Особенности клеточного иммунитета у поросят при цирковирусной инфекции

Ермаков А.М., Бутенков А. И.
СКЗНИВИ Россельхозакадемии

Введение. На современном этапе развития промышленного животноводства ряд инфекционных заболеваний свиней объединяются по спектру клинических признаков в "синдром послеотъемного мультисистемного истощения поросят" (PMWS), вызываемый ассоциацией нескольких вирусов. Заболевание характеризуется сочетанием клинических признаков, включающих в себя прогрессирующее снижение массы тела, отставание в росте, одышку. С различной частотой наблюдают бледность и желтушность кожных покровов животных, увеличение паховых лимфатических узлов, повышение температуры тела, диарею, резко уменьшается иммунобиологическая реактивность организма и сопротивляемость его к инфекционным болезням. В дальнейшем патологические состояния, развившиеся вследствие СПМИ, в свою очередь, способны оказывать негативное влияние на резистентность организма[1,2,3, 4].

Цель исследования. Выяснить влияние синдрома послеотъем-ного мультисистемного истощения на состояние клеточной системы иммунитета у поросят в процессе постнатального онтогенеза.

Материал и методы. Опыты проводили на трех группах поросят по 20 голов в каждой, сформированных по принципу пар-аналогов. Первая группа включала клинически здоровых животных. Во вторую группу были включены животные с синдромом СПМИ легкой степени тяжести, характеризующимся дефицитом массы тела, не превышающим 10%, отсутствием выраженных клинических признаков заболевания. Третья группа животных включала поросят с тяжелым течением СПМИ, у которых отмечались яркие клинические признаки заболевания, дефицит массы тела составлял 20-30%. Определение количества Т-лимфоцитов и их субпопуляций проводили методом розеткообразо-вания — Е-РОК, тимусзависимые Т-лимфоциты имеют рецепторы для эритроцитов барана, выступающие специфическим маркером для их распознавания (Е-РОК: Erythrocyte — розеткообразующие клетки). Выявляли 2 субпопуляции: теофиллинчувствительные Т-лимфоциты (Т-супрессоры), утратившие способность к розеткообразованию под влиянием обработки теофиллином, и теофиллинустойчивые Т-клетки (Т-хелперы) лимфоциты, такую способность сохранившие. Определение содержания Т-лимфоцитов проводили с первого по шестой месяц жизни животных ежемесячно.

Результаты исследования. Результаты определения относительного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов у поросят в возрасте 1 месяц представлены в таблице 1.

Таблица 1 Показатели клеточного иммунитета периферической крови у поросят в возрасте 1 месяц

Группа поросят, (n=20)	Т-лимфоциты		Т-хелперы		Т-супрессоры		Тх/Тс
	%	х10*9/л	%	х10*9/л	%	*х10*9/л
Здоровые	48,7±0.4	1,33±0.04	27,8±0,8	0,41±0,01	12,5±0,4	0,18±0,01	2,17
СПМИ с легким течением	29,1±1,4**	0,69±0,04**	15,9±0,8**	0,11±0,01***	9,3±0,5*	0,064±0,03***	1,65
СПМИ с тяжелым течением	68,6±1,2***	0,43±0,05**	11,8±0,8***	0,04±0,02***	7,2±0,6**	0,031±0,01***	1,58
Р <0,05,** р <0,01,*** р <0,001 в сравнении со здоровыми животными.

Установлено, что при СПМИ у поросят отмечается снижение общего числа лейкоцитов периферической крови, что сопровождается выраженной лимфопенией. При легкой степени тяжести СПМИ количество Т-лимфоцитов в периферической крови снизилось до 29,1 ± 1,4% и при тяжелом течении СПМИ увеличилось до 68,6 ± 1,2%, абсолютное число лимфоцитов снизилось до 0,69±0,04*109/л при легкой степени тяжести и до 0,43±0,05*109/л - при тяжелом течении. Соотношение Т-хелперов к Т-супрессорам по мере увеличения тяжести СПМИ снижалось с 2,17 при легкой степени тяжести до 1,58 - при тяжелом течении.

Все эти изменения: снижение общего числа Т-лимфоцитов и отдельных популяций РОК, снижение их соотношения (р-РОК и в-РОК), по всей видимости, отражают нарушение лимфопоэза и перераспределение клеток, а также изменение регуляторного потенциала лимфо-идных тканей. Из теории общей иммунологии [Х.К. Барбер, 1980; В.М. Апатенко, 1982], выраженное снижение количества Т-лимфоцитов по отношению к здоровым животным сопровождается снижением клеточного иммунитета, что влечет за собой падение резистентности, в первую очередь, к вирусным инфекциям [Л.И. Винницкий, 1997].

Результаты определения относительного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов у поросят в 2 месяца представлены в таблице 2. Установлено, что при СПМИ у поросят отмечается снижение общего числа лейкоцитов периферической крови, что, кроме того, сопровождается выраженной лимфопенией. При СПМИ развивалась выраженная лейкопения и лимфопения, количество Т-лимфоцитов периферической крови снизилось до 23,7±1,1% при легкой степени и увеличилось до 57,54±1,2% при тяжелом течении СПМИ. Но на фоне лимфопении абсолютное значение лимфоцитов снизилось до 0,58±0,021х109/л при СПМИ легкой степени и до 0,37±0,022х109/л при тяжелом течении СПМИ. Соотношение Т-хелперов к Т-супрессо-рам по мере увеличения тяжести течения СПМИ снижалось с 2,04 до 1,71.

Таблица 2 Показатели клеточного иммунитета периферической крови у поросят в возрасте 2 месяца

Группа поросят, (n=20)	Т-лимфоциты		Т-хелперы		Т-супрессоры		Тх/Тс
	%	х10*9/л	%	х10*9/л	%	*х10*9/л
Здоровые	43,4±0,6	1,27±0,01	28,7±0,8	0,31±0,01	13,5±0,7	0,18±0,01	2,04
СПМИ с легким течением	23,7±1,1**	0,58±0,02**	14,9±1,2**	0,12±0,01**	8,5±1,1**	0,04±0,01***	1,69
СПМИ с тяжелым течением	57,5±1,2*	0,37±0,02***	13,6±1,5***	0,04±0,02**	7,9±0,6***	0,03±0,01***	1,71
Р <0,05,** р <0,01,*** р <0,001 в сравнении со здоровыми животными.

Результаты определения относительного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов у поросят в возрасте 3 месяца представлены в таблице 3.

Таблица 3 Показатели клеточного иммунитета периферической крови у поросят в возрасте 3 месяца

Группа поросят, (n=20)	Т-лимфоциты		Т-хелперы		Т-супрессоры		Тх/Тс
	%	х10*9/л	%	х10*9/л	%	*х10*9/л
Здоровые	42,3±0,7	1,03±0,01	30,2±1,1	0,30±0,01	14,2±0,6	0,14±0,01	2,0
СПМИ с легким течением	20,2±1,7**	0,47±0,02*	16,5±1,9**	0,07±0,03	9,46±1,2* *	0,044±0,01	1,74
СПМИ с тяжелым течением	44,6±2,1***	0,31±0,02	13,5±2,1***	0,046±0,01	8,43±1,5***	0,025±0,01	1,76
Р <0,05,** р <0,01,*** р <0,001 в сравнении со здоровыми животными.

Количество Т-лимфоцитов периферической крови снизилось до 20,2±1,7% при легкой степени СПМИ и увеличилось до 44,6±2,1% - при тяжелой его течении. Но на фоне лимфопении абсолютное значение лимфоцитов снизилось до 0,47±0,021х109/л при СПМИ легкой степени и до 0,31±0,018х109/л - при тяжелом течении.

Таким образом, в 3 месяца у поросят с СПМИ развивались более выраженные изменения в Т-клеточном звене иммунитета, чем в предыдущем исследовании, что, по всей видимости, свидетельствует о постепенно нарастающей декомпенсации процесса.

Результаты определения относительного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов у поросят в 4-х месячном возрасте представлены в таблице 4.

Таблица 4 Показатели клеточного иммунитета периферической крови у поросят в возрасте 4 месяца

Группа поросят, (n=20)	Т-лимфоциты		Т-хелперы		Т-супрессоры		Тх/Тс
	%	х10*9/л	%	х10*9/л	%	*х10*9/л
Здоровые	40,5±1,2	1,09±0,01	26,3±0,06	0,2±0,005	16,4±0,3	0,14±0,004	2,0
СПМИ с легким течением	23,4±2,3**	0,55±0,04	17,23±1,8**	0,08±0,009	7,53±1,1**	0,04±0,016	1,77
СПМИ с тяжелым течением	32,9±2,6*	0,32±0,07	14,8±2,1***	0,04±0,003	6,45±1,3**	0,03±0,009	1,78
Р <0,05,** р <0,01,*** р <0,001 в сравнении со здоровыми животными.

С возрастом отмечается общая тенденция к снижению абсолютного количества Т-лимфоцитов у здоровых животных. При СПМИ развивалась выраженная лейкопения и лимфопения, количество Т-лимфоцитов периферической крови снизилось до 23,4±2,3% при легкой степени, до 32,9±2,6% - при тяжелой. На фоне лимфопении абсолютное значение лимфоцитов снизилось до 0,55± 0,04х109/л при СПМИ легкой степени и до 0,32±0,07х109/л - при тяжелой.

Таким образом, в четырехмесячном возрасте у поросят с СПМИ развивались более выраженные изменения в Т-клеточном звене иммунитета, чем в предыдущем исследовании, что свидетельствует о постепенно нарастающей декомпенсации Т-лимфоцитарного звена иммунной системы. Результаты определения относительного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов у поросят в возрасте 5 месяцев представлены в таблице 5.

Таблица 5 Показатели клеточного иммунитета периферической крови у поросят в возрасте 5 месяцев

Группа поросят, (n=20)	Т-лимфоциты		Т-хелперы		Т-супрессоры		Тх/Тс
	%	х10*9/л	%	х10*9/л	%	*х10*9/л
Здоровые	43,8±0,4	1,15±0,01	27,6±1,5	0,31±0,01	13,1±0,8	0,14±0,002	2,08
СПМИ с легким течением	22,6±1,5***	0,57±0,07**	17,5±2,3**	0,09±0,02***	9,8±1,0*	0,04±0,03*	1,76
СПМИ с тяжелым течением	27,9±2,3**	0,33±0,04***	13,7±2,1***	0,05±0,07***	6,9±1,2**	0,03±0,02***	1,95
Р <0,05,** р <0,01,*** р <0,001 в сравнении со здоровыми животными.

Установлено, что при СПМИ у поросят отмечается снижение общего числа лейкоцитов периферической крови, что сопровождается выраженной лимфопенией. Количество Т-лимфоцитов периферической крови снизилось до 22,6±1,5% при легкой степени и до 27,9±2,3% при тяжелой степени заболевания. На фоне лимфопении абсолютное значение лимфоцитов снизилось до 0,57±0,07х109/л при легкой степени и до 0,33±0,04х109/л при тяжелом течении СПМИ. Соотношение Т-хелперов к Т-супрессорам также изменялось и, по мере увеличения тяжести СПМИ, снижалось с 2,08 до 1,95. В целом у поросят с СПМИ в 5 месяцев имелись более выраженные изменения клеточного иммунитета, чем у поросят меньших возрастных групп.

Результаты определения относительного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов у поросят в шестимесячном возрасте представлены в таблице 6.

Таблица 6 Показатели клеточного иммунитета периферической крови у поросят в возрасте 6 месяцев

Группа поросят, (n=20)	Т-лимфоциты		Т-хелперы		Т-супрессоры		Тх/Тс
	%	х10*9/л	%	х10*9/л	%	*х10*9/л
Здоровые	44,7±2,9	0,89±0,02	29,2±2,5	0,25±0,01	12,4±1,8	0,10±0,002	2,33
СПМИ с легким течением	22,6±3,5**	0,44±0,03***	19,7±2,0**	0,08±0,01***	10,1±1,3	0,05±0,01*	1,94
СПМИ с тяжелым течением	27,6±6,8**	0,26±0,07***	17,3±2,2***	0,03±0,02***	7,6±1,2*	0,03±0,01**	1,95
Р <0,05,** р <0,01,*** р <0,001 в сравнении со здоровыми животными.

При СПМИ развивалась выраженная лейкопения и лимфопения, количество Т-лимфоцитов периферической крови снизилось до 22,6±3,5% при легкой степени и до 27,6±6,8% при тяжелой. На фоне лимфопении абсолютное значение лимфоцитов снизилось до 0,44±0,03х109/л при СПМИ легкой степени и до 0,26± 0,07х109/л при тяжелом течении СПМИ. Соотношение Т-хелперов к Т-супрессорам по мере увеличения тяжести СПМИ снижалось с 2,33 до 1,78.

Выводы.

1.Снижение общего числа Т-лимфоцитов и отдельных популяций РОК, снижение их соотношения (р-РОК и в-РОК) отражают нарушение лимфопоэза в условиях недостаточного развития органов лимфатической системы у поросят с синдромом послеотъемного мультисистемного истощения (СПМИ) в постнатальном онтогенезе, перераспределения клеток и изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей. 2. В возрасте 3 месяца у поросят с СПМИ развивались более выраженные изменения в Т-клеточном звене иммунитета, чем в 1-2 месячном возрасте, что свидетельствует о постепенной декомпенсации процесса развития органов лимфатической системы.

Список литературы

1. Апатенко В.М. Иммунодефицит у животных. /В.М. Апатенко// Ветеринария. - 1982. - N° 5. - С. 29 - 30.
2. Барбер Х.К. Иммунобиология для практических врачей. /Х.К. Барбер. - М.: Медицина, 1980. - 352 с.
3. Виницкий Л.И. Иммунная терапия сепсиса - миф или реальность. /И.Л. Виницкий, И.М. Витвицкая, О.Ю. Попов// Анестезиология и реаниматология. - 1997. - N° 3. - С. 89 - 97.
4. Карташов С.Н.; Ермаков A.M. и др. Морфофункциональная характеристика лимфатических узлов поросят при цирковирусной инфекции //Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные , 2009, N°2.- С. 13-17

Реферат. Комплекс исследований функционального состояния клеточного иммунитета у поросят с синдромом послеотъемного мультисистемно-го истощения в постнатальном онтогенезе выявил снижение общего числа Т-лимфоцитов и отдельных популяций РОК, нарушение соотношения р-РОК и в-РОК у больных животных на всем протяжении опыта, что отражает нарушение лимфопоэза, перераспределения клеток и изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей при недостаточном развитии органов лимфатической системы.

Ключевые слова: синдром послеотъемного мультисистемного истощения поросят (СПМИ), иммунитет, лимфоциты, Т-лимфоциты, Т-супрессоры, Т-хелперы

Summary. The complex of researches of a functional condition of cellular immunity at pigs with a syndrome after the dairy period a multisystem exhaustion in at pigs with till a birth in development infringement has revealed accruing decrease in general number T-limfotsity and separate populations ROC, decrease in their parity (R-ROC and B-ROC) at sick animals on all extent of statement of experience, that, most likely, reflect infringement lymphogeneration in the conditions of insufficient development of bodies of lymphatic system in pigs, and also redistribution of cages and change regulate potential lymphatic cellular.

Key words: syndrome of the dairy period a multisystem exhaustion of pigs, immunity, T-limfotsity, T-supressory, T-helpery.

Сведения об авторах

Ответственный за переписку с редакцией Ермаков Алексей Михайлович, заведующий лабораторией визуальной диагностики и патологии молодняка ГНУ Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Россельхозакадемии, доктор биологических наук, amermakov@yandex.ru 346421, Ростовское шоссе, 0, г. Новочеркасск.

Бутенков Александр Иванович, лаборатория функциональной диагностики болезней сельскохозяйственных животных ГНУ СевероКавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт, кандидат ветеринарных наук, 16.00.02, vitaklinika@rambler.ru, 8-909-434-03-03, 346421, Ростовское шоссе, 0, г. Новочеркасск.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей