Воздействие препарата Гамавит на активность естественных киллерных клеток

УДК 636.087.7

Григорьева Е.А., Пронин А.В., Санин А.В., Наровлянский А.Н., Кожевникова Т.Н.,
Тимофеева Т.Ю., Санина В.Ю., Степанова Т.Н., Герасимова Е.В., Иванова А.М.
ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России, г. Москва

Введение. NK-клетки, или естественные киллерные клетки (далее - ЕКК), относятся к цитотоксическим лимфоцитам, играющим важную роль в функционировании системы естественной резистентности организма. Особенно велико их значение при вирусных инфекциях и в противоопухолевом иммунитете [6]. Активность ЕКК тесно связана с другими факторами иммунитета, в частности, с продукцией цитокинов - ИЛ-1, ИЛ-2, интерферона и других.

Препарат Гамавит широко применяется в ветеринарии при самых различных патологиях [3, 4, 5] . Запатентованы его свойства как иммуномодулятора, метаболика, детоксиканта, адаптогена и радиопротектора [1].

Целью данного исследования было изучение воздействия препарата Гамавит на активность естественных киллерных клеток.

Материалы и методы исследования. Работу проводили на мышах самцах линии BALB/ c массой 18-20 г. Гамавит серии 0814 производства ЗАО "Микро-плюс" вводили мышам двумя способами - внутримышечно и перорально, - в дозах 1 мл/мышь и 0,1 мл/ мышь, соответственно. Для тестирования NK-активности в популяции мышиных спленоцитов использовали традиционный метод по вклю-чениюрадиоактивной уридиновойметки [2]. Тестирование активности ЕКК проводили через 1 час, 4 часа, 1 и 7 суток после введения.

Результаты исследований и обсуждение. Результаты экспериментов представлены в таблице 1.

Таблица 1. Активность ЕКК киллеров после введения мышам Гамавита

Срок после введе­ния препа­рата	Способ введения	Доза (мл/мышь)	Индекс цитотоксичности (ИЦ), %, M±m при указанном соотношении эффекторы/ мишени
			25:1	50:1	100:1	200:1
1 час	Внутри­мышечно	0,1	13,6±8,5	18,1±7,8	18,6±10,8	25,4±4,1
		1,0	23,6±10,8	35,0±4,8	42,1±4,3	48,1±4,3
	Перорально	0,1	18,6±5,8	21,0±3,5	31,6±5,8	38,0±5,4
		1,0	31,6±9,1	45,0±3,8	46,6±9,8	58,6±3,4
	Контроль		5,4±2,7	4,8±0,8	3,3±2,3	1,8±1,5
4 часа	Внутри­мышечно	0,1	10,3±1,8	18,8±5,0	28,0±2,5	38,1±2,5
		1,0	27,0±14,3	38,7±9,2	43,5±5,2	58,8±6,7
	Перорально	0,1	12,0±6,7	23,8±10,9	37,9±2,5	34,7±1,7
		1,0	40,3±5,9	41,2±5,0	45,4±2,5	49,6±4,2
	Контроль		13,5±2,1	14,3±4,2	17,7±5,9	21,1±1,7
1 сутки	Внутри­мышечно	0,1	18,2±2,3	16,8±4,6	19,3±4,6	25,9±8,0
		1,0	22,3±9,1	21,6±2,3	45,7±2,3	44,7±4,2
	Перорально	0,1	9,1±4,6	8,0±6,9	13,6±10,2	12,5±6,9
		1,0	14,8±6,2	34,1±2,3	38,1±4,2	41,4±11,4
	Контроль		11,0±6,9	15,0±3,4	10,2±8,0	28,4±3,4
7 суток	Внутри­мышечно	0,1	35,4±2,5	28,3±5,8	54,9±6,7	63,3±1,5
		1,0	67,4±1,5	68,1±9,2	65,4±4,3	72,8±6,7
	Перорально	0,1	37,1±2,5	34,4±5,6	60,7±2,3	63,6±5,9
		1,0	59,1±3,1	78,6±2,8	71,4±3,8	79,1±2,4
	Контроль		10,7±9,9	15,3±8,3	5,7±25,9	5,3±3,3

Из результатов, представленных в таблице, следует, что введение Гамавита приводит к дозозависимой стимуляции активности естественных киллерных клеток, возрастающей при увеличении соотношения эффекторов к мишеням. Максимальная стимуляция активности ЕКК наблюдается через 7 суток после введения препарата. При этом не отмечено существенных различий между способами введения, хотя несколько лучший эффект достигался при внутримышечном способе введения Гамавита.

Таким образом, проведенное исследование углубляет имеющиеся представления о наличии у Гамавита иммуномодулирующих свойств. Увеличение активности ЕКК под действием Гамавита может играть важную роль для объяснения механизмов его терапевтического эффекта при вирусных инфекциях и паразитарных инвазиях [4,5].

Выводы:

1. Гамавит стимулирует активность естественных киллерных клеток у мышей.
2. Наибольший стимулирующий эффект отмечается после внутримышечного введения Гамавита.

Список литературы:

1. Иммуномодулятор-метаболик-детоксикант-адаптоген-ра-диопротектор. Патент на изобретение № 2194502. По заявке № 2000132668, приоритет от 27.12.2000. Авторы Наровлянский А.Н., Пронин А.В., Санин А.В.
2. Рыкова М.П., Спиранде И.В., Зедгепидзе М.С., Фукс Б.Б. Новая высокочувствительная техника тестирования нормальных киллеров. Иммунология. 1981. № 3 С. 88-91.
3. Санин А.В., Кожевникова Т.Н., Сосновская О.Ю., Изместьева А.В., Пронин А.В., Наровлянский А.Н., Ожерелков С.В. Использование принципов доказательной медицины при исследовании антитоксического действия гамавита в эксперименте in vivo. Ветеринария. 2015.№6, с.54-56.
4. Санин А.В. Применение иммуномодуляторов при вирусных заболеваниях мелких домашних животных. Российский ветеринарный журнал. МДЖ. 2005. № 1 с. 38-42
5. Санин А.В., Сосновская О.Ю., Санина В.Ю., Кожевникова Т.Н., Васильев И.К., Наровлянский АН., Пронин А.В. Особенности применения иммуномодуляторовпри паразитарных инвазиях. Ветеринария Кубани. 2010. № 2 с.15-18.
6. Vivier, E., Raulet, D.H., Moretta, A., Caligiuri, M.A., Zitvogel, L., Lanier, L.L., Yokoyama, W.M. &Ugolini, S.; Raulet; Moretta; Caligiuri; Zitvogel; Lanier; Yokoyama; Ugolini"Innate or Adaptive Immunity. The Example of Natural Killer Cells". Science. 2011. 331 (6013): рр. 44-49.

Резюме. NK-клетки, или естественные киллерные клетки, относятся к цитотоксическим лимфоцитам, играющим важную роль в функционировании системы естественной резистентности организма. Особенно велико их значение при вирусных инфекциях и в противоопухолевом иммунитете. Активность естественных киллерных клеток тесно связана с другими факторами иммунитета, в частности, с продукцией цитокинов - ИЛ-1, ИЛ-2, интерферона и других. Авторами проведено исследование иммуномодулирующих свойств Гамавита в отношении активности естественных киллерных клеток у мышей. Гамавит вводили в двух дозировках внутримышечно и перорально. По результатам проведенных опытов установлено, что введение Гамавита вызывало дозозависимую стимуляцию активности естественных киллерных клеток, возрастающую при увеличении соотношения эффекторов к мишеням, максимально выраженную через 7 суток после введения препарата.

При этом не отмечено существенных различий между способами введения, хотя несколько лучший эффект достигался при внутримышечном способе введения Гамавита. Таким образом, проведенное исследование углубляет имеющиеся представления о наличии у Гамавита иммуномодулирующих свойств. Увеличение активности естественных киллерных клеток под действием Гамавита может играть важную роль для объяснения механизмов его терапевтического эффекта при вирусных инфекциях и паразитарных инвазиях.

Ключевые слова: Гамавит, естественные киллерные клетки, иммуномодулирующие свойства, естественная резистентность организма, мышь, дозировка, стимуляция активности, способ введения препарата, терапевтический эффект.

Сведения об авторах:

Григорьева Екатерина Анатольевна, кандидат биологических наук, ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России; 123098, г. 2/ Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail: info@gamaleya. org.

Пронин Александр Васильевич, доктор биологических наук, профессор ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail: info@gamaleya. org.

Санин Александр Владимирович, доктор биологических наук, профессор ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail: info@ gamaleya.org.

Наровлянский Александр Наумович, доктор биологических наук, профессор ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail: info@ gamaleya.org.

Тимофеева Татьяна Юрьевна, научный сотрудник ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail: info@gamaleya.org.

Санина Валентина Юрьевна, кандидат химических наук,ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России; 123098, г. Москва, ул.Г амалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail: info@gamaleya.org.

Степанова Татьяна Николаевна, кандидат биологических наук,ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.:8(499)1933001; e-mail: info@gamaleya. org.

Герасимова Екатерина Васильевна, младший научный сотрудник ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail: info@gamaleya. org.

Иванова Алла Михайловна, кандидат биологических наук, ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail: info@gamaleya.org.

Ответственный за переписку с редакцией: Кожевникова Татьяна Николаевна, кандидат медицинских наук, ФГБУ ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail: tatiana@micro-plus.ru.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей