом ЭИ Dirofilaria repens - 8,04% [10]. Нами зарегистрирована высокая заражённость собак в Комсомольске-на-Амуре. В Приморском крае сердечный дирофиляриоз достаточно обычен, однако данных по нематодам Dirofilaria repens у собак нет. Данный вид был выявлен в городах Артем, Владивосток и Уссурийск, а ЭИ по Приморскому краю составила 1,55%. В г. Благовещенск Амурской области ранее регистрировались случаи подкожного дирофиляриоза у людей и животных. У 35 из 130 исследованных кошек и собак выявлена микрофиляремия, вид дирофилярий не указан, однако оговаривается, что у животных в отдельных случаях отмечали взрослых подкожных дирофилярий [8]. Согласно отчётам Управления ветеринарии и племенного животноводства Амурской области регистрируется только Dirofilaria immitis [23]. В городе Белогорск из двух сданных проб крови, обе оказались положительными по Dirofilaria repens. Поиск опубликованных данных по Еврейской автономной области не привёл к положительным результатам. Хотя не исключено, что из-за сложной истории этого субъекта федерации часть его территории могло быть исследовано во время гельминтологических экспедиций на Дальний Восток, а относимые к ней находки были записаны в существовавшие на то время административно-территориальные единицы. Из 26 предоставленных проб крови животных, ни одна не оказалась положительной по ДНК Dirofilaria repens. На Камчатке, в публикациях описывающих фауну нематод, паразитирующих у собак, этот паразит не упоминается. По результатам ПЦР ни в одной из трёх проб из этого регионе не было положительной реакции. В Магаданской области дирофиляриоз также не зарегистрирован, исследована 20 проб крови. Данные по Сахалинской области представлены в литературе единственной публикацией, в которой только Dirofilaria immitis приводится в списке фауны гельминтов собак на острове Сахалин [14]. В 7 предоставленных проб крови животных, ДНК подкожных дирофилярий не выявлена.

Исследованные пробы крови в лабораторию направлялись без анамнеза животных, история перемещения животных внутри страны не была представлена, поэтому для ряда населённых пунктов случаи могут быть завозными. Данный анализ назначается ветеринарными врачами, как правило, при подозрении на заболевание, при рутинном обследовании животных, а также для видовой идентификации уже выявленных в крови микрофилярий. Таким образом, данная выборка может не отражать заражённость популяции собак в целом. Положительные случаи могут быть перепредставле-ны в выборке из-за целей проводимого анализа. С другой стороны, высокая заражённость животных в городах, из которых получены большие выборки, вероятнее всего свидетельствует о постоянном присутствии данных нематод в регионе.

Заключение. Распространение дирофиляриоза, вызываемого Dirofilaria repens, на территории России до сих пор изучено неполно. Требуются масштабные паразитологические исследования, обязательно с определением видовой принадлежности ди-рофилярий, а также включающие всех возможных хозяев этого паразита. Ветеринарные врачи часто не учитывают, что обнаружение микрофилярий в крови животных требует определение вида нематод, что имеет решающее значение для дальнейшего лечения заболевания. Для более детального изучения распространения дирофиляриоза, вызываемого Dirofilaria repens, необходимы фокусированные исследования в регионах, где данные нематоды ранее не были зарегистрированы. Дальнейшее изучение распространения дирофилярий в азиатской части России требует проведения более обширных исследований.

Исследование поддержано Программой фундаментальных научных исследований 2021-2030: FWG-2021-0001.

Список литературы:

1. Андреева, М. В. Дирофиляриоз собак в окрестностях Якутска / М. В. Андреева // Вестник ветеринарии. 2013. № 2 (65). С. 16-18.

2. Бурдуковский, С. С. Гельминтофауна волка на территории Республики Бурятия / С. С. Бурдуковский, А. М. Третьяков, С. Н. Девятков // Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В. Р. Филиппова. 2015. № 3. С. 115-117.

3. Бякова, О. В. Облигатно-трансмиссивный зооноз служебных собак / О. В. Бякова, Л. В. Пилип // Аграрная наука - сельскому хозяйству. 2018. С. 364-366.

4. Дирофиляриоз плотоядных животных в Якутии, способ выделения из крови микрофилярий / Г. Г. Колесова [и др.] // Российский паразитологический журнал. 2013. № 3. С. 87-91.

5. Дирофиляриоз человека: диагностика и характер взаимоотношений возбудителя и хозяина / В. П. Сергиев [и др.] // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2009. № 3. С. 1-6.

6. Дирофиляриоз человека в России / В. П. Сергиев [и др.] // Российский паразитологический журнал. 2012. № 4. С. 60-64.

7. Домацкий, В. Н. Эпизоотология и профилактика дирофиляриоза собак / В. Н. Домацкий, Е. М. Ермакова // European Scientific Conference. 2017. С. 205-207.

8. Жукова, Н. Н. Дирофиляриоз в Амурской области / Н. Н. Жукова, Л. С. Макеева, Н. В. Яковлева // Дальневосточный журнал инфекционной патологии. 2012. № 21. С. 175-177.

9. Заражение собак дирофиляриозом в городе Томске: выпускная бакалаврская работа по направлению подготовки: 06.03. 01. Биология / О. М. Подоляк [и др.] // 2020.

10. Иванова, И. Б. Паразитарная система Dirofilaria sp. в городе Хабаровске / И. Б. Иванова // 2013.

11. Коколова, Л. М. Дирофиляриоз (Dirofilaria immitis) городских собак / Л. М. Коколова, С. С. Касьянова // Научные исследования: от теории к практике. 2015. № 1 (2). С. 12-14.

12. Колпакова, Т. А. Эпидемиологическое обследование Вилюйского округа ЯАССР / Т. А. Колпакова // Изд-во АН СССР. 1933. Т. 292.

13. Кравченко, И. А. Дирофиляриоз собак в Алтайском крае: характеристика возбудителя, диагностика и меры борьбы / И. А. Кравченко, В. В. Разумовская // Издательство Алтайского ГАУ. 2015. 32 с.

14. Кротов А. И. Работы по гельминтологии, посвящённые 80-летию акад. К.И. Скрябина. 1959. С. 98-102.

15. Кирильцов Е. В. Паразитофауна волка (Canis lupus, Linnaeus, 1758) юга Забайкальского края / Е. В. Кирильцов // Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В. Р. Филиппова. 2015. № 4. С. 135-138.

16. Либерман, Е. Л. Случай дирофиляриоза служебных собак в г. Тюмени / Е. Л. Либерман, А. Н. Сибен // Агропродовольственная политика России. 2014. № 9. С. 62-64.

17. Лунева, Н. А. Биологические особенности основных гельминтозов домашних плотоядных животных Алтайского края / Н. А. Лунева // 2015.

18. Мезенцев, С. В. Эпизоотология дирофиляриоза собак в Алтайском крае / С. В. Мезенцев // Вестник АГАУ. 2013. № 5 (103). С. 110-113.

19. Новикова, М. Ю. Эпизоотология кровепаразитарных заболеваний у плотоядных в городе Барнауле / М. Ю. Новикова, Н. М. Понамарeв, Н. В. Тихая // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2023. № 1 (219). С. 87-91.

20. Основные результаты исследований Омского НИИ природно-очаговых инфекций за 2011-2020 гг. / Н. В. Рудаков [и др.] // Национальные приоритеты России. 2021. № 3 (42). С. 8-18.

21. Опасность распространения Dirofilaria immitis у собак в Центральной Якутии, лечебно-профилактические и санитарно-гигиенические мероприятия / Л. Ю. Гаврильева [и др.] // Ветеринария и кормление. 2021. № 5. С. 11-15.

22. Парамонов, В. В. Диагностика, клинические проявления и распространённость дирофиляриоза собак / В. В. Парамонов // Вестник Башкирского государственного аграрного университета. 2012. № 4. С. 29-31.

23. Пойденко, А. А. Проблема распространения и профилактики дирофи-ляриоза на территории Амурской области / А. А. Пойденко // Агропромышленный комплекс: проблемы и перспективы развития. 2018. С. 304-305.

24. Старостина, О. Ю. Зараженность дирофиляриями собак в Омской области / О. Ю. Старостина, Т. С. Рязанова, А. В. Свердлова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2020. № 2. С. 37-42.

25. Ткаченко, Л. В. Анализ структуры смертности у безнадзорных половозрелых собак (секционное исследование) / Л. В. Ткаченко // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. 2021. № 2 (54). С. 141-147.

26. Экология Южной Сибири и сопредельных территорий: мат. XXII Междунар. науч. школы-конф. 2018. 196 с.

27. Эпидемиология и клиника случаев дирофиляриоза в Челябинской области / Т. А. Дубовикова [и др.] // Известия высших учебных заведений. Уральский регион. 2018. № 2. С. 126-132.

Резюме. В данной статье приведено описание распространенности нематоды Dirofilaria repens на территории Уральского, Сибирского и Дальневосточного федеральных округов. Авторами была исследована 851 проба крови, поступившая из различных городов азиатской части Российской Федерации, от собак методом видоспецифической полимеразно-цепной реакции. ДНК нематоды Dirofilaria repens была выявлена в пробах из Приморского, Хабаровского, Алтайского и Красноярского краев, а также из Кемеровской, Новосибирской, Омской, Томской, Курганской, Свердловской, Тюменской и Челябинской областей. Впервые представлены случаи регистрации нематоды Dirofilaria repens у собак в Челябинской области (ЭИ%= 4,07, n=123) в городах Троицк и Челябинск, Курганской области, в г. Курган (ЭИ%= 21,43, n=14), Свердловской области - в городах Екатеринбург и Камышлов (ЭИ%=8,74, n=103), Новосибирской области - городе Новосибирск (ЭИ% = 8,33, n=60), Красноярском крае - городе Красноярске (ЭИ% = 2,94, n=34), Кемеровской области - в городе Новокузнецк (ЭИ% = 4,35, n=23), Приморском крае - города Артем, Владивосток, Уссурийск (ЭИ% = 1,55, n=194). Авторы считают, что для более детального изучения распространения дирофиляриоза, вызываемого Dirofilaria repens, необходимы фокусированные исследования в регионах, где данные нематоды ранее не были зарегистрированы.

Ключевые слова: Dirofilaria repens, домашние собаки, Дальний Восток, Урал, Сибирь, дирофиляриоз собак, подкожный дирофиляриоз, распространение, ПЦР, нематоды.

Сведения об авторах:

Прилепский Юрий Олегович, младший научный сотрудник лаборатории паразитологии, ФГБУН «Институт систематики и экологии животных» СО РАН; 630091, г. Новосибирск, ул. Фрунзе, 11; тел.: 8-918-5708863; e-mail: prilepsky.yo@yandex.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Коняев Сергей Владимирович, кандидат биологических наук, заведующий лабораторией паразитологии ФГБУН «Институт систематики и экологии животных» СО РАН; руководитель научно-образовательного отдела ветеринарной лаборатории VetUnion; 630091, г. Новосибирск, ул. Фрунзе, 11; тел.: 8-383-2170826; e-mail: s.konyaev@yahoo.com.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей