|
УДК 619:615.07:001.891.53:631.14 DOI 10.33861/2071-8020-2022-3-3-7 Кривоногова А.С., Исаева А.Г., Соколова О.В., Логинов Е.А., Беспамятных Е.Н. Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Уральский федеральный аграрный научноисследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук», г. Екатеринбург Антимикробные препараты широко применяются для предотвращения болезней и улучшения продуктивности сельскохозяйственных животных. При этом антимикробная резистентность (далее, АМР) является неизбежным побочным эффектом и главной проблемой нетерапевтических схем приема антибиотиков, так как микрофлора адаптируется к малым дозам антибактериальных препаратов и вырабатывает устойчивость. Механизм горизонтального переноса генов (далее, ГПГ) способствует быстрому её распространению в микробиомах животных, человека, окружающей среды [3, 4, 9, 12]. ГПГ способствует эволюции бактерий, приводя к появлению устойчивых штаммов патогенов таких как, например, метициллин-резистентный золотистый стафилококк (далее, MRSA), энтеробактерии -продуценты в-лактамаз расширенного спектра (далее, БЛРС) или ван-комицин-резистентные энтерококки (далее, VRE). Эти патогены получили ген резистентности от другого вида бактерий, связывая клинически важные патогены с резистомом - глобальным резервуаром генов резистентности, которые придают устойчивость к антибиотикам [5]. В результате микрофлора продуктивных животных становится резервуаром и источником генов резистентности (далее, ARGs). Добавка кормовых антибиотиков в рацион животных, нарушение лечебных схем и низкая доступность лабораторных тестов на антибиотикочувствитель-ность (далее, АБЧ) в животноводстве постепенно привели к вытеснению менее адаптированных бактерий из микробиомов и замещению их в экологических нишах более стойкими штаммами [3, 4, 9, 12]. К представителям наиболее распространенных на молочных фермах патогенов относятся возбудители гнойно-септических заболеваний кожи, копыт, слизистых оболочек респираторной и репродуктивной систем, молочной железы, внутренних органов - различные виды стафилококков. При этом наиболее клинически значимы штаммы, продуцирующие стафилококковые токсины (мембранотоксины, гемолизины, энтеротоксины, эксфолиатины, сфингомиелиназа и др.). Появление в микробиоме фермы таких штаммов приводит к росту заболеваемости среди иммунокомпрометированных животных - новорожденных телят, молодняка крупного рогатого скота, стельных и новотельных коров, а в случае хронических интоксикаций и неблагоприятных условий содержания - у всего поголовья. При иммунодефицитах стафилококки часто вызывают бактериемию с появлением метастатических очагов инфекции любой локализации. Стафилококковая бактериемия в медицине является основной причиной заболеваемости (особенно удлинения периода госпитализации) и смертности среди ослабленных пациентов [1, 2, 11]. Так как стафилококки являются представителями условно-патогенной микрофлоры млекопитающих, они вызывают схожие патологии как у животных, так и у человека, способны распространяться в смежных экологических нишах, а потому представлять опасность не только для продуктивных животных, но и для работников ферм. Кроме того, существует риск передачи агентов резистентности - бактерий или генов (ARGs) - через животноводческую продукцию (мясо и молоко) конечному потребителю. Так, в бактериях, выделенных из молока коров, обнаруживали гены bla, mcr-1, cfr и tet, ассоциированные с антимикробной устойчивостью условнопатогенных бактерий, клинически значимых для человека [8, 10]. Лечение стафилококковых инфекций обычно проводят с применением защищенных бета-лактамов, ванкомицина, фторхинолонов. В настоящее время все чаще встречаются штаммы стафилококков с мультирезистентностью (МЛУ, MDR), широкой устойчивостью (ШЛУ, XDR) или панрезистентностью (ПЛУ, PDR), частично сохраняя чувствительность только к самым новым антибиотикам [1, 7]. Многочисленные исследования и клинические данные показывают, что в среднем в 20%-50% случаев штаммы стафилококков, выделенные из микробиомов людей и животных, продуцируют бета-лактамазы, что фенотипически проявляется в способности инактивировать пенициллины (ампициллин, амоксициллин, противопсевдомонадный пенициллин), цефалоспорины и карбапенемы [1, 2, 6]. В связи с распространением штаммов стафилококков, имеющих гены БЛРС, стартовые протоколы лечения тяжелых стафилококковых инфекций в медицинской практике были пересмотрены и включают ванкомицин или даптомицин в случае инфекций кровотока, ванкомицин, телаванцин или линезолид при инфекциях респираторного тракта, в том числе, пневмониях [1, 13]. Однако в ветеринарии до сих пор сохраняется тенденция к эмпирическому выбору антибиотика, без предварительного определения чувствительности, что ведет к низкой эффективности лечения и развитию резистентности у ранее чувствительных штаммов. В связи с этим необходимы как мониторинг и контроль антимикробной резистентности на животноводческих предприятиях, так и поиск альтернатив антибиотикам и способов сдерживания АМР. Цель работы - проанализировать антимикробную резистентность Staphylococcus spp. на молочно-товарной ферме в пятилетней динамике. Материалы и методы исследований. Для исследований отбирали биологический материал от коров и телят (молоко, смывы с молочной железы, смывы со слизистой оболочки ротовой и носовой полостей, влагалища, смывы с кожи и шерстного покрова), образцы подстилки, смывы с контактных поверхностей, оборудования, инвентаря по уходу за скотом, пробы воздуха на различных технологических участках МТФ. Всего в 2017, 2020 и 2022 гг. было отобрано 142 пробы. Лабораторные исследования выполняли в соответствии с МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам»; ГОСТ Р ИСО 20776-1-2010 «Клинические лабораторные исследования и диагностические тест-системы in vitro*. Исследование чувствительности инфекционных агентов и оценка функциональных характеристик изделий для исследования чувствительности к антимикробным средствам»; ГОСТ 32901-2014 «Молоко и молочная продукция. Методы микробиологического анализа; МУ «Правила бактериологического исследования кормов» (1975 г.); Клинические рекомендации, утв. на Расширенном совещании Межрегиональной ассоциации по клинической микробиологии и антимикробной химиотерапии (Москва, 15.05.2017 г.); Экспертные правила EUCAST. Для культивирования использовали типовые питательные среды; идентификацию микроорганизмов и определение их чувствительности к антибиотикам проводили культуральными микробиологическими методами, а также методом MALDI-TOF масс-спектрометрии (Vitek MS, BioMerieux). Определение фенотипической чувствительности выделенных бактерий к антибиотикам диско-диффузионным методом проводили с использованием агара Мюллера-Хинтон (Bio-Rad, Франция), дисков с антимикробными препаратами (Bio-Rad, Франция, НИЦФ, Санкт-Петербург). Содержание антимикробного препарата (АМП) в стандартных дисках: меропенем - 10 мкг, ципрофлоксацин - 5 мкг, ампициллин - 10 мкг, амоксициллин - 20 мкг, левомицетин - 30 мкг, доксициклин - 30 мкг, азитромицин - 15 мкг, тобрамицин - 10 мкг. Исследования выполнены в ФГБНУ УрФАНИЦ УрО РАН в рамках Государственного задания Минобрнауки России по теме № 0532-2021-0004 «Разработка методологических подходов к мониторингу, контролю и сдерживанию антибиотикорезистентности оппортунистических микроорганизмов в животноводстве». Результаты исследований и их обсуждение. Проведенные исследования показали, что наиболее распространенными представителями рода Staphylococcus на обследованной молочно-товарной ферме в 2017-2022 гг. являлись: S. aureus, S. xylosus, S. equorum, S. epidermidis, S. haemolyticus и S. lentus. В 2017 году в пробах выявляли преимущественно изоляты S. aureus (83,3% от общего количества выделенных стафилококков), S. equorum (12,9%) и S. epidermidis (9,7%), в то время как количество S. haemolyticus и S. lentus составило всего 6,5% и 3,2%, соответственно, а S. xylosus совсем отсутствовал в отобранных пробах (рисунок 1). Рис. 1. Частота встречаемости стафилококков в пробах на молочно-товарной ферме в 2017 году В 2022 году родовой состав стафилококков был представлен следующими видами: S. aureus (30,6% от общего количества стафилококков), S. equorum (27,8%), S. haemolyticus (16,7%), S. xylosus (5,6%), S. epidermidis (5,6%) и S. lentus (2,8%) (рисунок 2). Рис. 2. Частота встречаемости стафилококков в пробах на молочно-товарной ферме в 2022 году За пять лет штаммы S. haemolyticus и S. equorum могли вытеснить S. aureus. Так как существенных изменений в технологии содержания скота на ферме за этот период не было, смена преобладающего вида стафилококков может быть связана с более высокой устойчивостью S. haemolyticus к используемым на ферме антибактериальным препаратам и дезинфектантам. Доля S. lentus осталась неизмененной, составляя в среднем ~3%. Анализ фенотипической чувствительности выделенных изолятов Staphylococcus spp. показал снижение средней чувствительности к фторхинолонам, тетрациклинам, пенициллинам в 2022 году по сравнению с 2017 годом. Результаты тестов на чувствительность распределяли по 5 группам: 0 - резистентность (R), 1-2 - чувствительность снижена (I), 3-4 - чувствительность сохранена (S) (табл. 1, 2, 3). Таблица 1 Изменение чувствительности S. aureus к антибиотикам в период 2017-2022 гг. | Ципрофлоксацин | Азитромицин | Доксициклин | Меропенем | Левомицетин | Тобрамицин | Амоксициллин | Ампициллин | 2017 г. | 3,1±0,5 (3) | 2,7±1,0 (3) | 2,5±1,0 (3) | 2,8± 0,9(3) | 1,5±1,8 (0) | 3,5±0,7 (4) | 3,6±0,9 (4) | 3,6± 0,6 (4) | S, % | 92,9 | 71,4 | 64,3 | 85,7 | 42,9 | 92,9 | 92,9 | 92,9 | I, % | 0,0 | 21,4 | 28,6 | 7,1 | 0,0 | 7,1 | 7,1 | 7,1 | R, % | 7,1 | 7,1 | 7,1 | 7,1 | 57,1 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | 2022 г. | 2,5±1,4 (3) | 0,8± 0,9 (0) | 1,4±1,3 (1) | 1,6±1,1 (2) | 1,4±1,1 (1) | 1,2±1,3 (0) | 1,1±1,1 (0) | 0,8± 0,9 (0) | S, % | 80 | 0 | 30 | 20 | 20 | 20 | 10 | 0 | I, % | 0 | 50 | 50 | 60 | 60 | 30 | 50 | 50 | R, % | 20 | 50 | 20 | 20 | 20 | 50 | 40 | 50 | p | 0,173 | 0,012 | 0,093 | 0,012 | 0,636 | 0,013 | 0,005 | 0,008 | Примечание: X±x (мода) n=24; R - резистентность (0), I - чувствительность снижена (1-2), S - чувствительность сохранена (3-4) Было обнаружено снижение доли чувствительных изолятов S. aureus и увеличение доли резистентных и слабочувствительных. Так, в 2017 году к в—лактамным антибиотикам - меропенему, амоксициллину и ампициллину, - было восприимчиво 85%-92% изолятов, а в 2022 году - только 0%-20%. При этом увеличилось число изоля-тов со сниженной чувствительностью к меропенему (I - 7,1% в 2017 году и 60% в 2022 году), увеличилась доля как слабочувствительных (I - около 7% в 2017 году, 50% в 2022 году), так и резистентных к ампициллину и амоксициллину форм (R - 0% в 2017 году, 50% и 40% в 2022 году). Аналогичная тенденция обнаружена для азитромицина и тобрамицина (рисунок 3). Рис. 3. Изменение средней чувствительности S. aureus на молочно-товарной ферме за 5 лет Выявили тенденцию к снижению средней чувствительности обнаруженных на МТФ изолятов S. epidermidis к полусинтетическим пенициллинам. При этом к доксициклину, наоборот, в 2022 году было обнаружено больше восприимчивых изолятов, чем в 2017 году (табл. 2). Таблица 2 Изменение чувствительности S. epidermidis к антибиотикам в период 2017-2022 гг., n=10 | Ципрофлоксацин | Азитромицин | Доксициклин | Меропенем | Левомицетин | Тобрамицин | Амоксициллин | Ампициллин | 2017 г. | 3,3±0,3 (3) | 1,3±1,2 (2) | 1,3±1,2 (2) | 3,3±0,6 (3) | 2,0±1,7 (3) | 3,0±0,0 (3) | 3,0±0,0 (3) | 3,0±0,0 (3) | S % | 100 | 0 | 0 | 100 | 67 | 100 | 100 | 100 | I, % | 0 | 67 | 67 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | R, % | 0 | 33 | 33 | 0 | 33 | 0 | 0 | 0 | 2022 г. | 3,0±1,0 (-) | 1,3±1,2 (2) | 2,0±1,0 (-) | 2,7±0,6 (3) | 2,0±1,0 (-) | 3,3±0,6 (3) | 1,3±1,2 (2) | 1,3±1,2 (2) | S, % | 67 | 0 | 33 | 67 | 33 | 100 | 0 | 0 | I, % | 33 | 67 | 67 | 33 | 67 | 0 | 67 | 67 | R, % | 0 | 33 | 0 | 0 | 0 | 0 | 33 | 33 | Р | 1,000 | 1,000 | 0,180 | 0,180 | 1,000 | 1,000 | 0,109 | 0,109 | В отношении S. equorum отмечено некоторое снижение активности доксициклина и ампициллина в 2022 году по сравнению с 2017 годом. При этом средняя чувствительность данных изолятов к азитромицину и левомицетину повысилась. В целом, для более точного описания динамики антибиотикочувствительности S. epidermidis и S. equorum требуются дальнейшие исследования с охватом большего количества изолятов. Однако, выявленные факты фенотипической резистентности у изолятов стафилококков на МТФ косвенно свидетельствуют о циркуляции генетических детерминант резистентности в микробиомах фермы, в том числе о наличии у стафилококков генов резистентности, ассоциированных с в-лактамазами. Таблица 3 Изменение чувствительности S. equorum к антибиотикам в период 2017-2022 гг. S.equorum | Ципрофлоксацин | Азитромицин | Доксициклин | Меропенем | Левомицетин | Тобрамицин | Амоксициллин | Ампициллин | 2017 г. | 4,0±0,0 (4) | 3,7±0,6 (4) | 3,7±0,6 (4) | 3,2±1,2 (4) | 2,0±1,0 (-) | 3,0±0,0 (3) | 3,0±1,0 (-) | 3,7±0,6 (4) | S % | 100 | 100 | 100 | 67 | 33 | 100 | 67 | 100 | I, % | 0 | 0 | 0 | 33 | 67 | 0 | 33 | 0 | R, % | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 2022 г. | 3,5±0,7 (-) | 4,0±0,0 (4) | 2,2±0,7 (-) | 4,0±0,0 (4) | 2,5±0,7 (-) | 3,0±0,0 (3) | 3,0±0,0 (3) | 2,5±0,7 (-) | S, % | 100 | 100 | 50 | 100 | 50 | 100 | 100 | 50 | I, % | 0 | 0 | 50 | 0 | 50 | 0 | 0 | 50 | R, % | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | Р | 1,000 | 1,000 | 0,180 | 1,000 | 0,655 | 1,000 | 1,000 | 1,000 | Была обнаружена тенденция к росту количества мультирезистентных изолятов Staphylococcus spp. в период с 2017 по 2022 г. (табл. 4) Таблица 4 АБЧ мультирезистентных изолятов Staphylococcus spp., обнаруженных на ферме в период 2017-2022 гг. Год | Изолят* | Резистентность (R) | Антибиотик выбора (S) | Место обнаружения | 2017 | SA | азитромицин, доксициклин, левомицетин | офлоксацин, ципрофлоксацин, меропенем, тобрамицин, амоксициллин, ампициллин | Молоко из танка-охладителя | 2020 | SA | левомицетин, бензилпенициллин, клиндамицин | энрофлоксацин, тобрамицин, меропенем | Родильное отделение - смыв из влагалища коровы после отела | SA | клиндамицин, левомицетин, амоксициллин, азитромицин | тетрациклин, энрофлоксацин | Родильное отделение - ветошь для обработки вымени | SA | азитромицин, бензилпенициллин, тетрациклин | меропенем, тобрамицин, клиндамицин, амоксициллин, ванкомицин | Родильное отделение - молоко для телят | 2022 | SA | амоксициллин, ванкомицин, азитромицин | ципрофлоксацин, меропенем | Отделение дойного стада - контактные поверхности | SA | амоксициллин, ципрофлоксацин, ванкомицин, левомицетин, азитромицин, тобрамицин, доксициклин, меропенем, цефтриаксон | - | Отделение дойного стада - подстилка | SA | ванкомицин, азитромицин | ципрофлоксацин | Отделение телят - контактные поверхности | SA | амоксициллин, ципрофлоксацин, ванкомицин, левомицетин, азитромицин, тобрамицин, доксициклин, меропенем, цефтриаксон | - | Отделение телят - подстилка | SA | азитромицин, тобрамицин, доксициклин | ципрофлоксацин | Родильное отделение - подстилка | SH | клиндамицин, бензилпенициллин, цефокситин, гентамицин, ципрофлоксацин, тобрамицин, меропенем, амоксициллин+клавулановая кислота, ампициллин-сульбактам, цефазолин, цефтриаксон | Азитромицин, кларитромицин | Родильное отделение - смыв с кожи сосков коровы | SE | бензилпенициллин, цефазолин | клиндамицин, азитромицин, меропенем | Отделение дойного стада - кормовой стол | Примечание: * - SA - S. aureus, SE - S. epidermidis, SH - S. haemoliticus Так в 2017 г. устойчивость к двум и более антибиотикам выявили у стафилококков в 1,9% проб; в 2017 году - в 7,9% проб, в 2022 году -в 11,3% проб. При этом в 2017 г. мультирезистентность обнаружили только у изолятов S. aureus, а в 2022 - у S. aureus, S. haemolyticus и S. epidermidis. Это может быть косвенным свидетельством межвидового переноса генов резистентности в популяциях стафилококков. Наиболее неблагоприятно нахождение мультирезистентных штаммов Staphylococcus spp. в подстилке, на контактных поверхностях и инвентаре по уходу за скотом, так как с помощью этих факторов передачи происходит распространение штаммов и перенос их в пространстве фермы или между животными. Увеличение количества мультире-зистентных стафилококков затрудняет лечение больного поголовья стандартными схемами антибиотикотерапии, следовательно, может привести к увеличению частоты осложненных и затяжных форм стафилококковых инфекций, а в случае иммунокомпрометированных животных - к росту смертности поголовья от гнойно-септических заболеваний. Предположительно, формирование устойчивости в родильном отделении и телятнике могло быть связано с использованием одинаковых протоколов и средств дезинфекции в течение нескольких лет, что способствовало селекции резистентных штаммов Staphylococcus spp. и распространению генов резистентности в микробиомах. Также проводили исследования в пустом корпусе, освобожденном от скота для проведения ремонтных работ и дезинфекции. Отбирали пробы с контактных поверхностей, стен, инвентаря, кормового стола, пола, ограждений, кормушек и поилок через 1 и 6 месяцев после вывода скота. В пробах, взятых через 1 месяц, обнаружили изоляты S. equorum и S. haemolyticus, а через полгода - только изоляты S. equorum (рисунок 4). Рис. 4. Микроорганизмы в пробах воздуха в пустом корпусе через 1 и 6 месяцев после вывода скота Таким образом, можно предположить, что штаммы S. equorum либо изначально имели более высокую устойчивость к дезинфектантам, низким температурам и условиям обитания в целом, либо приобрели её быстрее, чем штаммы S. haemolyticus. Заключение. В ходе проведенных исследований были установлены тенденции к росту антибиотикорезистентности обнаруженных на МТФ Staphylococcus spp. и к увеличению количества мультирезистент-ных изолятов, не восприимчивых к 3-5 классам антибиотиков. Чувствительность изолятов S. aureus в 2022 году по сравнению с 2017 годом существенно снизилась к бета-лактамам (меропенему, ампициллину, амоксициллину), азитромицину и тобрамицину. Полученные данные свидетельствуют о том, что антимикробная резистентность на молочной ферме остается актуальной проблемой. Те стафилококки, которые преобладали в 2017 году, могли быть замещены более устойчивыми штаммами. Кроме того, эпизоды резистентности у стафилококков, обитающих на МТФ, свидетельствуют о контаминации микробиомов фермы генами резистентности. Список литературы: - Ильченко Е.Л., Смирнова Ю.А. Исследование резистентности бактерий класса staphylococcus к антибиотикам широкого спектра// В сборнике: Новые задачи современной медицины Материалы V Международной научной конференции. 2018. C. 28-35.
- Abebe E. et al. A Review on molecular mechanisms of bacterial resistance to antibiotics/ E. Abebe, B. Tegegne, S. Tibebu// European Journal of Applied Sciences. 2016. Vol. 8. No. 5. P. 301-310.
- Castillo-Lypez R.I. et al. Natural alternatives to growth-promoting antibiotics (GPA) in animal production/ R.I. Castillo-Lypez, E.P. Gutierrez-Grijalva, N. Leyva-Lopez// J. Anim.Plant Sci. 2017. 27 (2). Р. 349-359.
- Donnik I.M. et al. Special features of Pseudomonas aeruginosa strains in animal and poultry farms in the regions with various levels of man-made pollution/ I.M. Donnik, A.G. Isaeva, K.V. Moiseeva, N.B. Musikhina, A.S. Krivonogova, I.A. Shkuratova// Agronomy Research. 2020. Vol. 18. 4. P. 2365-2373.
- Ellabaan M.M.H. et al. Forecasting the dissemination of antibiotic resistance genes across bacterial genomes/ M.M.H. Ellabaan, C. Munck, A. Porse// Nature Communications. 2021. 12.
- Jim O’Neill. Antimicrobial Resistance: Tackling a crisis for the health and wealth of nations / O’Neill Jim. // The Review on Antimicrobial Resistance Chaired by Jim O’Neill. - 2014. URL: https://amr-review.org/sites/default/files/ AMR%20Review%20Paper%20-%20Tackling%20a%20crisis%20for%20the%20he alth%20and%20wealth%20of%20nations_1.pdf.
- Kapoor G., Saigal S., Elongavan A. Action and resistance mechanisms of antibiotics: A guide for clinicians// J Anaesthesiol Clin Pharmacol. - 2017. - Vol. 33. - Issue 3. - Р. 300-305.
- Kock R. et al. Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae in wildlife, foodproducing, and companion animals: a systematic review/ R. Kock, I. Daniels-Haardt, K. Becker, A. Mellmann, A. Friedrich, D. Mevius, S. Schwarz, A. Jurke// Clinical Microbiology Infection. - 2018. - Vol. 24. 12. Р. 1241-1250.
- Li X. et al. Phenotypic Antimicrobial Resistance Profiles of E. coli and Enterococcus from Dairy Cattle in Different Management Units on a Central California Dairy/ X. Li, S. Aly, Z. Su, R. Pereira, D. Williams// Clin Microbiol. - 2018. -Vol. 7. - P. 311.
- Rodrigues I.A. et al. Antimicrobial resistance genes in bacteria from animalbased foods/ I.A. Rodrigues, R.G. Ferrari, P.H. Panzenhagen, S.B. Mano, C.A. Conte-Junior// Advances in Applied Microbiology. Elsevier Inc. - 2020. - V. 112. -pp. 143-183.
- Schito G.C. et al. The ARESC study: An international survey on the antimicrobial resistance of pathogens involved in uncomplicated urinary tract infections/ G.C. Schito, K.G. Naber, H. Botto, J. Palou, T. Mazzei, L. Gualco, A. Marchese// International Journal of Antimicrobial Agents. - 2009. - 34. -P. 407-413.
- Van Boeckel T.P. et al. Reducing antimicrobial use in food animals/ T.P. Van Boeckel, E.E. Glennon, D. Chen, M. Gilbert, T. Robinson, B. Grenfell, S. Levin, S. Bonhoeffe, R. Laxminarayan// Science. - 2017. - 29. - 357 (6358). - pp. 13501352.
- Wright G. Antibiotic resistance: where does it come from and what can we do about it?// 2010. 8. Р. 123-129.
Резюме. Изучали изменение антимикробной резистентности изолятов Staphylococcus spp. на молочно-товарной ферме в течение пяти лет. Исследовали молоко, смывы с молочной железы коров, смывы со слизистых оболочек ротовой и носовой полости, с кожи и шерстного покрова коров и телят, смывы со слизистой оболочки влагалища коров, образцы подстилки, смывы с контактных поверхностей, оборудования, инвентаря по уходу за скотом, пробы воздуха на различных технологических участках молочно-товарной фермы. Исследования проводили в период с 2017 по 2022 годы. Анализировали родовой и видовой состав микроорганизмов, определяли фенотипическую чувствительность выделенных изолятов стафилококков к антибиотикам. Установили, что наиболее часто среди представителей рода Staphylococcus встречались S. aureus, S. xylosus, S. equorum, S. epidermidis, S. haemolyticus и S. lentus. В динамике выявили изменение соотношения преобладающих изолятов: увеличение доли S. haemolyticus и S. equorum и уменьшение S. aureus. Исследование чувствительности к антибиотикам показало тенденцию к росту антимикробной резистентности обнаруженных Staphylococcus spp. Установили, что в 2017 г. 85% изолятов золотистого стафилококка было, в основном, чувствительно к меропенему, ампициллину, амоксициллину, а в 2022 г. - не более 20%. Чувствительность изолятов S. aureus к азитромицину и тобрамицину в 2022 году по сравнению с 2017 г. существенно снизилась. Кроме того, увеличилось количество мультирезистентных изоля-тов, невосприимчивых к 3-5 классам антибиотиков. Полученные данные свидетельствуют о контаминации популяций стафилококков агентами резистентности и об их циркуляции в микробиоценозах фермы. Ключевые слова: крупный рогатый скот, молочная ферма, микроорганизмы, стафилококки, изоляты, Staphylococcus aureus, антимикробная резистентность, антибиотикочувствительность, мультирезистентность, контаминация популяций микроорганизмов. Сведения об авторах: Кривоногова Анна Сергеевна, доктор биологических наук, доцент, ведущий научный сотрудник, доктор биологических наук, заведующий лабораторией биологических технологий ФГБНУ «Уральский федеральный аграрный научноисследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»; 620142, г. Екатеринбург, ул. Белинского, 112 а; тел.: 8-343-2572044; e-mail: tel-89826512934@yandex.ru. Соколова Ольга Васильевна, доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник лаборатории геномных исследований и селекции животных ФГБНУ «Уральский федеральный аграрный научно-исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»; 620142, г. Екатеринбург, ул. Белинского, 112 а; тел.: 8-343-2572044, e-mail: nauka_sokolova@mail.ru. Логинов Егор Александрович, лаборант лаборатории биологических технологий ФГБНУ «Уральский федеральный аграрный научно-исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук», 620142, Российская Федерация, г. Екатеринбург, ул. Белинского, 112 а; e-mail: attiwer1337@gmail.com. Беспамятных Елисей Николаевич, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории иммунологии и патобиохимии ФГБНУ «Уральский федеральный аграрный научно-исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук», 620142, г. Екатеринбург, ул. Белинского, 112 а; e-mail: demonorth@mail.ru. Ответственный за переписку с редакцией: Исаева Альбина Геннадьевна, доктор биологических наук, доцент, ведущий научный сотрудник лаборатории биологических технологий ФГБНУ «Уральский федеральный аграрный научно-исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»; 620142, г. Екатеринбург, ул. Белинского, 112 а; тел.: 8-343-2572044; e-mail: isaeva.05@bk.ru.
|
|