|
С.Н. Карташов, А.Г. Ключников, А.И. Бутенков, А.Н. Тазаян ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии Инфекционная патология свиней в Ростовской области представлена, в основном, бактериальными заболеваниями (52,8% от общей инфекционной патологии). По распространенности инфекций свиней микоплазмоз занимает 1-е место (20,9% соответственно). Комплекс исследований функционального состояния гуморального и клеточного иммунитета у 4-5 месячных поросят, больных энзоотической пневмонией, вызванной М. Нуорпеитогнае, выявил резкое снижение количества В-лимфоцитов, а также нарастающее снижение общего числа Т-лимфоцитов и отдельных популяций Р0К(р-Р0К и в-РОК), что, по всей видимости, отражают нарушение лимфопоэза, а также перераспределение клеток и изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей у заболевших животных. Актуальность темы. Из заболеваний свиней, причиной которых являются микоплазмы, следует назвать энзоотическую пневмонию, полисерозиты, артриты, метриты и маститы. Хотя этиологическая роль микоплазм при некоторых заболеваниях, и том числе и при атрофическом рините свиней многими исследователями не подтверждена, тем не менее, большинство авторов считают, что микоплазмы при этих патологиях играют большую, если не ведущую роль [1, 3]. В последние годы в мировой литературе появляется все больше сообщений, свидетельствующих о том, что различные виды микоплазм могут вызывать самостоятельные заболевания свиней. В настоящее время от свиней выделено несколько различных видов микоплазм [2, 4, 6]. Энзоотическая пневмония у свиней, вызванная М. пуорпеитогпае, широко распространена и представляется как одна из экономически важных болезней свиней. Как указывает 1 Заггас!е11 (2003), у 75% убойных свиней находят очаги пневмонии, характерные для энзоотической пневмонии. Заболеваемость в отдельных хозяйствах может достигать 100%, однако смертность, которая наблюдается среди 3-6-недельных поросят, колеблется от 0,5 до 20%. Отмечается резкая задержка роста и развития поросят [3, 5]. В связи с отсутствием типичных симптомов болезни распознавание ее весьма затруднительно, в литературе мало данных по морфологическим особенностям этого заболевания и иммунный статус животных при этом заболевании не изучен, что и определило цель наших исследований. Цели исследования. Выяснить эпизоотическую ситуацию по энзоотической пневмонии свиней в Ростовской области, изучить иммунологический статус при разной степени выраженности заболевания. Материалы и методы. Работу выполняли с 2006 по 2008 гг. в лаборатории функциональной диагностики болезней сельскохозяйственных животных и лаборатории болезней свиней ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии, Ростовской областной ветеринарной лаборатории, а также в хозяйствах Ростовской области. Для определения роли и места М. пуорпеитогпае в инфекционной патологии свиней в условиях Ростовской области нами изучен нозологический профиль, удельный вес, географическое распространение и годовая динамика инфекционных заболеваний свиней в Ростовской области. Диагностику энзоотической пневмонии проводили ГУРО "Областная ветеринарная лаборатория" с помощью тест-системы для выявления ДНК возбудителя в патологическом материале методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР) с электрофо-ретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле, а также определяли наличие специфических антител к возбудителю энзоотической пневмонии в сыворотке крови методом ИФА. Статистическую обработку результатов исследований проводили по Н.А. Плохинскому (1970), Хитоси Кумэ (1990) с использованием компьютерной техники. Опыты по определению иммунологического статуса больных поросят проводили на 3-х группах поросят по 20 голов в каждой. Группы формировались по принципу пар-аналогов. Первая группа, контрольная, включала клинически здоровых животных без признаков заболевания. Во вторую опытную группу были включены животные с первой стадией заболевания заболевания, у которых отмечался кашель, но был сохранен аппетит. Третья опытная группа животных, включала поросят со второй стадией заболевания, характеризующейся кашлем, тяжелой одышкой, адинамией, анорексией. Определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов проводили с помощью реакции Манчини. Определение количества Т - лимфоцитов и их субпопуляций проводили методом розеткообразования — Е-РОК, тимусзависимые Т-лимфоциты имеют рецепторы для эритроцитов барана, которые выступают, таким образом, специфическим маркером для их распознавания (Е-РОК: Егу1пгосут.е — розеткообразующие клетки). Выявляли 2 субпопуляции: теофиллинчувствительные Т-лимфоциты (Т-супрессоры), утратившие способность к ро-зеткообразованию под влиянием обработки теофиллином, и теофиллинустойчивые Т-клетки (Т-хелперы) лимфоциты, такую способность сохранившие. Результаты исследований. За период с 2006 по 2008 гг. в хозяйствах Ростовской области осмотру подвергнуто 6481 свиней. Из них у 22% выявлена инфекционная патология. За подопытными животными было установлено постоянное клиническое наблюдение, при этом учитывали процент заболеваемости, выздоровления и падежа. Ежедневно проводили клиническое обследование поросят, а лабораторные исследования проводили при первичном и повторном осмотрах и при выздоровлении. Для изучения эпизоотической ситуации по энзоотической пневмонии было проведено обследование поголовья свиней в 14 хозяйствах Ростовской области, проанализированы результаты лабораторных исследований ГУРО "Ростовская областная ветеринарная лаборатория" и лаборатории болезней свиней ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии. Ростовская область представляет собой зону со сложной эпизоотической обстановкой по инфекционным болезням. В хозяйствах региона ежегодно переболевают инфекционными болезнями от 40 до 95% поросят. Из общего количества павших поросят в 2005-2008 годах гибель их от респираторных болезней составила 41,7%. Мы провели ретроспективный анализ уровня заболеваемости свиней инфекционными болезнями в Ростовской области за период 2004-2008 г. Изучали удельный вес микоплазменной инфекции в сравнительном аспекте и в динамике. В результате выделены следующие нозологические единицы (рис. 1,2). Рис.1. Удельный вес энзоотической пневмонии в инфецкионной патологии свиней в Ростовской области в период с 2004 по 2008 годы Рис.2. Нозологический профиль инфекционной патологии свиней в Ростовской области в 2006-2008 г. Пик заболеваемости свиней энзоотической пневмонией приходится на конец зимы - начало весны (рисунок 3), что, по-видимому, связано со снижением иммунного статуса свиней на фоне гиповитамонозов, снижения качества комбикормов в зимнее-весенний период. Рис. 3. Динамика заболеваемости поросят энзоотической пневмонией в Ростовской области (по горизонтали - месяцы, по вертикали - количество животных). Такую динамику можно объяснить и резкими изменениями климатических факторов, которые приводят к манифестации инфекции при наличии возбудителя в организме. Кроме того, мы провели анализ распространения ассоциативных болезней у свиней при энзоотической пневмонии в Ростовской области в 2008 г (рисунок 4). Наряду с энзоотической пневмонией из 96 клинически больных поросят у 14 (14,6%) из них зарегистрирован репродуктив-но-респираторный синдром (РРСС), по 8 случаев (8,33%) приходилось на микоплазмоз и микоплазмоз с репродуктивно-респираторным синдромом соответственно. Таблица 1. Нозологический профиль инфекционной патологии свиней в Ростовской области за 2004-2008 гг. Нозологическая единица | Исследовано животных | Заболевших | % | Микоплазмоз | 145 | 30 | 20,7% | ЦВИС-2 | 139 | 20 | 14,4% | РРСС | 181 | 41 | 11,4% | Колибактериоз | 316 | 36 | 11,4% | ПВИС | 392 | 36 | 9,2% | Пастереллез | 845 | 65 | 7,7% | Энзоотическая пневмония | 87 | 5 | 5,7% | Рожа | 478 | 26 | 5,44% | Сальмонеллез | 1583 | 78 | 4,93% | Трансмиссивный ГЭ | 142 | 40 | 2,81% | Прочие бак. исследования | 83 | 2 | 2,42% | Псевдомоноз | 63 | 1 | 1,59% | Гемофилезный полисерозит | 158 | 2 | 1,27% | Стрептококкоз | 84 | 2 | 0,69% | Ротавирусная инфекция | 294 | 1 | 0,34% | Ауески болезнь | 2 | 0 | 0,01% | Всего | 4674 | 349 | 100% | У 16 (16,7%) поросят цирковирусной инфекции сопутствовала бактериальная пневмония, а у 6 (6,3%) поросят мы наблюдали стрептококкоз. Выявлено только 5 случаев (5,21%), когда энзоотическая пневмония был обнаружен без присутствия других возбудителей. Таким образом, наиболее часто респираторному микоплазмозу сопутствует пастереллез (28,1%), ЦВИС (16,7%) и РРСС (14,6%) При анализе данных, полученных в результате бактериологического исследования поросят, у которых энзоотическая пневмония сопровождалась септицемией, было установлено, что в 2-х случаях выделен НеаторпИиз рагазцпз, по 3 случая приходилось на Е. СоП и За1топе11а зр. и в 5 случаях был выделен 31герт.ососсиз зцпз. Таким образом, бактериальная септицемия выявлена у 9% поросят с признаками микоп-лазмоза. В результате анализа заболеваемости поросят энзоотической пневмонией в зависимости от возраста установлено, что из 360 поросят, у которых возбудитель был выделен методом ПЦР, 131 голов (36,4%) были 10-15 недельного возраста, 100 голов - в возрасте 15-20 недель (27,8%), 86 голов - в возрасте 5-10 недель (23,9%). Пик сероконверсии приходился на возраст 8-18 недель. Динамика заболеваемости, смертности и летальности при энзоотической пневмонии в Ростовской области была проанализирована за 2007-2008 годы (таблица 2). Таблица 2. Динамика заболеваемости, смертности и летальности при энзоотической пневмонии свиней Год | Восприимчивость животных, гол | Заболело, гол | Пало, гол | Заболеваемость на 1000 голов | Смертность на 1000 голов | Летальность, % | 2007 | 1250 | 973 | 348 | 778,4 | 278,4 | 35,77% | 2008 | 975 | 863 | 339 | 885,1 | 347,7 | 39,28% | В 2007 году смертность от энзоотической пневмонии составила 278,4 голов на 1000 восприимчивых свиней при летальности 35,77%. В 2008 году эти показатели существенно не изменились - смерность составила 347,7 голов на 1000 восприимчивых животных, а летальность - 39,28%. Установлено, что у поросят первой опытной группы отмечается снижение общего числа лейкоцитов периферической крови, что, кроме того, сопровождается выраженной лимфопенией. У больных животных развивалась выраженная лейкопения и лимфопения, количество Т-лимфоцитов периферической крови снизилось до 29,1 ± 1,4% в первой стадии заболевания и увеличилось до 68,6 ± 1,2% во второй стадии заболевания. Однако, на фоне лимфопении абсолютное значение лимфоцитов снизилось до 0,69±0,038хЮ9/л в первой стадии заболевания и до 0,43±0,05*109/л во второй стадии заболевания. Соотношение Т-хелперов кТ-супрессорам также изменялось, и по мере развития заболевания снижалось с 2,17 до 1,58 (табл. 3). Таблица 3. Показатели клеточного иммунитета периферической крови Группа животных | Т-лимфоциты, % | Т-лимфоциты | Т-хелперы, | Т-супрессоры | Тх/Тс | % | х109/л | % | х109/л | % | х109/л | контрольная | 48,7±0,4 | 1,38 ±0,04 | 27,8±0,8 | 0,41±0,01 | 12,5±0,4 | 0,18±0,011 | 2,17 | первая опытная (n=20) | 29,1±1,4** | 0,69±0,038 | 15,91±0,8** | 0,11±0,013 | 9,32±0,5** | 0,064±0,031 | 1,65 | вторая опытная (n=20) | 68,6±1,2*** | 0,43±0,05 | 11,83±0,8*** | 0,04±0,019 | 7,19±0,6*** | 0,031±0,011 | 1,58 | *p<0,05,** р<0,01,***р<0,001, в сравнении со здоровыми животными | Все эти изменения — снижение общего числа Т-лимфо-цитов и отдельных популяций РОК, снижение их соотношения (р-РОК и в-РОК) — по всей видимости, отражают нарушение лимфопоэза и перераспределение клеток, а также изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей по мере развития энзоотической пневмонии. Из теории общей иммунологии [3], выраженное снижение количества Т-лимфоцитов по отношению к здоровым животным сопровождается снижением клеточного иммунитета, что влечет за собой падение резистентнос-тии, в первую очередь, к вирусным инфекциям [2]. Результаты определения относительного и абсолютного содержания В-лимфоцитов у поросят в возрасте 3-6 недель, больных энзоотической пневмонией представлены в таблице 4. Таблица 4. Показатели гуморального иммунитета периферической крови Группа животных | В-лимфоциты | Иммуноглобулины | % | х109/л | А, мг/мл | G,мг/мл | М, мг/мл | контрольная (n = 20) | 23,6±1,97 | 0,69±0,04 | 2,13±0,08 | 10,9±0,12 | 1,34±0,2* | первая опытная (n = 20) | 13,97±1,89 | 0,35±0,06* | 2,13±0,08* | 10,9±0,12 | 1,4±0,04 | вторая опытная (n=20) | 33,46±0,28 | 0,20±0,06* | 1,49±0,03* | 11,8±0 11 | 1,5±0,09 | * р< 0,001, в сравнении со здоровыми животными | Анализ показателей, характеризующих гуморальное звено иммунитета, выявил, что абсолютное содержание в крови В-лимфоцитов у здоровых поросят составило 0,69±0,04х109/л. При энзоотической пневмонии свиней в первой стадии заболевания количество В-лимфоцитов периферической крови снизилось до 13,97 ± 1,89% и увеличилось до 33,46± 0,28% во второй стадии заболевания. Но на фоне лимфопении абсолютное значение лимфоцитов снизилось до 0,35±0,06хЮ9/л в первой стадии заболевания, до 0,20±0,06хЮ9/л во второй стадии заболевания. При изучении изменений количества иммуноглобулинов отмечено, что в первой стадии заболевания содержание иммуноглобулина-А, С и М не отличается от здоровых животных, но во второй стадии энзоотическом пневмонии происходит резкое снижение иммуноглобулинов А до 1,49±0,03 мг/мл, что на 30% ниже соответствующих показателей у здоровых животных и поросят во второй стадии заболевания. Уровень иммуноглобулина С и М статистически мало отличался от животных первой и второй опытных групп. Выводы. Инфекционная патология свиней в Ростовской области представлена, в основном, бактериальными заболеваниями (52,8% от общей инфекционной патологии). По распространенности инфекций свиней микоплазмоз занимает 1-е место (20,9% соответственно). Кроме этого, наиболее часто регистрируют цирковирусную инфекцию - 14,3%, РРСС и колибактериоз - по 11,8%, ПВИС - 8,9%, пастереллез - 7,5%, энзоотическая пневмония - 5,5%. На долю остальных заболеваний приходилось в сумме18,34%. За период с 2004 по 2008 гг. заболеваемость свиней энзоотической пневмонией составила в среднем 20,92% . При этом, за этот период заболеваемость свиней микоплазмозом занимала относительно стабильное значение и варьировала от 23,7% в 2005 году до 37,4% в 2008 году. Из 370 поросят, у которых возбудитель был выделен методом ПЦР, 135 голов (35,7%) были 10-15 недельного возраста, 100 голов - в возрасте 15-20 недель (27%), 88 голов - в возрасте 5-10 недель (23,8%). Пик сероконверсии приходился на возраст 8-18 недель. Снижение общего числа В-лимфоцитов, Т-лимфоцитов, отдельных фракций иммуноглобулинов и отдельных популяций РОК, снижение их соотношения (р-РОК и в-РОК), по всей видимости, отражают нарушение лимфопоэза, а также изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей по мере развития заболевания. Из теории общей иммунологии известно, что, выраженное снижение количества Т-лимфоцитов по отношению к здоровым животным сопровождается снижением клеточного иммунитета и это влечет за собой падение резистентности, в первую очередь, к вирусным инфекциям [2]. Список использованной литературы: - УегсПп Е. 11зе от 1п1егпа1 соп1го1 1п а пезт.ес!-РСР аззау гог Мусор1азта пуорпеитогпае с!ет.ест.юп апс! ^иапт.^т^сат.^оп т 1гаспеоЬгопсЫа1 \л/азЫп§з тгот р|§з. / Е. УегсПп, М. КоЫзсп, 1М. Воуе, М. (Заггпег// Мо1. Се11. РгоЬез., 2000Ь. - уо1. 14. - р. 365-372.
- Уюса 1 РаНегпз от Мусор1азта пуорпеитогпае 1птест.юпз 1п Ве1§1ап тагго\л/-т.о-т1гпзп р|§з пегс!з \л/Ип сПуеп|тё-соигзе./! Усса, О. Маез, 1_. Тпегтот.е, 1 Рее1егз, Р. НазезЬгоиск // }. Уе1. Мее!., 2002. - уо1. 49. - р. 349-353.
- Щербаков А. В. Этиологическая структура инфекционных болезней свиней в животноводческих хозяйствах России / А. В. Щербаков, В. Ф. Ковалишин, А. С. Яковлева, Е. В. Шабаева // Актуальные проблемы инфекционной патологии животных.- Владимир, 2003. - с. 146-150.
- Сорокин М.В. Энзоотическая пневмония свиней и ее специфическая профилактика/ М.В. Сорокину/Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные, 2006. - N° 3. - с. 35-37.
- Романенко В.Ф. Этиология энзоотической пневмонии свиней/ В.Ф. Романенко, А.А. Бокун, Н.В. Бабич // Ветеринария, 1988. - Т. 2. - с. 35-37.
- Пустоваров А.Я. Иммунологическое обоснование диагностики и профилактики энзоотической пневмонии, сальмонеллеза и некоторых смешанных инфекций свиней. - М, 1991. - 49 с.
Ключевые слова: энзоотическая пневмония свиней, В-лимфоциты, Т-лимфоциты иммунитет. Ответственный за переписку с редакцией: Карташов Сергей Николаевич, доктор ветеринарных наук, заведующий лабораторией функциональной диагностики болезней сельскохозяйственных животных ГНУ Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт, 16.00.02, 8-909-434-03-03, Ростовское шоссе О, г. Новочеркасск. Ключников Александр Генадьевич, лаборатория функциональной диагностики болезней сельскохозяйственных животных ГНУ Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт, соискатель, 16.00.03, 8-909-434-03-03, Ростовское шоссе О, г. Новочеркасск Бутенков Александр Иванович, лаборатория функциональной диагностики болезней сельскохозяйственных животных ГНУ Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт, кандидат ветеринарных наук, 16.00.03, 8-909-434-03-03, Ростовское шоссе 0, г. Новочеркасск Тазаян Артур Ноярович, кафедра эпизоотологии Донского государственного аграрного университета, аспирант, 16.00.03, 8-909-434-03-03, Ростовская обл, п. Персиановский.
|
|