Показатели безвредности средства на основе природных авермектинов в комбинации с масляным депонентом из зародышей пшеницы

УДК: 615.285.7
DOI 10.33861/2071-8020-2024-3-29-31

Фатахов К.Ф., Девришов Д.А., Пименов Н.В. Федеральное государственное бюджетное
образовательное учреждение высшего образования «Московская государственная
академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина»,
г. Москва

Проблема распространенности паразитозов животных остается на высоком уровне [1, 2, 12]. Антропогенное вмешательство до сих пор не может ликвидировать данную группу заболеваний из-за ряда причин. Во-первых,

это проблема быстрой приспособляемости паразитов к часто меняющимся условий экологии. Во-вторых, это появление резистентности паразитов к применяемым лекарственным средствам [18, 19].

Ввиду огромных экономических потерь, связанных с паразитарными заболеваниями животных, и ощутимых затрат на синтез и поиск новых лекарственных средств с высоким терапевтическим потенциалом, учеными многих стран продолжаются исследования по разработке оптимальных методов и способов применения инсектоакарицидов и антигельминтиков [3, 5, 10].

В конце 70-х годов прошлого столетия группой ученых была выделена новая группа соединений, имеющих природное происхождение, продуцируемая актиномицетом Streptomyces avermitilis. Среди продуктов жизнедеятельности Streptomyces avermitilis были выделены соединения с широким спектром анти-паразитарного действия, которые получили название авермектины. С тех пор, препараты на основе авермектинов стали использовать во всем мире по борьбе с паразитарными заболеваниями животных [4, 9, 11, 16, 17].

Массовое, длительное и бесконтрольное применение препаратов на основе авермектинов привело к появлению устойчивых форм паразитов, что вызвало беспокойство исследователей в этом направлении [14, 15].

Также появились сообщения о токсичности препаратов на основе авермектинов для животных [1]. Поиск новых методов применения авермектинов, снижение их токсичности и сохранности терапевтического действия является перспективным вопросом для дальнейшего изучения.

Экспериментальное лекарственное средство представляет собой комбинацию абамектина, масла из зародышей пшеницы и бензилового спирта в качестве растворителя. Концентрация действующего вещества в готовой форме прототипа составила 2%. Масло из зародышей пшеницы используется в составе как вспомогательное вещество, выполняющее роль депонирующего компонента и обладающее иммуномодулирующими свойствами [8, 10]. На сегодня представлено мало информации по использованию масел в качестве вспомогательного компонента в составе антипаразитарных препаратов на основе авермектинов [7]. Препарат по токсикологическим параметрам ГОСТ 12.1.007-76 относится к умеренному классу токсичности (3 класс), и обладает высоким терапевтическим потенциалом [9].

При этом, подобранная комбинация нового средства требует дополнительных исследований по хронической токсичности и безвредности. В связи с этим целью нашей работы являлось изучение местных и системных реакций влияния комбинированного прототипа на биологических моделях.

Материалы и методы исследований. Исследовательскую работу проводили на кафедре иммунологии и биотехнологии ФГБОУ ВО МГАВМиБ-МВА им. К.И. Скрябина. Экспериментируе-мым объектом является новый антипаразитарный препарат на основе авермектинов в комбинации с маслом из зародышей пшеницы холодного отжима. Продукты переработки зародышей пшеницы методом прессования имеют высокое качество, сохраняя все полезные вещества в отличие от других методов [6]. Опыты проводили на белых беспородных крысах. Были подобраны две группы животных (опыт/контроль) по 15 голов в группе, 6-ти недельного возраста, массой 150-160 гр. Крысам опытной группы экспериментальный препарат вводили подкожно в дозе 2 мг/кг по ДВ (0,016 мл 2% раствора на голову). Контрольной группе вводили изотонический раствор натрия хлорида. Длительность курса: 1 раз в день в течение 30 дней. Обе группы лабораторных животных содержались в одинаковых условиях по принципу аналогов. Забор крови производился из хвостовой вены с помощью инсулинового шприца. Кровь для исследований получали до введения опытного раствора и на 30 день по окончанию инъекций. Показатели крови определяли на гематологическом анализаторе «MEK-6400J/K», производитель Япония. В конце опыта животные были умерщвлены с целью патологоанатомического вскрытия.

Результаты исследований и их обсуждение. В период исследования было установлено, что при введении нового препарата в месте инъекции образовывалась небольшая безболезненная припухлость, которая исчезала самостоятельно в течение двух часов. Повышения местной температуры не отмечали. Последующие инъекции (на 2, 3, 4 и т.д. сутки) не сопровождались изменением или пролонгированием реакции и не отличались от местных реакций у крыс в контрольной группе.

В течение периода наблюдений (30 дней) не отмечено негативного влияния нового препарата на общее состояние крыс. Лабораторные животные в опытной группе оставались активными. Прием корма и потребление жидкости - без признаков нарушений. Двигательная активность сохранена. Шерсть блестящая, не взъерошена. Признаков аллергической реакции при повторных введениях раствора не наблюдали.

Изучение гематологического статуса у лабораторных моделей в контрольные точки (до введения препарата и через 30 дней) также не проявило достоверных изменений в основных показателях крови.

Таблица 1 Гематологические показатели крови крыс после многократного подкожного введения препарата

Показатели	Норма	До введения (опыт)	До введения (контроль)	Опыт (30 день введения)	Контроль (30 день введения)
Лейкоциты, (1х109/л)	1,08-8,88	6,96±0,07	7,0±0,01	7,02±0,02	7,18±0,17
Эритроциты, (1х1012/л)	6,27-9,72	8,12±0,06	8,47±0,01	8,49±0,02	8,39±0,06
Тромбоциты, (1х109/л)	574-1146	645±6,4	638±9,4	637±8,6	639±7,2
Гематокрит, %	34,38-54,56	37,86±3,2	38,12±2,11	38,51±4,1	37,95±6,23

Так, количество лейкоцитов крови в опытной группе на 30 день введения препарата находились в пределах допустимых значений - 7,02±0,02 по отношению к контролю - 7,18±0,17. Эритроцитарные показатели в опытной группе (8,49±0,02) на 30 день также достоверно не отличались от контроля (8,39±0,06). Аналогичные результаты наблюдались в показателях количества тромбоцитов и гематокрита - 637±8,6 / 639±7,2 и 38,51±4,1 / 37,95±6,23, соответственно (табл. 1).

Представленные результаты показывают, что по исследованным показателям крови лабораторных моделей опытной и контрольной групп не выявлено значимых статистических различий (p>0,05 при 95% уровне вероятности). Достоверной разницы в средних статистических значениях между показателями крови крыс опытной и крыс контрольной групп не выявлено через 30 дней подкожного инъецирования экспериментального препарата. Все параметры крови находились в пределах допустимой физиологической нормы. Достоверных изменений показателей не отмечено также у животных опытной группы до и после месячного курса введения препарата. Таким образом, полученные результаты очевидно указывают на отсутствие хронической токсичности абамектина с маслом из зародышей пшеницы.

Масса тела у крыс в опытной и контрольной группе достоверно не отличалась (158,15±6,3 / 156,23±4,2). Патологоанатомическое исследование животных на 7 день после завершения инъекций препаратом свидетельствует об отсутствии существенных постинъекционных изменений в органах и тканях в опытной и контрольной группе крыс. Плотность, цвет, форма и размеры внутренних органов (желудок, селезенка, видимые лимфатические узлы, печень и сальник) опытной и контрольной групп идентичны. Единственным отличием в опытной группе было то, что подкожная жировая ткань в местах инъекций слегка имела янтарный цвет масла.

Заключение. Препараты на основе авермектина имеют перспективу совершенствования, сохраняя и повышая действующую активность при нивелировании нежелательных реакций, с добавлением масла зародышей пшеницы. Проведенные исследования показали, что длительное применение препарата на основе натуральных авермектинов в комбинации с маслом из зародышей пшеницы лабораторным животным не сопровождается клинико-физиологическими, этологическими и гематологическими изменениями. Также после длительного применения не выявлены макроструктурные изменения органов и тканей лабораторных моделей. Изменение цвета подкожной жировой ткани не являлось патогномоничным. Гематологические показатели лабораторных животных после длительного применения препарата были без статистически значимых различий. Таким образом, полученными данными обосновано отсутствие хронической токсичности: прототип препарата на основе комбинации абамектина и масла зародышей пшеницы не вызывает изменений функций гемопоэтической системы организма лабораторных моделей, не проявляет провоспалительных свойств.

Список литературы:

1. Василевич, Ф. И. Распространение дерматитов паразитарного происхождения среди собак и кошек Московского региона / Ф. И. Василевич, О. Е. Давыдова, Н. В. Есаулова // Ветеринария. 2023. № 6. С. 32-36.

2. Василевич, Ф. И. Эндопаразитофауна мелкого рогатого скота некоторых районов Московской области / Ф. И. Василевич, Е. А. Николаева, И. И. Цепилова // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. 2023. № 24. С. 128-132.

3. Земцова, Л. К. Изучение целевой эффективности авермектинсодержащего инсектицидного средства «АИС-ЛАМК» / Л. К. Земцова, А. И. Сапожникова, М. Н. Мирзаев, И. И. Кочиш // Международный научно-исследовательский журнал. 2022. № 1-2 (115). С. 14-18.

4. Мирзаев, М. Н. Авермектинсодержащий препарат в форме гранул для борьбы с паразитозами мелких домашних животных / М. Н. Мирзаев, С. А. Шемякова, Н. В. Есаулова // Актуальные проблемы ветеринарной медицины, зоотехнии, биотехнологии и экспертизы сырья и продуктов животного происхождения: Сборник трудов научно-практической конференции, Москва: Сельскохозяйственные технологии. 2022. С. 235-236.

5. Патент № 2655729 C1 Российская Федерация, МПК A61K 31/365, A61K 31/155, A61P 33/14. Препарат Ниацид-К для лечения животных от паразитозов: № 2017140490: заявл. 21.11.2017: опубл. 29.05.2018 / К. М. Мирзаева, М. Х. Джафаров, Ф. И. Василевич, М. Н. Мирзаев.

6. Патент на полезную модель № 185995 U1 Российская Федерация, МПК B30B 9/18. Пресс для получения масла из растительного сырья: № 2018131036: заявл. 28.08.2018: опубл. 26.12.2018 / Н. Б. Красников, И. В. Сафронов, А. М. Цыганов, П. В. Набоких; заявитель Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственное предприятие «Рекорд».

7. Патент. Масляно-водная композиция авермектинов / WO EP US CN JP KR AR AU BR EA IL NZ PE TW ZA EA013798B1. Мортен Педерсен, Хенриетте Сие Вольдум // Priority 2005-11-18.

8. Родионова, Н. С. Современная теория и технология получения, обработки и применения продуктов комплексной переработки зародышей пшеницы / Н. С. Родионова, Т. В. Алексеева // Вестник Воронежского государственного университета инженерных технологий. - 2014. № 4(62). С. 99-109.

9. Фатахов, К. Ф. Иммунорегуляторные и терапевтические свойства препарата пролонгированного действия Липомек 2%: специальность 03.02.11 «Паразитология»: диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Фатахов Курбан Фатахович. 2022. 139 с.

10. Фатахов, К. Ф. Лизоцимная активность сыворотки крови мышей после применения антипаразитарного препарата липомек 2% / К. Ф. Фатахов, Д. А. Девришов, О. Б. Литвинов, В. Е. Брылина // Актуальные проблемы ветеринарной медицины, зоотехнии, биотехнологии и экспертизы сырья и продуктов животного происхождения: Сборник трудов 2-й Научно-практической конференции, Москва: Сельскохозяйственные технологии. 2023. С. 279-280.

11. Фатахов, К. Ф. Мониторинг средств специфической профилактики при гиподерматозе крупного рогатого скота / К. Ф. Фатахов, Д. А. Деври-шов, О. Б. Литвинов // Вакцины нового поколения для профилактики особо опасных болезней сельскохозяйственных животных: Сборник трудов Международной научно-практической конференции, Москва: Сельскохозяйственные технологии. 2023. С. 8-13.

12. Фатахов, К. Ф. Сезонная распространенность стронгилято-зов овец по Рутульскому району Республики Дагестан / К. Ф. Фатахов, Д. А. Девришов // Материалы Международной научно-практической конференции «Скрябинские чтения», проводимых согласно плану научных мероприятий в рамках десятилетия науки и технологий и посвящённых празднованию 300-летия российской академии наук: сборник научных трудов, Москва. 2023. С. 170-172.

13. Abdel-Daim M.M. Attenuating effects of caffeic acid phenethyl ester and betaine on abamectin-induced hepatotoxicity and nephrotoxicity / M.M. Abdel-Daim, S.A. Abdellatief // Environ Sci Pollut Res Int. 2018. No. 25(16). P. 15909-15917.

14. Echevarria F. A. Anthelmintic resistance by Haemonchus contortus to ivermectin in Brazil: a preliminary report / F.A. Echevarria, G.N. Trindade // Vet Rec. 1989. No. 124 (6). P. 147-148.

15. Giordano D. J. Selection of ivermectin-resistant Trichostrongylus colubriformis in lambs / D. J. Giordano, J. P. Tritschler, G. C. Coles // 2nd. Vet. Parasitol. 1988. No. 30 (2). P. 139-148.

16. MacNeil D. J. Avermectins // Biotechnology. 1995. No. 28. P. 421-442.

17. Nnoruka E. N. Successful treatment of scabies with oral ivermectin in Nigeria // Trop Doct. 2001. No. 31 (1). P. 15-18.

18. Van Wyk J. A. Resistance of field strains of Haemonchus contortus to ivermectin, closantel, rafoxanide and the benzimidazoles in South Africa // Vet. Rec. 1988. No. 123 (9). P. 226-228.

19. Van Wyk J. A. et al. The problem of escalating resistance of Haemonchus contortus to the modern anthelmintics in South Africa // Onderstepoort. J. Vet. Res. 1989. 56 (1). P. 41-49.

Резюме. Паразитарные заболевания наносят существенный экономически ущерб агропромышленному комплексу страны, складывающийся из падежа животных и снижения их продукции. Разработка эффективных средств защиты и профилактики паразитарных заболеваний животных остается актуальным вопросом. В современном мире существует огромное количество химиотерапевтических средств защиты животных от паразитозов, среди которых большой интерес представляют препараты на основе авермектинов, продуцируемые актиномицетом Streptomyces avermitilis. Авермектинсодержащие препараты, применяются в качестве антигельминтных и инсектоакарицидных средств защиты, обладают широким терапевтическим действием. Развитие резистентности некоторых паразитов к авермектинам остается не решенной проблемой. Поиск новых методов применения авермектинов, преодоление резистентности и сохранности терапевтического действия является перспективным вопросом для дальнейшего изучения. Объектом исследования является разработанный прототип антипаразитарного препарата на основе абамектина в комбинации с маслом из зародышей пшеницы, который требует всестороннего изучения. Авторы исследовали безвредность средства на основе природных авермектинов в комбинации с масляным депонентом из зародышей пшеницы. Эксперименты были проведены на лабораторных моделях (крысы). Проведенные исследования показали, что длительное применение экспериментального препарата на основе натуральных авермектинов в комбинации с маслом из зародышей пшеницы лабораторным моделям не сопровождается клинико-физиологическими, этологическими и гематологическими изменениями. Также многократное применение препарата (30 дней) не вызвало макроструктурных изменений органов и тканей лабораторных животных. Таким образом, полученными данными обосновано отсутствие хронической токсичности после длительного применения. Новый препарат на основе комбинации абамектина и масла зародышей пшеницы не вызывает изменений функций гемопоэтической системы организма лабораторных моделей, не проявляет провоспалительных свойств.

Ключевые слова: авермектины, паразиты, препарат, лабораторные модели, масло, зародыши пшеницы, безвредность, токсичность, кровь, крысы.

Сведения об авторах:

Фатахов Курбан Фатахович, кандидат ветеринарных наук, старший преподаватель кафедры иммунологии и биотехнологии ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина»; 109472, г. Москва. ул. Академика Скрябина, 23; тел.: 8-985-0988624; e-mail: fat.kurban1995@mail.ru.

Девришов Давудай Абдулсемедович, доктор биологических наук, член корреспондент РАН, профессор, профессор кафедры иммунологии и биотехнологии ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина»; 109472, г. Москва. ул. Академика Скрябина, 23; тел.: 8-925-7402409; e-mail: davud@agrovet.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Пименов Николай Васильевич, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой иммунологии и биотехнологии ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии -МВА имени К.И. Скрябина»; 109472, г. Москва. ул. Академика Скрябина, 23; тел.: 8-909-9448012; e-mail: pimenov-nikolai@yandex.ru.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей