УДК 613.5 614.3 614.4
DOI 10.33861/2071-8020-2025-6-42-44
Оригинальное эмпирическое исследование
Ковалевская М. А., Шахова В. Н., Светлакова Е. В., Ожередова Н. А., Дмитриев А. Ф. Федеральное государственное бюджетное
образовательное учреждение высшего образования «Ставропольский государственный аграрный университет»,
Ставропольский край, г. Ставрополь
Аннотация. Проблема гигиены и чистоты имеет первостепенную важность в современном мире. Во многих отраслях гигиена и контроль биозагрязнений имеют важное значение для производства безопасной продукции со стабильными свойствами. Растет международная торговля продукцией, качество которой зависит от соблюдения требований гигиены и чистоты. Провести микробиологический контроль смывов с технологической одежды и смывов рук персонала, допущенных к работе в чистых помещениях. В чистых помещениях использовали метод смыва с поверхности рабочего костюма в четырех местах: по одному смыву с рук, плеч и шлема для определения микробной обсеменённости перчаток и одежды рабочего персонала. Отпечаток пальцев делали на ага-ризованной питательной среде (МПА, агар Сабуро) – оставляли по одному отпечатку каждого пальца, либо же проводили быстрым движением сверху вниз. Далее чашки термостатировали и производили подсчёт колоний - для микробиологического контроля рук персонала. Микробную контаминацию одежды определяли с помощью контактных пластин, которые прикладывали к определенным участкам тела работника, после термостатировали и проводили подсчет. Уровень колониеобразующих единиц на перчатках составлял меньше 1. Это свидетельствует о строгом соблюдении правил гигиены и дезинфекции рук специалистами, работающими в чистых помещениях, включая аппаратчиков и микробиологов. Полученные результаты полностью соответствуют требованиям внутреннего регламента и стандартам GMP, что подтверждает превосходный уровень санитарной безопасности и эффективность принятых санитарных мер.
Ключевые слова: персонал, смывы, микробная контаминация, чистые помещения, технологическая одежда, контроль, GMP.
При эксплуатации чистых помещений выполняется комплекс мер, направленных на непрерывное поддержание заданного класса чистоты. Создание и управление биотехнологическим производством предполагает решение ряда технологических задач, среди которых особое значение имеет микробиологическая чистота. Одной из главных проблем любого биотехнологического производства остается риск микробной контаминации готовой продукции [1, 2].
Персонал является ключевым элементом системы чистого помещения. Если в него входят неподготовленные или неподходящие сотрудники, даже идеально спроектированное и реализованное чистое помещение не сможет полноценно выполнять свои функции. Поэтому для эффективной подготовки персонала необходимо обеспечить наличие достаточного количества помещений с хорошей вентиляцией и соответствующим оборудованием [3, 4].
Зачастую самым первым в контаминации продукта является рабочий персонал. Важно соблюдать всю технологию подготовки персонала перед работой в чистых помещениях класса А, В, С. На руках можно обнаружить разных представителей резидентной и транзиторной микрофлоры кожных покровов, в том числе следующие виды: Staphylococcus epidermidis, S. aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp. и др. Необходимо контролировать гигиену персонала путем отбора проб смывов с рук персонала [5].
Для предотвращения контаминации персонал должен быть одет в спецодежду, носить две пары перчаток, защитную маску и очки, а также убирать волосы. Подготовка технологической одежды для разных классов чистоты проводится отдельно. Подготовка бахил проводится отдельно от остальной одежды. Персонал, осуществляющий подготовку технологической одежды и перчаток, работает в технологической одежде из безворсовой ткани [6].
Чистота производственных помещений является необходимым условием, обеспечивающим реализацию высококачественной продукции, соответствующей критериям надежности и безопасности. При этом необходимо проводить регулярный контроль качества, который заключается в отборе проб, оценке, анализе показателей и оформлении требуемой документации [7, 8].
Целью исследований является проведение микробиологического контроля смывов с технологической одежды и смывов рук персонала, допущенных к работе в чистых помещениях в условиях биофабрики.
Материалы и методы исследований. На территории города Ставрополь находится Федеральное казённое предприятие «Ставропольская биофабрика», которая классифицируется, как предприятие по изготовлению ветеринарных биопрепаратов.
Методы определения микробной контаминации одежды и перчаток персонала. Для определения микробной обсеменённо-сти перчаток и одежды рабочего персонала в чистых помещениях используют метод смыва с поверхности рабочего костюма в четырех местах: по одному смыву с рук, плеч и шлема.
Проводили отбор проб с рук работников в количестве двух аппаратчиков и врача-микробиолога, которые были допущены к работе в чистых помещениях класса А, В.
Пробы отбирались в течение 5 дней, с 20.01.2025 г. по 24.01.2025 г. Питательные среды, на которых высевались пробы – МПА, агар Сабуро.
Для микробиологического контроля рук персонала используют отпечаток пальцев на агаризованной питательной среде. Оставляют по одному отпечатку каждого пальца, либо же проводят быстрым движением сверху вниз. Далее чашки термостатируют и производят подсчёт колоний.
Также микробную контаминацию одежды определяют с помощью контактных пластин, которые прикладывают к определенным участкам тела работника, после подвергают выдержке в термостате и проводят подсчет.
Определение микробной контаминации технологической одежды должно проводиться 2 раза в неделю во время производственного процесса в каждом производственном помещении выборочно у нескольких работников и 1 раз в две недели - непосредственно после стерилизации одежды (при этом контролируется не менее 3-х комплектов из каждой загрузки автоклава).
Таблица 1 Приемлемые критерии микробной контаминации одежды и перчаток персонала
| Класс чистоты | КОЕ/пластина (чашка Петри), перчатка | ||
|---|---|---|---|
| Уровень тревоги | Уровень действия | Предельное значение | |
| А | <1 | <1 | <1 |
| В | 2 | 3 | 5 |
Результаты исследований и их обсуждение. Результаты исследований представлены в таблицах 2, 3, 4, 5, 6.
Таблица 2 Результаты микробиологического исследования смывов с технологической одежды и рук персонала для допуска в класс А, В
| Персонал (класс чистоты – А, В) | Дата проведения – 20.01.2025 | |
|---|---|---|
| Отпечаток перчаток (5 пальцев), КОЕ / перчатка | Контактная пластина с 4-х мест, КОЕ / пластина | |
| Аппаратчик | <1 | 1 |
| Аппаратчик | <1 | 1 |
| Микробиолог | <1 | 1 |
При анализе полученных данных по сравнению с утвержденными допустимыми критериями, представленными в таблице 1, было установлено, что все отобранные пробы полностью соответствуют требованиям.
Таблица 3 Результаты микробиологического исследования смывов с технологической одежды и рук персонала для допуска в класс А, В
| Персонал (класс чистоты – А, В) | Дата проведения – 21.01.2025 | |
|---|---|---|
| Отпечаток перчаток (5 пальцев), КОЕ / перчатка | Контактная пластина с 4-х мест, КОЕ / пластина | |
| Аппаратчик | <1 | <1 |
| Аппаратчик | <1 | 1 |
| Микробиолог | <1 | 1 |
Анализ полученных данных выявил полное соответствие всех отобранных образцов установленным нормативным показателям, указанным в таблице 1.
Таблица 4 Результаты микробиологического исследования смывов с технологической одежды и рук персонала для допуска в класс А, В
| Персонал (класс чистоты – А, В) | Дата проведения – 22.01.2025 | |
|---|---|---|
| Отпечаток перчаток (5 пальцев), КОЕ / перчатка | Контактная пластина с 4-х мест, КОЕ / пластина | |
| Аппаратчик | <1 | <1 |
| Аппаратчик | <1 | <1 |
| Микробиолог | <1 | 1 |
Исследование собранных материалов показало, что каждый образец удовлетворяет всем необходимым стандартам, зафиксированным в таблице 1.
Таблица 5 Результаты микробиологического исследования смывов с технологической одежды и рук персонала для допуска в класс А, В
| Персонал (класс чистоты – А, В) | Дата проведения – 23.01.2025 | |
|---|---|---|
| Отпечаток перчаток (5 пальцев), КОЕ / перчатка | Контактная пластина с 4-х мест, КОЕ / пластина | |
| Аппаратчик | <1 | <1 |
| Аппаратчик | <1 | <1 |
| Микробиолог | <1 | <1 |
Анализ полученных данных, выполненный в сравнении с утвержденными допустимыми критериями, изложенными в таблице 1, показал, что все отобранные пробы полностью соответствуют установленным требованиям.
Таблица 6 Результаты микробиологического исследования смывов с технологической одежды и рук персонала для допуска в класс А, В
| Персонал (класс чистоты – А, В) | Дата проведения – 24.01.2025 | |
|---|---|---|
| Отпечаток перчаток (5 пальцев), КОЕ / перчатка | Контактная пластина с 4-х мест, КОЕ / пластина | |
| Аппаратчик | <1 | 1 |
| Аппаратчик | <1 | 1 |
| Микробиолог | <1 | 1 |
На основании приведённых данных можно сделать вывод, во всех случаях уровень КОЕ на перчатке составляет менее 1. Это свидетельствует о строгом соблюдении правил гигиены и дезинфекции рук специалистами, работающими в чистых помещениях, включая аппаратчиков и микробиологов.
Все показатели полностью соответствуют требованиям внутреннего регламента и стандартам GMP [9], что подтверждает превосходный уровень санитарной безопасности и эффективность принятых санитарных мер. Эти результаты отражают не только правильную организацию процессов, но и высокий уровень дисциплины среди персонала, а также устойчивое соблюдение гигиенических требований.
Одним их ключевых элементов системы эпидемиологического надзора за инфекционными заболеваниями является микробиологический мониторинг контаминации объектов окружающей среды и рук персонала. Согласно действующим нормативным документам, приоритет микробиологического мониторинга смещен в сторону определения и идентификации, прежде всего, патогенов бактериальной природы. Создается необходимость в разработке и внедрении современного метода, позволяющего проводить одномоментную оценку вирусно-бактериальной контаминации [10].
В таких отраслях, как фармацевтика, биотехнологии и производство полупроводников, контроль загрязнения имеет первостепенное значение. Чистые помещения предназначены для минимизации частиц, микробов и других загрязняющих веществ, которые могут поставить под угрозу качество продукции, выход продукции и навредить здоровью человека. Контроль загрязнений направлен на снижение и устранение этих потенциальных рисков, обеспечивая целостность среды чистых помещений. Поддержание строгих мер контроля необходимо не только для соответствия отраслевым нормам, но и для защиты репутации и прибыльности компаний [11, 12, 13].
Хотя необходимость контроля загрязнений в чистых помещениях широко признана, его достижение и поддержание может быть сложной задачей. Чистые помещения представляют собой сложные системы, требующие тщательного внимания к деталям на каждом этапе. Загрязнение может возникать из разных источников, включая персонал, оборудование, процессы и даже саму среду чистых помещений. Решение этих проблем требует комплексного подхода, который включает надлежащее обучение, подходящее оборудование и соблюдение передовых методов [3, 4].
Специальные салфетки для чистых помещений являются бесценными инструментами в борьбе с загрязнением, поскольку они помогают эффективно удалять нежелательные частицы, не оставляя остатков и не нанося ущерба. Выбор правильных салфеток для чистых помещений имеет решающее значение для достижения оптимального контроля загрязнений. Важные факторы, которые следует учитывать при выборе салфеток, включают используемые материалы, форму и размер наконечника, впитывающую способность и общую чистоту. Салфетки из таких материалов, как нейлон, полиэстер или микрофибра, обычно используются в чистых помещениях из-за их низкого выделения частиц и химической совместимости [13, 14].
Впитывающая способность является еще одним критическим фактором при выборе салфеток для чистых помещений, способность впитывать и удерживать жидкости, частицы помогает предотвратить перекрестное загрязнение во время процедур очистки. Салфетки с высокой впитывающей способностью предпочтительны для оптимального контроля загрязнения. Рекомендуется выбирать салфетки, прошедшие специализированные процессы очистки, такие как стирка и упаковка. Эти процессы удаляют загрязняющие вещества, примеси и другие вредные вещества, которые могут поставить под угрозу чистоту салфеток и общую чистоту помещения [14, 15].
Заключение. Контроль смывов с технологической одежды и рук работников, допущенных к работе в чистых помещениях, представляет собой немаловажный этап системы микробиологического мониторинга. Такой подход позволяет оценить соблюдение стандартов гигиены и чистоты персонала, а также минимизировать риски передачи микробных агентов на производственные поверхности и в воздух. При анализе приведённых данных установлено, во всех случаях уровень КОЕ на перчатке составляет менее 1. Это свидетельствует о строгом соблюдении правил гигиены и дезинфекции рук специалистами, работающими в чистых помещениях, включая аппаратчиков и микробиологов.
Список литературы:
1. Aksu F.Y., Altunatmaz S.S., Uran H., Alt?ner D.D. The level hand of staff and microbiological properties food contact surfaces in the hypermarkets. Journal Faculty Veterinary Medicine, Erciyes University. 2017; (14 (1): 17-23.
2. Dumen E., Cetin O., Sezgin F.H. Unlu mamul isletmelerinde temas yuzeylerinin ve aletlerin mikrobiyolojik kirliliginin arast?r?lmas?. Turk Mikrobiyoloji Cemiyeti Dergisi. 2009; (39 (3-4): 108-114.
3. Menekse Bulut, Melek Zor. Swab Analysis, Its Importance and Applications in Personnel Hygiene and Business Sanitation Monitoring. 2021; (4 (1): 57-66.
4. Zapka C., Leff J., Henley J. et al. Comparison of standard culturebased method to culture-independent method for evaluation of hygiene effects on the hand microbiome. mBio. 2017; (8 (2): e00093-17.
5. Larson E. L., Aiello A. E., Gomez-Duarte C. et al. Bioluminescence ATP monitoring as surrogate marker for microbial load on hands and surfaces in the home. Food microbiology. 2003; (20 (6): 735-739.
6. Deaja Sanders, Amy Grunden, Robert C. Dunn. A review of clothing microbiology: the history of clothing and the role of microbes in textiles Biology Letters. 2021; (17 (1).
7. Rawlinson Lena Ciric, Elaine Cloutman-Green. How to carry out microbiological sampling of healthcare environment surfaces? A review of current evidence. Journal of Hospital Infection. 2019; (103 (4): 363-374.
8. Angel L. Salaman-Byron. Limitations of Microbial Environmental Monitoring Methods in Cleanrooms. Janssen Research & Development. 2018.
9. Об утверждении Правил организации производства и контроля качества лекарственных средств. http://minpromtorg.gov.ru/common/ upload/files/docs/Prikaz_Minpromtorga_Rossii_ot_14.06.2013_N_916.rtf
10. Смирнова С. С., Жуйков Н. Н., Егоров И. А. [и др.]. Сравнительный анализ методов отбора проб смывов с объектов внешней среды для оценки вирусно-бактериальной контаминации. Здоровье населения и среда обитания. 2023; (31 (4): 77-84.
11. Aycicek H., Oguz U., Karci K. Compar of lts of TP bioland traditional hygiene swabbing methods for the determinof urface cleanliness at a hospital kitchen. International Journal of Hygiene and Environmental Health. 2006; (209 (2): 203-206.
12. Ipek D. Applicability of Ezine cheese process lines disinfection by new disinfectant formulas: antibiofilm-antiquorum sensing agents. Doctoral Dissertation in Food Science, Canakkale Onsekiz Mart University Graduate School of Natural and Applied Sciences. Canakkale, Turkey. 2017; (166).
13. Jansson L., Akel Y., Eriksson R., Lavander M., Hedman J. Impact swab material on microbial surface sampling. Journal of Microbiological Methods. 2020; (176): 106006.
14. Ravikrishna Satyada, Tim Sandle. European Journal of Parenteral & Pharmaceutical Sciences. Releasing capacity of pre-sterile cotton swabs for discharging sampled microorganisms. 2016; (21 (4): 121-127.
15. Fergus Watson, Sandra Wilks, John Chewins, Bill Keevil. Efficiency and novelty of using environmental swabs for drysurface biofilm recovery. Access Microbiology. 2024; (6): 000664.
Сведения об авторах:
Ковалевская Мария Алексеевна, студент института ветеринарии и биотехнологий ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; e-mail: kov.manya@yandex.ru.
Светлакова Елена Валентиновна, кандидат биологических наук, доцент кафедры эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; e-mail: alenka61219@mail.ru.
Ожередова Надежда Аркадьевна, доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий кафедрой эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; e-mail: ogeredova-sgau@mail.ru.
Дмитриев Анатолий Федорович, доктор биологических наук, профессор, профессор кафедры эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12.
Ответственный за переписку с редакцией: Шахова Валерия Николаевна, доктор биологических наук, доцент, доцент кафедры терапии и фармакологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет»; 300017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12; e-mail: lerik_perev@mail.ru.
Заявленный вклад авторов: рукопись была написана благодаря вкладу всех авторов. Все авторы одобрили окончательную версию рукописи.
Конфликт интересов: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
http://vetkuban.com/num6_202513.html