|
УДК 619:579.62 DOI 10.33861/2071-8020-2022-4-16-18 Миронова А.А., Чекрышева В.В., Миронова Л.П. Северо-Кавказский зональный научноисследовательский ветеринарный институт - филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный Ростовский аграрный научный центр», г. Новочеркасск Ковалева Ю.Г. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение «Донской государственный аграрный университет», Ростовская область, пос. Персиановский Кишечный микробиоценоз представляет собой высокоспециализированную систему, чутко реагирующую качественными и количественными сдвигами на динамическое состояние организма и на неблагоприятные внешние воздействия. Согласно современному научному представлению, нормальную микрофлору животного рассматривают как филогенетически сложившуюся систему множества микробиоценозов, характеризующихся определённым видовым составом и занимающих тот или иной биотоп в организме [4, 7]. Многочисленными исследованиями доказано, что более 60% общего количества микроорганизмов сосредоточено в желудочно-кишечном тракте. Микрофлора кишечника выполняет ряд функций: морфокинетическое действие (формирование макро- и микроскопической структуры внутренних органов животного); участие в водно-солевом обмене, поддержание pH и регуляция анаэробиоза; участие в метаболизме углеводов, белков, липидов и других соединений; участие в рециркуляции желчных кислот, стероидов и других макромолекул; продукция биологически активных соединений (летучих жирных кислот, витаминов, гормонов, токсинов, антибиотиков); иммуногенная роль; обеспечение колонизационной резистентности и предотвращение транслокации (защита от патогенных микроорганизмов); детоксикация экзогенных и эндогенных субстратов и метаболитов; антимутагенная роль; регуляция газового состава полостей; хранилище микробных плазмидных и хромосомных генов (важно для поддержания стабильных микробных сообществ в различных популяциях животных [1, 2, 4, 5, 8]. Всю доступную для культивирования нормальную микрофлору толстой кишки условно подразделяют на облигатную - постоянную, факультативную - непостоянную и транзи-торную - случайную [3, 7]. К индигенной (собственной) микрофлоре кишечника относятся лакто- и бифидобактерии, являющиеся активными антагонистами условно-патогенных и патогенных энтеробактерий. От состава и количественных характеристик индигенной микрофлоры желудочно-кишечного тракта напрямую зависит уровень антагонистической активности кишечной аутофлоры и выполнение ею вышеперечисленных функций [2, 6, 7]. Цель исследований - изучить влияние микотоксинов в корме свиноматок на количественный и качественный состав индигенной микрофлоры в кале поросят. Материалы и методы исследований. Объектом изучения были чистопородные свиноматки и поросята крупной белой породы в возрасте до двух месяцев. По принципу аналогов было сформировано две группы супоросных свиноматок по 15 голов в каждой. Содержание животных было групповым - по 15 голов в станке. Во время беременности и после опороса свиноматки с поросятами первой группы находились на рационах, содержащих микотоксины на уровне фоновых значений (Т-2 токсин ниже 0,05 мг/кг, охратоксин ниже 0,01 мг/кг комбикорма). Животные второй опытной группы получали рацион с содержанием Т-2 токсина и охратоксина, в количествах 0,1-0,2 и 0,020,1 мг/кг комбикорма, соответственно. Бактериологические исследования индигенной микрофлоры (бифидобактерии, лактобактерии, энтерококки, эшерихии, Proteus spp., стафилококки, сальмонеллы, Klebsiella, эшерихии гемолизирующие, клостридии) осуществляли по общепринятым в микробиологии методикам определения морфологических и культуральных свойств микроорганизмов. Результаты исследований и их обсуждение. В первой группе было 24 поросенка от 6 свиноматок, получавших полнорационный корм, содержащий микотоксины на уровне фоновых значений. Во второй группе было 18 поросят, полученных от 5 свиноматок, кормление которых осуществлялось согласно тому же рациону, но кормами, содержащими микотоксины. Таблица 1 Количественный состав микрофлоры в кале у поросят в первый день жизни Наименование микроорганизмов | Количество микроорганизмов, lg/г кала (М±м) | 1 группа | 2 группа | всего | % обнаружения | всего | % обнаружения | Бифидобактерии | 0 | 0 | 0 | 0 | Лактобактерии | 2,94±0,561 | 75,0 | 1,87±0,864* | 50,0 | Энтерококки | 2,38±0,392 | 70,6 | 2,606±0,336* | 83,3 | Эшерихии | 2,89±0,385 | 95,8 | 5,93±0,694* | 100,0 | Proteus spp. | 0 | 0 | 0 | 0 | Стафилококки | 0 | 0 | 0 | 0 | Сальмонеллы | 0 | 0 | 0 | 0 | Klebsiella | 0 | 0 | 0,2 | 5,5 | Эшерихии гемолизир. | 0 | 0 | 0,8±0,231 | 11,1 | Клостридии | 0 | 0 | 0 | 0 | Примечание: * - р<0,05 Как видно из данных таблицы 1, с первого дня жизни у поросят этих групп отмечены различия в количественном и качественном составе микрофлоры кишечника. Так, у всех поросят второй группы (100%) кал содержал непатогенные эшерихии в количестве 5,93±0,694 lg/г У трех поросят из первой группы титр был ниже 0,5 lg/г кала, а разброс значений в выборке составил от 0,28 до 9,27 lg/г кала; от одного поросенка эшерихии не выделялись. По данным изученной нами литературы, непатогенные эшерихии являются нормальной микрофлорой кишечника у поросят первого дня жизни, поэтому выделение этих бактерий в большем количестве у животных второй группы нельзя рассматривать как дисбактериоз или другое патологическое состояние. Энтерококки высевались из кала животных обеих групп, при этом в первой группе они были выделены у 17 голов (70,6%), а во второй группе у 15, что составило 83,3%. Тем не менее, при сравнении этих групп выявлены статистически значимые отличия в количестве энтерококков в кале. Лактобактерии высевались в 75,0% и 50,0% от поросят первой и второй групп, соответственно; также обнаружены статистические различия в содержании лактобактерий. Так, в первой группе их количество колебалось от 0 до 11,14 lg/г кала, тогда как во второй группе от 0 до 3,12. Бифидобактерии у поросят обеих групп в первый день жизни не высевались. Кроме того, у одного поросенка из второй группы были выделены клебсиеллы в количестве 0,2 lg/г кала и у двух -гемолитические эшерихии (11,1%) в количестве 0,96 и 0,49 lg/г. Таким образом, при сравнительном бактериологическом исследовании кала поросят, полученных от свиноматок первой группы (корм с фоновым содержанием микотоксинов) и от свиноматок второй группы (корм с микотоксинами), выявлены статистически значимые различия, патогенетическое значение которых не вполне ясно. Вместе с тем, высевание из кала поросят, полученных от самок второй группы, достоверно большего количества эшерихий и гемолитических штаммов эшерихий дает основание говорить о большей вероятности развития у этих животных бактериальных поражений желудочно-кишечного тракта. Таблица 2 Количественный состав микрофлоры кала у поросят в двадцатидневном возрасте Наименование микроорганизмов | Количество микроорганизмов, lg/г кала (М±м) | 1 группа | 2 группа | всего | % обнаружения | всего | % обнаружения | Бифидобактерии | 8,71±0,722 | 100,0 | 8,19±0,880 | 100,0 | Лактобактерии | 8,91±0,679 | 100,0 | 8,74±0,975 | 100,0 | Энтерококки | 7,30±0,607 | 100,0 | 5,45±0,698* | 100,0 | Эшерихии | 6,01±0,569 | 100,0 | 4,34±0,566* | 100,0 | Proteus spp. | 0 | 0 | 0 | 0 | Стафилококки | 4,13±0,341 | 87,5 | 5,01±0,619 | 94,4 | Сальмонеллы | 0 | 0 | 0 | 0 | Klebsiella | 0 | 0 | | | Эшерихии гемолизир. | 0 | 0 | 0 | 0 | Клостридии | 0 | 0 | 0 | 0 | Примечание: * - р<0,05 Согласно таблице 2, к двадцатому дню жизни бифидо- и лактобактерии обнаруживаются у всех подопытных поросят в количествах, не имеющих достоверных различий. У всех подопытных поросят (100%) к 20 дню жизни высевались из кала энтерококки и эшерихии. В первой группе среднее число энтерококков было в 1,3 раза выше в сравнении со второй группой, число эшерихий - в 1,4 раза. Стафилококки в первой группе высевались у 87,5% поросят, во второй - у 94,4%; разница в числовых значениях показателя числа стафилококков первой и второй групп не имела достоверных различий. Продолжили исследование проб кала от животных этих же групп через 10 дней (табл. 3). Необходимо отметить, что к 30 дню доля молока матерей в питании молодняка физиологически значительно уменьшается. Поросята переходят на питание по рациону, состав которого приближен к таковому у взрослых животных, что проявляется общим снижением количества индигенной микрофлоры в обеих группах. Таблица 3 Количественный состав микрофлоры кала у поросят в тридцатидневном возрасте Наименование микроорганизмов | Количество микроорганизмов, lg/г кала (М±м) | 1 группа | 2 группа | всего | % обнаружения | всего | % обнаружения | Бифидобактерии | 7,55±0,809 | 100,0 | 6,85±0,853* | 100,0 | Лактобактерии | 7,31±0,742 | 100,0 | 6,31±0,926* | 100,0 | Энтерококки | 6,94±0,626 | 100,0 | 5,66±0,709* | 100,0 | Эшерихии | 7,02±0,632 | 100,0 | 6,0±0,536* | 100,0 | Proteus spp. | 0 | 0 | 0 | 0 | Стафилококки | 2,91±0,281 | 100,0 | 3,45±0,452 | 100,0 | Сальмонеллы | 0 | 0 | 0 | 0 | Klebsiella | 0 | 0 | 0 | 0 | Эшерихии гемолизир. | 0 | 0 | 0 | 0 | Клостридии | 0 | 0 | 0 | 0 | Примечание: * - р<0,05 В нашем опыте количество бифидобактерий в первой группе снизилось на 15,4%, лактобактерий - 21,9%, во второй - бифидобактерий на 19,6%, лактобактерий - на 38,5%, благодаря чему разница средних числовых показателей между группами поросят вновь стала достоверной. Количество эшерихий в первой группе осталось на прежнем уровне, а во второй группе увеличилось на 38,3%, что к 30 дню привело к сближению числового значения показателя, но разница по-прежнему оставалась статистически достоверной. Количество энтерококков в первой группе снизилось на 5,2%, во второй группе осталось прежним, разница между группами продолжала оставаться достоверной и к месяцу жизни составила 22,6%. У всех подопытных животных (100%) к 30 дню жизни из кала высевались стафилококки, но среднее число их уменьшилось в сравнении с показателями 20 дня жизни в первой группе на 29,5%, во второй - на 31,1%, разница при этом перестала быть достоверной. Таким образом, в тридцатидневном возрасте числовые значения бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков и эшерихий, выделяющихся из кала поросят первой группы, были достоверно выше в сравнении со второй группой. Таблица 4 Количественный состав микрофлоры кала у поросят в возрасте двух месяцев Название микроорганизмов | Количество микроорганизмов, lg/г кала (М±м) | 1 группа | 2 группа | всего | % обнаружения | всего | % обнаружения | Бифидобактерии | 8,39±0,828 | 100,0 | 7,38±0,655* | 100,0 | Лакто-бактерии | 8,11±0,407 | 100,0 | 6,34±0,749* | 100,0 | Энтерококки | 7,25±0,685 | 100,0 | 5,53±0,818* | 100,0 | Эшерихии | 7,73±0,766 | 100,0 | 6,24±0,865* | 100,0 | Proteus spp. | 0 | 0 | 0 | 0 | Стафилококки | 3,83±0,447 | 100,0 | 4,97±0,718* | 100,0 | Сальмонеллы | 3,49±0,955 | 50,0 | 5,37±0,823 | 66,7 | Klebsiella | 0 | 0 | 2,49±1,144 | 50,0 | Эшерихии гемолизир. | 0 | 0 | 3,49±1,077 | 33,3 | Клостридии | 0 | 0 | 0 | 0 | Примечание: * - р<0,05 Качественный состав индигенной микрофлоры у двухмесячных поросят первой и второй групп был одинаковым (табл. 4). Имеются статистически значимые отличия в количественном составе микрофлоры. Так, из 1 г кала поросят первой группы полезной микрофлоры: бифидобактерий высевалось на 13,7%, лактобактерий - на 27,9%, энтерококков - на 31,1%, эшерихий - на 23,8% больше. Количество стафилококков - нежелательной составляющей микробиоценоза кишечника у поросят второй группы превышало таковое в первой группе на 29,8%. В кале у половины поросят из первой и 66,7% из второй группы были обнаружены сальмонеллы. Кроме того, у трех поросят из второй группы (50,0%) выявлены бактерии рода Klebsiella в количестве 2,49±1,144 lg/г кала и у двух поросят (33,3%) эшерихии гемолизирующие в количестве 3,49±1,077 lg/г кала. Таким образом, у двухмесячных поросят первой группы преимущественной микрофлорой является ассоциация бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков и эшерихий, тогда как у поросят второй группы, их количество достоверно ниже. Ей на смену приходит условно-патогенная микрофлора с преимущественным размножением сальмонелл, клебсиел и патогенных эшерихий. Клинически у таких животных появляется жидкий кал. Заключение. Кормление свиноматок во время беременности и лактации полнорационными кормами без микотоксинов способствует более быстрому количественному и качественному формированию индигенной микрофлоры, состоящей из ассоциации бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков и эшерихий. Уровень индигенной микрофлоры от 5 lg/г фекалий препятствует размножению в кишечнике у молодняка условно-патогенной микрофлоры и защищает поросят от неспецифических гастроэнтеритов. Список литературы: 1. Баевский Р.М., Берсенева А.П. Оценка адаптационных возможностей организма и риск развития заболеваний// Медицина. 1997. 265 с. 2. Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий// Медицина. 1999. 367 с. 3. Бухарин О.В., Каган Ю.Д., Бурмистрова А.Л. Сальмонеллы и сальмонеллёзы// 2000. 256 с. 4. Бурмистрова А.Л. Иммунный гомеостаз и микросимбиоценоз: метаморфозы и пути развития воспалительных заболеваний кишечника// 1997. 215 с. 5. Влияние микотоксинов на иммунную систему свиней/ И. Освальд, С. Бо-хет, Д. Мартин, Ф. Пинтон, И. Тарану// Европейский семинар по микотоксинам «Оценка воздействия микотоксинов в Европе». 2005. С. 69-78. 6. Клайв М.О. Совокупность желудочно-кишечных реакций на корм и их регуляция// WalthamFocus. 1997. Т. 7. № 1. С. 2. 7. Миронова Л.П., Леляк А.И., Миронова А.А., Коссе В.Ф. Способ биопрофилактики энтеробактериозов нутрий с помощью препарата Ветом-1.1// Ученые ДонГАУ - АПК XXI века. 2000. С. 17-20. 8. Сурай П., Дворская Ю. Взаимодействие между микотоксинами, иммунитетом и антиоксидантной системой// Европейский семинар по микотоксинам «Оценка воздействия микотоксинов в Европе». 2005. С. 85-96. Резюме. Кишечный микробиоценоз представляет собой высокоспециализированную систему, чутко реагирующую качественными и количественными сдвигами на динамическое состояние организма и на неблагоприятные внешние воздействия. Согласно современному научному представлению, нормальную микрофлору животного рассматривают как филогенетически сложившуюся систему множества микробиоценозов, характеризующихся определённым видовым составом и занимающих тот или иной биотоп в организме. К индигенной (собственной) микрофлоре кишечника относятся лакто- и бифидобактерии, являющиеся активными антагонистами условно-патогенных и патогенных энтеробактерий. От состава и количественных характеристик индигенной микрофлоры желудочно-кишечного тракта напрямую зависит уровень антагонистической активности кишечной аутофлоры и выполнение ею вышеперечисленных функций. Бактериологические исследования индигенной микрофлоры (бифидобактерии, лактобактерии, энтерококки, эшерихии, Proteus spp., стафилококки, сальмонеллы, Klebsiella, эшерихии гемолизирующие, клостридии) авторы осуществляли по общепринятым в микробиологии методикам определения морфологических и культуральных свойств микроорганизмов. В статье представлены результаты исследования влияния микотоксинов в корме свиноматок на количественный и качественный состав индигенной микрофлоры в кале поросят в возрасте от одного дня до двух месяцев. Кормление свиноматок во время беременности и лактации полнорационными кормами без микотоксинов способствует более быстрому количественному и качественному формированию индигенной микрофлоры, состоящей из ассоциации бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков и эшерихий. У поросят, полученных от свиноматок, в корме которых присутствовали микотоксины, количество полезной микрофлоры достоверно ниже. Ей на смену приходит условнопатогенная микрофлора с преимущественным размножением сальмонелл, клебсиел и патогенных эшерихий. Уровень инди-генной микрофлоры от 5 lg/г фекалий препятствует размножению в кишечнике у молодняка условно-патогенной микрофлоры и защищает поросят от неспецифических гастроэнтеритов. Ключевые слова: свиноматки, поросята, микотоксины, индигенная микрофлора, условно-патогенная микрофлора, биоценоз, бифидобактерии, лактобактерии, энтерококки, эшерихии. Сведения об авторах: Чекрышева Виктория Владимировна, кандидат ветеринарных наук, директор Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института - филиала ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, ул. Ростовское шоссе, 0; тел.: 8-918-5943886; e-mail: veterinar1987@mail.ru. Миронова Людмила Павловна, доктор ветеринарных наук; ведущий научный сотрудник Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института - филиала ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, ул. Ростовское шоссе, 0; тел.: 8-863-5266981; e-mail: buh.skzniwi@mail.ru. Ковалева Юлия Георгиевна, аспирант кафедры терапии и пропедевтики ФГБОУ ВО «Донской государственный аграрный университет»; 346493, Ростовская область, поселок Персиановский, ул. Кривошлыкова, 24; e-mail: dongau@mail.ru. Ответственный за переписку с редакцией: Миронова Анна Анатольевна, доктор ветеринарных наук, главный научный сотрудник Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института - филиала ФГБНУ «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»; 346421, Ростовская область, г. Новочеркасск, ул. Ростовское шоссе, 0; тел.: 8-903-4718275; e-mail: aa_mironova@mail.ru.
|
|