Функциональная активность нейтрофилов и состояние системы оксида азота у белых крыс при экспериментальном Т-2 токсикозе и сальмонеллезе

УДК 619:[616.155+6162]:636.028:612.017

Шабунин С.В.,Шахов К.Х.,Сашнина Л.Ю., Востроилова Г.Л., Черницкий А.Е. ГНУ Всероссийский
научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии
Российской академии сельскохозяйственных наук, г. Воронеж

Ветеринарное неблагополучие ряда промышленных комплексов по производству животноводческой продукции связано с тем, что животные выращиваются в условиях с нарушением экологической системы, подвергаясь воздействию различных иммунопатогенных факторов (микотоксины, высокий микробный прессинг и другие), в результате чего их иммунная система испытывает большую нагрузку, сопровождающуюся развитием иммунодефицита и возникновением на его основе инфекционных заболеваний [7, 11, 12, 20, 21, 22].

Из большого количества микотоксинов Т-2 токсин является одним из наиболее часто встречающихся ксенобиотиков грибкового происхождения. В число его основных эффектов входит выраженная иммуносупрессия, вследствие которой организм становится более уязвим для различных патогенов [16, 18, 19] и, в частности, для широко распространенных сальмонелл, обладающих в свою очередь иммуносупрессивными свойствами и способностью к формированию бактерионосительства [10, 15].

Целью исследования стало изучение влияния Т-2 токсина и Salmonella choleraе suis на функциональную активность нейтрофилов и систему оксида азота в эксперименте на белых крысах, моделирующем условия экологического неблагополучия, приближенные к промышленному животноводству.

Материалы и методы исследования. Опыты проведены на половозрелых беспородных белых крысах с массой тела 230-250 г. Животных содержали в условиях вивария ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии в стандартных пластиковых клетках на подстилке из опилок лиственных пород деревьев.

Для опыта по принципу аналогов было подобрано 6 групп белых крыс (n=12), содержание, кормление которых и манипуляции над ними проводили в соответствии с положением Европейской конвенции о защите позвоночных животных, которые используются в эксперименте (Страсбург, 1986) и правилами лабораторной практики в Российской Федерации (ГОСТ Р 53434-2009). Первая группа - контрольная (интактные); животным второй, третьей, пятой и шестой групп в течение 6-ти суток с кормом вводили Т-2 токсин в дозе 1/20 ЛД50 (140 мкг/кг, 2 и 5 группы) и 1/5 ЛД50 (560,0 мкг/кг, 3 и 6 группы). Через сутки после подострой интоксикации животных 5-й и 6-й групп и белых крыс 4-й группы заражали внутрибрюшинно суточной культурой сальмонелл в дозе 1,9 млрд. м. к. (LD50), после чего за ними в течение 6-ти дней вели клиническое наблюдение, учитывали заболеваемость, симптомокомплекс, падеж. На 7-е сутки у подопытных животных определяли фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН), фагоцитарное число (ФЧ), фагоцитарный индекс (ФИ), спонтанный (сНСТ) и стимулированный НСТ-тест (стНСТ) в соответствии с "Методическими рекомендациями по оценке и коррекции неспецифической резистентности животных" [13]. Содержание стабильных метаболитов оксида азота в плазме крови (NOx) - одного из регуляторов взаимодействия макрофагов и бактерий [23] - определяли спектрофотометрически с реактивом Грисса [2]. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием программы Statistica v 8.0, оценку достоверности - по критерию Стъюдента.

Результаты исследований и их обсуждение. У животных, подвергнутых интоксикации Т-2 токсином, отмечали дозозависимое снижение массы тела на 9,8% (140 мг/кг) и 13,3% (560 мг/кг), угнетение, потерю блеска и взъерошенность шерсти, саливацию, гиперемию видимых слизистых, в отдельных случаях выделение неоформленных каловых масс.

Клинические признаки сальмонеллезной инфекции регистрировали у 8 (66,7%) белых крыс, которые характеризовались снижением аппетита, угнетением, взъерошенностью шерстного покрова, скученностью, выделением неоформленных фекалий, у отдельных животных профузным поносом. Масса тела белых крыс через 6 дней после инфицирования по сравнению с контролем снизилась на 6,1%, 2 (16,7%) животных пали.

Экспериментальный сальмонеллез на фоне Т-2 токсикоза проявлялся угнетением, снижением аппетита, гиперемией видимых слизистых оболочек, взъерошенностью шерстного покрова, профузным поносом у 75,0% белых крыс при введении токсиканта в дозе 140 мг/кг и 91,6% в дозе 560 мг/кг. Масса тела по сравнению с контролем снизилась на 13,8 и 20,0%, а падеж составил 3 (25,0%) и 5 (41,7%) животных, соответственно.

Под действием Т-2 токсина в дозах 140 и 560 мкг/кг у белых крыс происходило уменьшение ФАН на 27,1 и 29,0%, ФЧ на 42,0 и 38,0% и ФИ на 20,0 и 14,3%, соответственно, свидетельствующее о снижении поглотительной функции фагоцитов. Уменьшение ФАН, по-видимому, связано с мембранотоксическим эффектом ксенобиотика, инициацией процессов ПОЛ, окислительным повреждением мембран и супрессией митохондрий [16, 20, 19]. Под влиянием Т-2 токсина величина спонтанного НСТ-теста повысилась на 28,5 и 36,4% и стимулированного - на 6,7 и 9,2%, соответственно. Однако, коэффициент стимуляции фагоцитов снизился по сравнению с контролем на 18,1 и 20,4%, что свидетельствует об уменьшении резерва их биоцидности. Таким образом, подострая интоксикация Т-2 токсином снижает как поглотительную, так и переваривающую функции фагоцитов, что свидетельствует об ослаблении клеточного звена врожденного иммунитета животных (табл. 1).

Таблица 1. Влияние Т-2 токсина и сальмонелл на показатели фагоцитоза у белых крыс

Группа животных	ФАЛ,%	ФЧ	ФИ	сНСТ, %	стНСТ, %	Коэффициент стимуляции
Интактные	72,3±1,2	5,0±1,14	7,0±0,17	23,9±1,0	50,9±3,2	2,16±0,18
Подвергнутые интоксикации Т-2 токсином в дозе 140 мкг/кг	52,7±1,8*	2,9±0,35*	5,6±0,56*	30,7±0,8*	54,3±0,6	1,77±0,05*
Подвергнутые интоксикации Т-2 токсином в дозе 560 мкг/кг	51,3±3,0*	3,1±0,43*	6,0±0,71	32,6±1,5*	55,6±1,5	1,72±1,1
Инфицирован­ные S. oh. suis в дозе 1,9 млрд. м. к.	82,0±0,01*	7,3±0,12*	8,9±0,15*	39,3±0,9*	62,5±4,0	1,53±0,08*
Подвергнутые интоксикации Т-2 токсином (140 мкг/кг) и заражению S. сЬ|. suis 1,9 млрд. м. к.	60,0±1,4*	3,3±0,23*	5,5±0,35*	31,7±0,5*	54,0±1,0	1,71±0,04*
Подвергнутые интоксикации Т-2 токсином (560 мкг/кг) и заражению S. сЬ|. suis 1,9 млрд. м. к.	50,3±2,9*	2,4±0,1*	4,7±0,23*	35,8±2,2*	60,8±2,7*	1,73±0,12*

* - р<0,05 по сравнению с интактными животными

Под влиянием Т-2 токсина в дозе 140 мг/кг концентрация стабильных метаболитов оксида азота не отличалась от таковой у интактных животных, а введение более высокой дозы токсиканта сопровождалось несущественным увеличением содержания NOx (табл. 2).

Таблица 2. Содержание стабильных метаболитов оксида азота (NOx) в плазме крови белых крыс

Группа животных	Дозы	NOx, мкМ/л
Интактные		85,9±8,41
Подвергнутые интоксикации Т-2 токсином, мкг/кг	140	85,5±10,5
	560	110,0±13,2
Инфицированные S. сК suis, млрд.м.к.	1,9	1680,1±250,0*
Подвергнутые интоксикации Т-2 токсином (140 мкг/кг) и заражению S. с^1. suis, млрд.м.к	1,9	1708,9±174,8*
Подвергнутые интоксикации Т-2 токсином (560 мкг/кг) и заражению S. с^1. suis, млрд.м.к.	1,9	1864,1±217,1*

* - р<0,05 по сравнению с интактными животными

Отсутствие изменений в содержании оксида азота или несущественное увеличение его количества у животных под влиянием токсиканта, по-видимому, связано с тем, что введение Т-2 токсина приводит к резкому возрастанию активности фермента аргиназы, обеспечивающего преобразование L-аргинина в орнитин и мочевину, в результате чего из-за дефицита субстрата (L-аргинина) происходит блокирование активации синтеза оксида азота [1, 3, 8].

Заражение белых крыс сальмонеллами сопровождалось повышением ФАН на 13,4%, ФЧ на 46,0% и ФИ на 27,1%, обусловленным накоплением в их организме экзо- и эндотоксинов, играющих основную роль в стимуляции фагоцитоза, активации системы полинуклеар-ных нейтрофилов. У животных отмечено также увеличение показателей спонтанного НСТ-теста на 64,4% и стимулированного - на 22,8%, однако коэффициент стимуляции фагоцитов снизился на 29,2% (табл. 1).

Заражение сальмонеллами вызвало резкое возрастание продукции оксида азота (в 19,6 раза). Метаболиты азота, значительное количество которых образуется нейтрофильными гранулоцитами во время кислородно-метаболического взрыва, наряду с первичными и вторичными активными формами кислорода, являются эффектор-ными молекулами, составляющими ядро кислородзависимой бакте-рицидности [4].

Инфицирование белых крыс сальмонеллами на фоне Т-2 токсикоза (140 мкг/кг) сопровождалось снижением ФАН на 17,0%, ФЧ - на 34,0% и ФИ - на 21,4%, и увеличением по сравнению с контролем значений спонтанного и стимулированного НСТ-теста на 32,6 и 6,1%, соответственно. При этом коэффициент стимуляции фагоцитов был на 20,8% ниже, что свидетельствует об уменьшении резерва их биоцид-ности (табл. 1).

Таким образом, заражение крыс сальмонеллами на фоне Т-2 токсикоза (140 мкг/кг), сопровождалось снижением не только поглотительной активности фагоцитов, но и их переваривающей функции.

Инфицирование крыс сальмонеллами на фоне подострой интоксикации Т-2 токсином (560 мкг/кг) сопровождалось более существенным, чем при введении 140 мг/кг токсиканта, снижением фагоцитоза: ФАН на 30,4%, ФЧ на 52,0% и ФИ на 32,9% соответственно.

Значения спонтанного и стимулированного НСТ-теста у них были на 49,8 и 19,5 % выше по сравнению с контролем, а коэффициент стимуляции фагоцитов на 19,9% ниже, что свидетельствует об уменьшении резерва их биоцидности.

При инфицировании животных сальмонеллами на фоне Т-2 токсикоза (140 и 560 мкг/кг) регистрировали повышенные концентрации стабильных метаболитов азота в плазме крови, что связано как с токсическим повреждением печени [1, 8], так и с развитием бактериальной инфекции [6, 14, 17, 23].

Для выяснения взаимосвязи функциональной активности нейтрофилов и системы оксида азота нами проведен корреляционный анализ полученных результатов с определением коэффициента Пирсона (R).

Корреляционный анализ не выявил достоверных связей (р<0,05) между показателями фагоцитоза и уровнем стабильных метаболитов оксида азота в плазме крови крыс, подвергнутых интоксикации. В то же время при введении животным Т-2 токсина в дозах 140 и 560 мг/кг обнаруживалась обратная зависимость между ФЧ и показателем стимулированного НСТ-теста (R= -0,61 и -0,62 при р<0,05), а также уровнем стимулированного НСТ-теста и содержанием стабильных метаболитов оксида азота в плазме крови (R=-0,70 и -0,59 (р<0,05), соответственно. При заражении крыс сальмонеллами между ФИ и концентрацией стабильных метаболитов оксида азота в плазме крови коэффициент корреляции составил +0,82 (р<0,05), что связано с активацией нейтрофилов, сопровождающейся усиленным синтезом оксида азота. При заражении животных сальмонеллами на фоне подострой интоксикации в дозах 140 и 560 мг/кг была выявлена обратная зависимость между ФИ и накоплением стабильных метаболитов оксида азота в плазме крови (R=-0,81 и R=-0,83 при р<0,05), свидетельствующая о том, что избыточное накопление метаболитов оксида азота в крови оказывает угнетающее действие на поглотительную и переваривающую способность фагоцитов.

Проведенными исследованиями установлено, что под влиянием Т2-токсина у белых крыс происходит не только уменьшение ФАН, ФЧ и ФИ, указывающее на снижение поглотительной функции фагоцитов, но и их переваривающей способности, о чем свидетельствует показатель спонтанного НСТ-теста нейтрофильных лейкоцитов. На фоне незначительного прироста показателей стимулированного НСТ-теста отмечено существенное снижение функциональных резервов биоцид-ности полиморфно-ядерных лейкоцитов у животных.

Изменение концентрации стабильных метаболитов оксида азота у животных этой группы не установлено, что, вероятно, связано с дефицитом субстрата (L-аргинина) в аргиназной реакции [3, 5].

Заражение животных сальмонеллами сопровождалось повышением поглотительной функции фагоцитов и продукции оксида азота, являющегося одним из регуляторов взаимодействия макрофагов и бактерий.

Инфицирование белых крыс сальмонеллами на фоне Т-2 токсикоза (особенно при назначении токсиканта в дозе 560 мг/кг) сопровождалось значительным снижением как поглотительной, так и переваривающей функции фагоцитов, связанным, по-видимому, с накоплением избыточных концентраций метаболитов оксида азота в крови. Полученные нами данные согласуются с результатами исследований Звенигородской Л.А, Ниловой ТВ. (2008), Степовой Е.А. и соавт. (2008), Karpuzoglu E., Ahmed S.A. (2006), Burton N.A. и соавт. (2014), Viryasova G.M. и соавт. (2014) [5, 9, 17, 14, 23], показавших важную роль оксида азота регуляции функциональной активности нейтрофилов.

Заключение. Полученные в эксперименте на белых крысах данные о функциональной активности нейтрофилов и состоянии системы оксида азота при Т-2 токсикозе и сальмонеллезе раскрывают патогенетические механизмы нарушений иммунного статуса у продуктивных животных, подвергающихся воздействию на их организм токсикантов и циркулирующих потенциально патогенных микроорганизмов в условиях промышленных комплексов, и свидетельствуют о необходимости применения адсорбентов, биологических, химиотерапевтических и дезинфицирующих средств.

Список литературы:

1. Близнецова Г.Н. Пероксидное окисление липидов, антиоксидантная система и оксид азота при токсическом повреждении печени: Дисс. ... канд. биол. наук / Г Н. Близнецова. - Воронеж, 2004. - 194 с.
2. Близнецова ГН. Спектрофотометрический метод определения метаболитов оксида азота / ГН. Близнецова, Н.В. Ермакова, З.Д. Мухаммед, М.И. Рец-кий // Вестник Воронежского государст-венного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация - 2002. - № 1. - С. 56-60.
3. Горрен А.К.Ф. Универсальная и комплексная энзимология синтазы оксида азота / А.К.Ф. Горрен, Б. Майер // Биохимия. - 1998. - № 7. - С. 870880.
4. Долгушин И.И. Нейтрофильные внеклеточные ловушки и методы оценки функционального статуса нейтрофилов / И.И. Долгушин, Ю.С. Андреева, А.Ю. Савочкина. - М.: Издательство РАМН, 2009. - 208 с.
5. Звенигородская Л.А. Оксид азота как маркер воспаления при стеатоге-патите у больных с метаболическим синдромом / Л.А. Звенигородская, Т.В. Нилова // Российский медицинский журнал. - 2008. - Т. 10. - № 2. - С. 41-47.
6. Маеда Х. Оксид азота и кислородные радикалы при инфекции, воспалении и раке (обзор) / Х. Маеда, Т. Акаике // Биохимия - 1998. - Т. 63. - № 7. - С. 1007-1019.
7. Новак Д.Д. Инфекционные болезни молодняка сельскохозяйственных животных при воспроизводстве и выращивании / Д.Д. Новак. - Новосибирск: ГП "Новосибирский полиграфкомбинат", 2004. - 365 с.
8. Сайфутдинов Р.Г Роль оксида азота при заболеваниях внутренних органов (обзор литературы) / Р.Г. Сайфутдинов // Вестник современной клинической медицины - 2009. - Т. 2. - № 3. - С. 48-53.
9. Степовая Е.А. Регуляторная роль оксида азота в апоптозе нейтрофилов / Е.А. Степовая, Т.В. Жаворонок, Ю.В. Стариков, В.А. Бычков, Н.Ю. Часовских, Е.Г. Старикова, Г.В. Петина, В.В. Новицкий, Н.В. Рязанцева // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины - 2008. - Т. 146. - № 12. - С. 646-650.
10. Чайникова И.Н. Информативность иммунологических показателей и биологических свойств сальмонелл при прогнозировании исхода сальмонеллез-ной инфекции / И.Н. Чайникова // Вестник ОГУ - 2005. - № 12. - С. 58-62.
11. Шахов А.Г Экологические проблемы здоровья животных / А.Г Шахов, М.Н. Аргунов, В.С. Бузлама // Ветеринария - 2003. - № 5. - С. 3-6.
12. Шахов А.Г. Защита продуктивного здоровья животных в условиях техногенных загряз-нений / А.Г Шахов, М.Н. Аргунов, В.С. Бузлама // Зоотехния - 2003. - № 2. - С. 21-24.
13. Шахов А.Г. Методические рекомендации по оценке и коррекции иммунного статуса животных / А.Г. Шахов, Ю.Н. Масьянов, М.И. Рецкий [и др.] // Новые методы исследований по про-блемам ветеринарной медицины. - М.: РАСХН, 2007. - Ч. III. - C. 216-291.
14. Burton N.A. Disparate impact of oxidative host defenses determines the fate of Salmonella during systemic infection in mice / N.A. Burton, N. SchCirmann, O. Casse, A.K. Steeb, B. Claudi, J. Zankl, A. Schmidt, D. Bumann // Cell Host & Microbe - 2014. - Vol. 15 (1). - P 72-83. - doi: 10.1016/j.chom.2013.12.006.
15. Gerlach R. Salmonella pathogenicity islands in host specificity, host pathogen-interactions and antibiotics resistance of Salmonella enterica / R. Gerlach, M. Hensel // Berl. Munch. Tierarztl. Wochenschr. - 2007. - Vol. 120 (7-8).- P. 317-327.
16. Kamalavenkatesh P. Immunopathological effect of the mycotoxins cyclopiazonic acid and T-2 toxin on broiler chicken / Kamalavenkatesh P, S. Vairamuthu, C. Balachandran, B. Murali Manohar, G. Dhinakarraj // Mycopathologia- 2005. - Vol. 159. - P. 273-279.
17. Karpuzoglu E. Estrogen regulation of nitric oxide and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in immune cells: implications for immunity, autoimmune diseases, and apoptosis / E. Karpuzoglu, S.A. Ahmed // Nitric Oxide. - 2006. - Vol. 15. - P. 177-186.
18. Li M. T-2 toxin impairs murine immune response to respiratory reovirus and exacerbates viral bronchiolitis. M. Li, J.R. Harkema, Z. Islam, C.F. Cuff, J.J. Pestka // Toxicology and Applied Pharmacolo-gy - 2006. - Vol. 217. - P 76-85. -doi:10.1016/j.taap.2006.08.007.
19. Meissonnier G.M. Subclinical doses of T-2 toxin impair acquired immune response and liver cytochrome P450 in pigs / G.M. Meissonnier, J. Laffitte, I. Raymond, E. Benoit, A.-M. Cossalter, P Pinton, G. Bertin, I.P Oswald, P Galtier / Toxicology - 2008. - Vol. 247. - P. 46-54. - doi:10.1016/j.tox.2008.02.003.
20. Oswald I.P Immunotoxicological risk of mycotoxins for domestic animals / Oswald I.P., D.E. Marin, S. Bouhet, P Pinton, I. Taranu, F. Accensi // Food Additives & Contaminants - 2005. - Vol. 22 (4). - P. 354-360. - doi:10.1080/02652030 500058320.
21. Vandenbroucke V. Double trouble: interactions between deoxynivalenol and the pathogenesis of Salmonella typhimurium infections in pigs / V. Vandenbroucke. - Merelbeke: Ghent University. Faculty of Veterinary Medicine, 2012. - 166 p.
22. Vandenbroucke V. The mycotoxin deoxynivalenol potentiates intestinal inflammation by Salmonella typhimurium in porcine ileal loops / V. Vandenbroucke,S. Croubels, A. Martel, E. Verbrugghe, J. Goossens, K. Van Deun, F Boyen, A. Thompson, N. Shearer, P. De Backer, F. Haesebrouck, F. Pasmans// PLoS ONE- 2011. - Vol. 6 (8). - P. 1-8. - doi: 10.1371/journal.pone.0023871.
23. Viryasova G.M. Regulation of 5-oxo-ETE synthesis by nitric oxide in human polymorphonuclear leucocytes upon their interaction with zymosan and Salmonella typhimurium. G.M. Viryasova, S.I. Galkina, T.V. Gaponova, J.M. Romanova, G.F Sud’ina // Bioscience Reports - 2014. - Vol. 34 (3). - e00108. - doi: 10.1042/ BSR20130136.

Резюме. В эксперименте на белых крысах авторами изучено влияние Т-2 токсина и Salmonella chole^ suis на функциональную активность нейтрофилов и систему оксида азота. Опыты проведены на половозрелых беспородных белых крысах. Было подобрано 6 групп животных (n=12). На 7 сутки в крови определяли фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН), фагоцитарное число (ФЧ), фагоцитарный индекс (ФИ), спонтанный (сНСТ) и стимулированный (стНСТ) НСТ-тест, в плазме крови содержание стабильных метаболитов оксида азота (NOx). Заражение сальмонеллами вызвало резкое возрастание продукции оксида азота (в 19,6 раза), еще более выраженное при инфицировании животных на фоне Т-2 токсикоза (140 и 560 мкг/кг), что связано как с токсическим повреждением печени, так и с развитием бактериальной инфекции. Проведенный корреляционный анализ показал, что при заражении животных сальмонеллами на фоне подострой интоксикации в дозах 140 и 560 мг/кг между ФИ и накоплением стабильных метаболитов оксида азота в плазме крови имеет место обратная зависимость (R=-0,81 и R=-0,83 при р<0,05), свидетельствующая об угнетающем действии избыточных концентраций NOx в крови на поглотительную и переваривающую способность фагоцитов. Результаты исследований раскрывают патогенетические механизмы нарушений иммунного статуса животных при Т-2 токсикозе и сальмонеллезе и свидетельствуют о необходимости снижения негативного воздействия на их организм токсикантов и антигенного прессинга циркулирующих на промышленных комплексах потенциально патогенных микроорганизмов.

Ключевые слова: Т-2 токсикоз, белые крысы, инфицирование, сальмонеллез, интоксикация, плазма крови, нейтрофилы, фагоцитоз, оксид азота, метаболит.

Сведения об авторах:

Шабунин Сергей Викторович, доктор ветеринарных наук, профессор, академик РАН, директор ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармаколо-гии и терапии Россельхозакаде-мии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114 б; тел. 8-473-2539354; e-mail: vnivipat@mail.ru.

Шахов Алексей Гаврилович, доктор ветеринарных наук, профессор, член-корреспондент РАН, главный научный сотрудник отдела экспериментальной терапии ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Россельхозакадемии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114 б; тел. 8-473-2539354; e-mail: a.g.shakhov@mail.ru.

Сашнина Лариса Юрьевна, доктор ветеринарных наук, заведующая лабораторией экологического мониторинга ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Россельхоз-академии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114 б; тел. 8-473-2539354; e-mail: l.yu.sashnina@mail.ru.

Востроилова Галина Анатольевна, доктор биологических наук, заведующая отделом фармакологии ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Россельхозакаде-мии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114 б; тел. 8-473-2539354; e-mail: gvostroilova@mail.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Черницкий Антон Евгеньевич, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник сектора диагностического мониторинга лаборатории болезней органов воспроизводства и молочной железы ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Россельхозакадемии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б; тел. 8-952-1009545; e-mail: cherae@mail.ru.

	Полезные ссылки
Департамент ветеринарии Краснодарского края Ассоциация Практикующих Ветеринарных Врачей