Место энзоотической пневмонии свиней в нозопрофиле инфекционной патологии свиней в Ростовской области

С.Н. Карташов, А.Г. Ключников, А.И. Бутенков,
А.Н. Тазаян ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии

Инфекционная патология свиней в Ростовской об­ласти представлена, в основном, бактериальными заболеваниями (52,8% от общей инфекционной пато­логии). По распространенности инфекций свиней микоплазмоз занимает 1-е место (20,9% соответственно). Комплекс исследо­ваний функционального состояния гуморального и клеточного иммунитета у 4-5 месячных поросят, больных энзоотической пневмонией, вызванной М. Нуорпеитогнае, выявил резкое снижение количества В-лимфоцитов, а также нарастающее снижение общего числа Т-лимфоцитов и отдельных популяций Р0К(р-Р0К и в-РОК), что, по всей видимости, отражают наруше­ние лимфопоэза, а также перераспределение клеток и измене­ние регуляторного потенциала лимфоидных тканей у заболев­ших животных.

Актуальность темы. Из заболеваний свиней, причиной которых являются микоплазмы, следует назвать энзоотичес­кую пневмонию, полисерозиты, артриты, метриты и маститы. Хотя этиологическая роль микоплазм при некоторых заболева­ниях, и том числе и при атрофическом рините свиней многими исследователями не подтверждена, тем не менее, большинс­тво авторов считают, что микоплазмы при этих патологиях играют большую, если не ведущую роль [1, 3]. В последние годы в мировой литературе появляется все больше сообще­ний, свидетельствующих о том, что различные виды микоп­лазм могут вызывать самостоятельные заболевания свиней. В настоящее время от свиней выделено несколько различных видов микоплазм [2, 4, 6]. Энзоотическая пневмония у сви­ней, вызванная М. пуорпеитогпае, широко распространена и представляется как одна из экономически важных болез­ней свиней. Как указывает 1 Заггас!е11 (2003), у 75% убойных свиней находят очаги пневмонии, характерные для энзооти­ческой пневмонии. Заболеваемость в отдельных хозяйствах может достигать 100%, однако смертность, которая наблюда­ется среди 3-6-недельных поросят, колеблется от 0,5 до 20%. Отмечается резкая задержка роста и развития поросят [3, 5]. В связи с отсутствием типичных симптомов болезни распозна­вание ее весьма затруднительно, в литературе мало данных по морфологическим особенностям этого заболевания и им­мунный статус животных при этом заболевании не изучен, что и определило цель наших исследований.

Цели исследования. Выяснить эпизоотическую ситуацию по энзоотической пневмонии свиней в Ростовской области, изучить иммунологический статус при разной степени выра­женности заболевания.

Материалы и методы. Работу выполняли с 2006 по 2008 гг. в лаборатории функциональной диагностики болезней сель­скохозяйственных животных и лаборатории болезней свиней ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии, Ростовской областной ве­теринарной лаборатории, а также в хозяйствах Ростовской об­ласти.

Для определения роли и места М. пуорпеитогпае в ин­фекционной патологии свиней в условиях Ростовской области нами изучен нозологический профиль, удельный вес, географи­ческое распространение и годовая динамика инфекционных заболеваний свиней в Ростовской области.

Диагностику энзоотической пневмонии проводили ГУРО "Областная ветеринарная лаборатория" с помощью тест-систе­мы для выявления ДНК возбудителя в патологическом матери­але методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР) с электрофо-ретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле, а также определяли наличие специфических антител к возбудителю энзоотической пневмонии в сыворотке крови ме­тодом ИФА.

Статистическую обработку результатов исследований про­водили по Н.А. Плохинскому (1970), Хитоси Кумэ (1990) с ис­пользованием компьютерной техники. Опыты по определению иммунологического статуса больных поросят проводили на 3-х группах поросят по 20 голов в каждой. Группы формировались по принципу пар-аналогов. Первая группа, контрольная, вклю­чала клинически здоровых животных без признаков заболе­вания. Во вторую опытную группу были включены животные с первой стадией заболевания заболевания, у которых отме­чался кашель, но был сохранен аппетит. Третья опытная группа животных, включала поросят со второй стадией заболевания, характеризующейся кашлем, тяжелой одышкой, адинамией, анорексией. Определение концентрации сывороточных имму­ноглобулинов проводили с помощью реакции Манчини. Опре­деление количества Т - лимфоцитов и их субпопуляций прово­дили методом розеткообразования — Е-РОК, тимусзависимые Т-лимфоциты имеют рецепторы для эритроцитов барана, кото­рые выступают, таким образом, специфическим маркером для их распознавания (Е-РОК: Егу1пгосут.е — розеткообразующие клетки). Выявляли 2 субпопуляции: теофиллинчувствительные Т-лимфоциты (Т-супрессоры), утратившие способность к ро-зеткообразованию под влиянием обработки теофиллином, и теофиллинустойчивые Т-клетки (Т-хелперы) лимфоциты, такую способность сохранившие.

Результаты исследований. За период с 2006 по 2008 гг. в хозяйствах Ростовской области осмотру подвергнуто 6481 свиней. Из них у 22% выявлена инфекционная патология. За подопытными животными было установлено постоянное клини­ческое наблюдение, при этом учитывали процент заболевае­мости, выздоровления и падежа. Ежедневно проводили клини­ческое обследование поросят, а лабораторные исследования проводили при первичном и повторном осмотрах и при выздо­ровлении.

Для изучения эпизоотической ситуации по энзоотической пневмонии было проведено обследование поголовья свиней в 14 хозяйствах Ростовской области, проанализированы резуль­таты лабораторных исследований ГУРО "Ростовская областная ветеринарная лаборатория" и лаборатории болезней свиней ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии.

Ростовская область представляет собой зону со сложной эпизоотической обстановкой по инфекционным болезням. В хозяйствах региона ежегодно переболевают инфекционными болезнями от 40 до 95% поросят. Из общего количества павших поросят в 2005-2008 годах гибель их от респираторных болез­ней составила 41,7%.

Мы провели ретроспективный анализ уровня заболе­ваемости свиней инфекционными болезнями в Ростовской области за период 2004-2008 г. Изучали удельный вес микоплазменной инфекции в сравнительном аспекте и в ди­намике. В результате выделены следующие нозологические единицы (рис. 1,2).

Рис.1. Удельный вес энзоотической пневмонии в инфецкионной патологии свиней в Ростовской области в период с 2004 по 2008 годы

Рис.2. Нозологический профиль инфекционной патологии свиней в Ростовской области в 2006-2008 г.

Пик заболеваемости свиней энзоотической пневмонией приходится на конец зимы - начало весны (рисунок 3), что, по-видимому, связано со снижением иммунного статуса свиней на фоне гиповитамонозов, снижения качества комбикормов в зимнее-весенний период.

Рис. 3. Динамика заболеваемости поросят энзоотической пневмонией в Ростовской области (по горизонтали - месяцы, по верти­кали - количество животных).

Такую динамику можно объяснить и резкими изменени­ями климатических факторов, которые приводят к манифеста­ции инфекции при наличии возбудителя в организме.

Кроме того, мы провели анализ распространения ас­социативных болезней у свиней при энзоотической пнев­монии в Ростовской области в 2008 г (рисунок 4). Наряду с энзоотической пневмонией из 96 клинически больных поросят у 14 (14,6%) из них зарегистрирован репродуктив-но-респираторный синдром (РРСС), по 8 случаев (8,33%) приходилось на микоплазмоз и микоплазмоз с репродуктивно-респираторным синдромом соответственно.

Таблица 1. Нозологический профиль инфекционной патологии свиней в Ростовской области за 2004-2008 гг.

Нозологическая единица	Исследовано животных	Заболев­ших	%
Микоплазмоз	145	30	20,7%
ЦВИС-2	139	20	14,4%
РРСС	181	41	11,4%
Колибактериоз	316	36	11,4%
ПВИС	392	36	9,2%
Пастереллез	845	65	7,7%
Энзоотическая пневмония	87	5	5,7%
Рожа	478	26	5,44%
Сальмонеллез	1583	78	4,93%
Трансмиссивный ГЭ	142	40	2,81%
Прочие бак. исследования	83	2	2,42%
Псевдомоноз	63	1	1,59%
Гемофилезный полисерозит	158	2	1,27%
Стрептококкоз	84	2	0,69%
Ротавирусная инфекция	294	1	0,34%
Ауески болезнь	2	0	0,01%
Всего	4674	349	100%

У 16 (16,7%) поросят цирковирусной инфекции сопутствовала бактериальная пневмония, а у 6 (6,3%) поросят мы наблю­дали стрептококкоз. Выявлено только 5 случаев (5,21%), когда энзоотическая пневмония был обнаружен без при­сутствия других возбудителей.

Таким образом, наиболее часто респира­торному микоплазмозу сопутствует пастереллез (28,1%), ЦВИС (16,7%) и РРСС (14,6%)

При анализе данных, полученных в резуль­тате бактериологического исследования поро­сят, у которых энзоотическая пневмония сопро­вождалась септицемией, было установлено, что в 2-х случаях выделен НеаторпИиз рагазцпз, по 3 случая приходилось на Е. СоП и За1топе11а зр. и в 5 случаях был выделен 31герт.ососсиз зцпз. Таким образом, бактериальная септицемия выявлена у 9% поросят с признаками микоп-лазмоза.

В результате анализа заболеваемости поро­сят энзоотической пневмонией в зависимости от возраста установлено, что из 360 поросят, у кото­рых возбудитель был выделен методом ПЦР, 131 голов (36,4%) были 10-15 недельного возраста, 100 голов - в возрасте 15-20 недель (27,8%), 86 голов - в возрас­те 5-10 недель (23,9%). Пик сероконверсии приходился на возраст 8-18 недель.

Динамика заболеваемости, смертности и летальности при энзоотической пневмонии в Ростовской области была проана­лизирована за 2007-2008 годы (таблица 2).

Таблица 2. Динамика заболеваемости, смертности и летальности при энзоотической пневмонии свиней

Год	Восприимчивость животных, гол	Заболело, гол	Пало, гол	Заболеваемость на 1000 голов	Смертность на 1000 голов	Летальность, %
2007	1250	973	348	778,4	278,4	35,77%
2008	975	863	339	885,1	347,7	39,28%

В 2007 году смертность от энзоотической пневмонии со­ставила 278,4 голов на 1000 восприимчивых свиней при ле­тальности 35,77%. В 2008 году эти показатели существенно не изменились - смерность составила 347,7 голов на 1000 вос­приимчивых животных, а летальность - 39,28%.

Установлено, что у поросят первой опытной группы отмечается снижение общего числа лейкоцитов перифери­ческой крови, что, кроме того, сопровождается выраженной лимфопенией. У больных животных развивалась выраженная лейкопения и лимфопения, количество Т-лимфоцитов перифе­рической крови снизилось до 29,1 ± 1,4% в первой стадии заболевания и увеличилось до 68,6 ± 1,2% во второй стадии заболевания. Однако, на фоне лимфопении абсолютное зна­чение лимфоцитов снизилось до 0,69±0,038хЮ9/л в первой стадии заболевания и до 0,43±0,05*109/л во второй стадии заболевания. Соотношение Т-хелперов кТ-супрессорам также изменялось, и по мере развития заболевания снижалось с 2,17 до 1,58 (табл. 3).

Таблица 3. Показатели клеточного иммунитета периферической крови

Группа животных	Т-лимфоциты, %
	Т-лимфоциты		Т-хелперы,		Т-супрессоры		Тх/Тс
	%	х109/л	%	х109/л	%	х109/л
контрольная	48,7±0,4	1,38 ±0,04	27,8±0,8	0,41±0,01	12,5±0,4	0,18±0,011	2,17
первая опытная (n=20)	29,1±1,4**	0,69±0,038	15,91±0,8**	0,11±0,013	9,32±0,5**	0,064±0,031	1,65
вторая опытная (n=20)	68,6±1,2***	0,43±0,05	11,83±0,8***	0,04±0,019	7,19±0,6***	0,031±0,011	1,58
*p<0,05,** р<0,01,***р<0,001, в сравнении со здоровыми животными

Все эти изменения — снижение общего числа Т-лимфо-цитов и отдельных популяций РОК, снижение их соотношения (р-РОК и в-РОК) — по всей видимости, отражают нарушение лимфопоэза и перераспределение клеток, а также изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей по мере разви­тия энзоотической пневмонии. Из теории общей иммунологии [3], выраженное снижение количества Т-лимфоцитов по отно­шению к здоровым животным сопровождается снижением кле­точного иммунитета, что влечет за собой падение резистентнос-тии, в первую очередь, к вирусным инфекциям [2].

Результаты определения относительного и абсолютного со­держания В-лимфоцитов у поросят в возрасте 3-6 недель, боль­ных энзоотической пневмонией представлены в таблице 4.

Таблица 4. Показатели гуморального иммунитета периферической крови

Группа животных	В-лимфоциты		Иммуноглобулины
	%	х109/л	А, мг/мл	G,мг/мл	М, мг/мл
контрольная (n = 20)	23,6±1,97	0,69±0,04	2,13±0,08	10,9±0,12	1,34±0,2*
первая опытная (n = 20)	13,97±1,89	0,35±0,06*	2,13±0,08*	10,9±0,12	1,4±0,04
вторая опытная  (n=20)	33,46±0,28	0,20±0,06*	1,49±0,03*	11,8±0 11	1,5±0,09
* р< 0,001, в сравнении со здоровыми животными

Анализ показателей, характеризующих гуморальное зве­но иммунитета, выявил, что абсолютное содержание в крови В-лимфоцитов у здоро­вых поросят составило 0,69±0,04х109/л.

При энзоотической пневмонии сви­ней в первой стадии заболевания количес­тво В-лимфоцитов периферической крови снизилось до 13,97 ± 1,89% и увеличилось до 33,46± 0,28% во второй стадии заболе­вания. Но на фоне лимфопении абсолют­ное значение лимфоцитов снизилось до 0,35±0,06хЮ9/л в первой стадии забо­левания, до 0,20±0,06хЮ9/л во второй стадии заболевания. При изучении изменений количества иммуноглобулинов отмечено, что в первой стадии заболева­ния содержание иммуноглобулина-А, С и М не отличается от здоровых животных, но во второй стадии энзоотическом пнев­монии происходит резкое снижение иммуноглобулинов А до 1,49±0,03 мг/мл, что на 30% ниже соответствующих показа­телей у здоровых животных и поросят во второй стадии забо­левания. Уровень иммуноглобулина С и М статистически мало отличался от животных первой и второй опытных групп.

Выводы. Инфекционная патология свиней в Ростовс­кой области представлена, в основном, бактериальными за­болеваниями (52,8% от общей инфекционной патологии). По распространенности инфекций свиней микоплазмоз за­нимает 1-е место (20,9% соответственно). Кроме этого, наиболее часто регистрируют цирковирусную инфекцию - 14,3%, РРСС и колибактериоз - по 11,8%, ПВИС - 8,9%,
пастереллез - 7,5%, энзоотическая пневмония - 5,5%. На долю остальных заболеваний приходилось в сумме18,34%. За период с 2004 по 2008 гг. заболеваемость свиней энзоотической пневмонией составила в среднем 20,92% . При этом, за этот период заболеваемость сви­ней микоплазмозом занимала относительно стабильное значение и варьировала от 23,7% в 2005 году до 37,4%
в 2008 году.

Из 370 поросят, у которых возбудитель был выделен мето­дом ПЦР, 135 голов (35,7%) были 10-15 недельного возраста, 100 голов - в возрасте 15-20 недель (27%), 88 голов - в воз­расте 5-10 недель (23,8%). Пик сероконверсии приходился на возраст 8-18 недель.

Снижение общего числа В-лимфоцитов, Т-лимфоцитов, отдельных фракций иммуноглобулинов и отдельных попу­ляций РОК, снижение их соотношения (р-РОК и в-РОК), по всей видимости, отражают нарушение лимфопоэза, а также изменение регуляторного потенциала лимфоидных тканей по мере развития заболевания. Из теории общей иммунологии известно, что, выраженное снижение количества Т-лимфо­цитов по отношению к здоровым животным сопровождает­ся снижением клеточного иммунитета и это влечет за собой падение резистентности, в первую очередь, к вирусным ин­фекциям [2].

Список использованной литературы:

1. УегсПп Е. 11зе от 1п1егпа1 соп1го1 1п а пезт.ес!-РСР аззау гог Мусор1азта пуорпеитогпае с!ет.ест.юп апс! ^иапт.^т^сат.^оп т 1гаспеоЬгопсЫа1 \л/азЫп§з тгот р|§з. / Е. УегсПп, М. КоЫзсп, 1М. Воуе, М. (Заггпег// Мо1. Се11. РгоЬез., 2000Ь. - уо1. 14. - р. 365-372.
2. Уюса 1 РаНегпз от Мусор1азта пуорпеитогпае 1птест.юпз 1п Ве1§1ап тагго\л/-т.о-т1гпзп р|§з пегс!з \л/Ип сПуеп|тё-соигзе./! Усса, О. Маез, 1_. Тпегтот.е, 1 Рее1егз, Р. НазезЬгоиск // }. Уе1. Мее!., 2002. - уо1. 49. - р. 349-353.
3. Щербаков А. В. Этиологическая структура инфекцион­ных болезней свиней в животноводческих хозяйствах России / А. В. Щербаков, В. Ф. Ковалишин, А. С. Яковлева, Е. В. Шабаева // Актуальные проблемы инфекционной патологии животных.- Владимир, 2003. - с. 146-150.
4. Сорокин М.В. Энзоотическая пневмония свиней и ее специфическая профилактика/ М.В. Сорокину/Рос­сийский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные, 2006. - N° 3. - с. 35-37.
5. Романенко В.Ф. Этиология энзоотической пнев­монии свиней/ В.Ф. Романенко, А.А. Бокун, Н.В. Бабич // Ветеринария, 1988. - Т. 2. - с. 35-37.
6. Пустоваров А.Я. Иммунологическое обоснова­ние диагностики и профилактики энзоотической пневмо­нии, сальмонеллеза и некоторых смешанных инфекций свиней. - М, 1991. - 49 с.

Ключевые слова: энзоотическая пневмония свиней, В-лимфоциты, Т-лимфоциты иммунитет.

Ответственный за переписку с редакцией: Карташов Сергей Николаевич, доктор ветеринар­ных наук, заведующий лабораторией функциональной диагностики болезней сельскохозяйственных животных ГНУ Северо-Кавказский зональный научно-исследова­тельский ветеринарный институт, 16.00.02, 8-909-434-03-03, Ростовское шоссе О, г. Но­вочеркасск.

Ключников Александр Генадьевич, лаборатория фун­кциональной диагностики болезней сельскохозяйственных животных ГНУ Северо-Кавказский зональный научно-иссле­довательский ветеринарный институт, соискатель, 16.00.03, 8-909-434-03-03, Ростовское шоссе О, г. Новочеркасск

Бутенков Александр Иванович, лаборатория функцио­нальной диагностики болезней сельскохозяйственных живот­ных ГНУ Северо-Кавказский зональный научно-исследователь­ский ветеринарный институт, кандидат ветеринарных наук, 16.00.03, 8-909-434-03-03, Ростовское шоссе 0, г. Новочеркасск

Тазаян Артур Ноярович, кафедра эпизоотологии Донского государственного аграрного университета, аспирант, 16.00.03, 8-909-434-03-03, Ростовская обл, п. Персиановский.