УДК 619:612.017.1:636.4
DOI 10.33861/2071-8020-2024-6-24-28
Михайлов Е. В., Шабунин Б. В., Некрасов А. В., Хохлова Н. А., Степанов Д. С., Шабанов Д. И., Шутиков В. А. Федеральное государственное
бюджетное научное учреждение «Всероссийский научноисследовательский ветеринарный институт патологии,
фармакологии и терапии», Воронежская область, г. Воронеж
В современном свиноводстве поросята испытывают значительное воздействие патогенных факторов, что существенно увеличивает риски развития заболеваний и негативно сказывается на их росте и развитии. Вирусные инфекции, бактерии и паразиты формируют неблагоприятные условия для нормального функционирования организма животных [1]. Эти факторы не только влияют на здоровье животных, но и ведут к экономическим потерям для производителей, ставя под угрозу стабильность всего отраслевого сектора [2].
Для защиты поросят традиционно применяются вакцины и антибиотики, которые направлены на снижение заболеваемости и смертности [3]. Однако с ростом устойчивости микроорганизмов к антибактериальным препаратам актуальность поиска новых методов повышения общей резистентности поросят становится все более важной [4]. Современные исследования направлены на разработку эффективных стратегий, способствующих укреплению иммунной системы и повышению неспецифической резистентности [5].
Одним из перспективных направлений в этой области является использование витаминных комплексов и рекомбинантных цитокинов [6, 7]. При этом в большом количестве исследований, как отечественных, так и зарубежных авторов, было показано, что применение видоспецифичных цитокинов оказывает положительный эффект на сохранность молодняка, состояние системы неспецифической защиты и актиоксидантной системы [8]. Данные препараты способствуют оптимизации обменных процессов и поддержанию нормальной работы иммунной системы, что может значительно повысить защитные механизмы организма. В частности, препарат Простимул показал положительные результаты в исследованиях на поросятах: Шахов А. Г. и соавторы показали, что его применение способствует как повышению общей резистентности, так и коррекции иммунодефицитов, вызванных технологическим стрессом [7, 9].
Целью работы являлась оценка состояния иммунокомпетентных органов поросят-гипотрофиков на фоне применения видо-спечифичного рекомбинатного интерферона методами иммуногистохимии.
Материалы и методы исследований. Экспериментально-клиническая работа была проведена на базе одного из свиноводческих комплексов Воронежской области в соответствии с требованиями действующих законодательных актов (Директива 2010/63/EU от 22.09.2010, Европейской конвенции (ETS 123), Strasbourg, 1986), а также требований биоэтической комиссии ФГБНУ «ВНИВИПФиТ».
В опыт были подобраны свиноматки 3-4-го опороса и полученный от них приплод. На начальном этапе эксперимента, полученные во время опороса поросята проходили клинический осмотр и взвешивание. Не достигшие 800 г животные были учтены как поросята-гипотрофики, животные свыше 800 г, соответственно, как нормотрофики. До приема молозива был произведен вынужденный убой (по n=5) поросят нормотрофиков и гипотрофиков с последующей эвисцерацией внутренних органов. Тимус, селезенка и паховые лимфатические узлы подвергнуты консервации в 10% формалине для иммуногистохимического исследования.
В последующем поросята были поделены на три группы. Первая группа - поросята-нормотрофики (n=20) служила контролем. Вторая группа - поросята-гипотрофики (n=20), которым дополнительно к основному рациону, выпаивали коровье молозиво в дозировке 2,5 мл на голову в течение 3 дней, третья группа - по-росята-гипотрофики (n=20), которым парентерально применяли рекомбинантный видоспецифичный интерферон Простимул двукратно в первый и третий дни жизни в дозе 0,1 мл/кг массы тела.
В возрасте 7, 14 и 21, проводили вынужденный убой по 5 животных, у которых был отобран биологический материал (тимус, селезенка, паховые лимфатические узлы) для иммуногистохимического исследования (ИМГХ).
Для ИМГХ использовали коммерческие моноклональные антитела (МКАТ) к кластеру дифференцировки Ki-67, CD-3 и PAX-5 (производство Novo Castra, Великобритания).
Материал для иммуногистохимического исследования фиксировали 10% нейтральным забуференным формалином в течение 24 ч, выполняли стандартную проводку. Подготовленные образцы тканей заливали в парафиновую среду «Histomix», готовили срезы толщиной 4 мкм, которые наносили на высокоадгезивные стекла и высушивали при температуре 37°С в течение 18 ч. Демаскировку и иммуногистохимическую окраску проводили ручным способом с использованием системы визуализации NovoLink polymer (Novo Castra, Великобритания). Контролем реакции служила неиммунизированная сыворотка.
Статистическую обработку проводили в EXCEL 2013 с пакетом для анализа данных. Анализ проводился по t-критерию Стьюдента, различия считались достоверными при p<0,05.
Результаты исследований и их обсуждение. В таблице 1 представлены результаты подсчета клеток, положительно окрашенных иммуногистохимическими маркерами. Ki-67 является маркером клеточного деления, и его экспрессия характеризует уровень митотической активности в органах. Как видно из таблицы, уровень митотической активности в тимусе у нормотрофиков (рисунок 1 д) был на 9,4% выше (p<0,05) чем у гипотрофиков. Мембранная экспрессия CD-3 клеток в тимусе статистически достоверных различий не имела (рисунок 1 б). В селезенке (рисунок 1 а, г), аналогично кишечнику, уровень митотической активности был одинаковым, а в лимфоузлах (рисунок 1 в, е) у нормотро-фиков он был на 12% выше (p<0,05). Исследование экспрессии CD-3 также выявило достоверные различия в экспрессии в селезенке. Так, у поросят-нормотрофиков количество клеток, положительно окрашенных данным маркером было достоверно выше, чем у гипотрофиков на 12,0% (p<0,05). Кроме того количество PAX-5 позитивно окрашенных клеток в лимфоузлах поросят-нор-мотрофиков также было на 12,9% (p<0,05) выше. Таким образом, проведенными иммуногистохимическими исследованиями было показано, что у поросят-гипотрофиков отмечается депрессия иммунной системы, что проявляется в гипоплазии Т-лимфоцитов в селезенке, В-лимфоцитов в лимфоузлах. Также отмечена депрессия митотической активности в тимусе и лимфоузлах.
Таблица 1 Результаты подсчета иммунокомпетентных клеток у поросят до начала эксперимента
|
| Тимус | Селезёнка | Лимфоузлы |
|---|---|---|---|
| Поросята-гипотрофики | |||
| Ki-67 | 85,0 ± 1,30 | 59,7 ± 2,43 | 50,1 ± 1,92 |
| CD-3+ | 95,7 ± 2,43 | 51,0 ± 1,34 | 24,8 ± 1,04 |
| PAX-5 | 3,77 ± 1,39 | 22,0 ± 1,22 | 201,3 ± 3,04 |
| Поросята-нормотрофики | |||
| Ki-67 | 91,3 ± 1,74* | 60,1 ± 2,71 | 56,5 ± 1,83* |
| CD-3+ | 95,6 ± 2,64 | 56,2 ± 1,33* | 25,4 ± 0,76 |
| PAX-5 | 3,44 ± 1,58 | 21,3 ± 1,41 | 227,2 ± 13,2* |
Примечание: * - p<0,05 по сравнению с гипотрофиками
Рис. 1. Иммуногистохимическое исследование органов поросят до начала опыта: а - селезенка поросят гипотрофиков маркер Ki-67 (х100); б - тимус поросят-гипотрофиков маркер CD-3+ (х200); в - лимфоузлы поросят-гипо-трофиков маркер PAX-5 (х200); г - селезенка поросят-нормотрофиков маркер CD-3 (х100); д - тимус поросят-нормотрофиков маркер Ki-67 (х200); е - лимфоузлы поросят-нормотрофиков маркер PAX-5 (х200)
Иммуногистохимическое исследование через 7 дней после начала эксперимента (табл. 2) показало, что применение как Простимула, так и молозива, оказали положительный эффект на иммунокомпетентные органы поросят-гипотрофиков. В тимусе было показано достоверное увеличение количества Кь67клеток в группе 3 относительно группы 1 на 5,8% (p<0,05) (рисунок 2 а). У поросят группы 2 данный показатель был на 1,6% выше, чем в группе 1, и на 4,1% ниже, чем в группе 3. В селезенке митотическая активность в группе 1 была на 4,0% выше, чем в группах 2 и 3. А в лимфоузлах самая высокая активность была в группе 3, однако, различия составили 3,1% и 5,3% относительно групп 2 и 1, соответственно. Подсчет CD-3+ клеток показал наибольшее количество в группе 1, различия составили 2,1% относительно групп 2 и 3. В селезенке в группе 3 был самый высокий уровень CD-3+ клеток (рисунок 2 б), разница составила 11,1% (p<0,05) и 9,0% относительно группы 1 и 2 (рисунок 2 в), соответственно. В лимфоузлах разница в клеточной экспрессии CD-3+ была менее 2,0% (рисунок 1 д). Подсчет PAX-5 клеток показал наибольшую клеточную экспрессию в группе 3 (рисунок 2 е), где она была выше на 53,0% (p<0,01) и 6,7% относительно группы 1 и 2 (рисунок 2 г, д). Наиболее выраженная разница PAX-5 клеток была отмечена в лимфоузлах, между группой 1 и 3 разница составила 20,2% (p<0,05), между 2 и 3 - 6,1% (p<0,05), между 1 и 2 - 13,8% (p<0,05).
Таблица 2 Результаты подсчета иммунокомпетентных клеток у поросят через 7 дней
|
| Тимус | Селезёнка | Лимфоузлы |
|---|---|---|---|
| Поросята-нормотрофики (группа 1) | |||
| Ki-67 | 92,7±0,82 (3) | 59,7±1,20 | 56,3±3,01 |
| CD-3+ | 97,0±0,54 | 43,6±1,54 (3) | 31,3±1,71 |
| PAX-5 | 4,1±0,60 (3) | 15,3±1,23 | 216,4±6,27 (2, 3) |
| Поросята-гипотрофики + молозиво (группа 2) | |||
| Ki-67 | 94,2±0,84 | 57,4±1,14 | 57,5±3,51 |
| CD-3+ | 95,4±0,62 | 44,3±1,35 | 32,3±2,19 |
| PAX-5 | 5,9±0,44 | 19,1±0,77 | 246,4±7,24 (1, 3) |
| Поросята-гипотрофики + Простимул (группа 3) | |||
| Ki-67 | 98,1±0,61 (1) | 57,2±1,07 | 59,3±4,03 |
| CD-3+ | 95,6±0,76 | 48,4±0,84 (1) | 31,6±2,14 |
| PAX-5 | 6,3±0,38 (1) | 18,7±1,31 | 259,1±8,33 (1, 2) |
Примечание: 1 - p<0,05 по отношению к группе 1; 2 - p<0,05 по отношению к группе 2; 3 - p<0,05 по отношению к группе 3
Рис. 2. Иммуногистохимическое исследование органов поросят на 7-е сутки опыта: а - тимус поросят группы 1, маркер Ki-67 (х400); б - селезенка поросят группы 3, маркер CD-3+ (х100); в - селезенка поросят группы 2, маркер CD-3+ (х100); г - лимфоузлы поросят группы 1, маркер PAX-5 (х200); д - лимфоузлы поросят группы 2, маркер PAX-5 (х100); е - лимфоузлы поросят группы 3, маркер PAX-5 (х200)
На 14-е сутки проведения опыта было показано (табл. 3), что у поросят групп 2 и 3 количество клеток, экспрессирующих Ki-67, было на 3,1% и на 3,8% больше, чем в группе 1 в тимусе (рисунок 3 а, б). В экспрессии CD-3+ в вилочковой железе достоверные различия были между группами 1 и 3, и составили 3,2%. РАХ-5-по-зитивные клетки в тимусе встречались в единичном количестве. В селезенке экспрессия Ki-67 (рисунок 3 г) была самой низкой в группе 2 и составила 52,4 клетки в поле зрения, что меньше, чем в группах 1 и 3 (рисунок 3 в, д) на 4,9% и 6,3%, соответственно. Также у поросят, которые получали молозиво, экспрессия CD-3+ в селезенке была ниже, чем у нормотрофиков и получавших Простимул на 5,9% и 4,5%, соответственно. Уровень экспрессии PAX-5 в группе 3 был выше, чем в группах 2 и 1 на 5,6% и 4,2%. В лимфоузлах количество Ki-67-положительных клеток было самым большим у поросят, получавших молозиво, а самым низким - у нормотрофиков. Так, в группе 1 количество Ki-67+ клеток было меньше, чем в группе 2, на 4,3%. Разница между группами 1 и 3 составила 2,9%, а между 2 и 3 - 1,3%, при этом различия не были статистически значимыми. Экспрессия CD-3+ в лимфоузлах в группе 1 была выше, чем в группах 2 и 3 на 9,3% и на 12,2%, соответственно. Количество PAX-5 позитивных клеток в группе 3 было выше, чем в группах 1 (рисунок 3 е) и 2 на 11,2% и 7,2%, соответственно, однако различия не были достоверными.
Таблица 3 Результаты подсчета иммунокомпетентных клеток у поросят через 14 дней
|
| Тимус | Селезёнка | Лимфоузлы |
|---|---|---|---|
| Поросята-нормотрофики (группа 1) | |||
| Ki-67 | 93,8±0,90 (2, 3) | 55,0±0,83 (2) | 43,6±0,83 (2) |
| CD-3+ | 94,7±0,42(3) | 46,1±0,79 (2) | 37,5±1,18 (2, 3) |
| PAX-5 | - | 53,8±0,72 | 34,5±1,66 |
| Поросята-гипотрофики + молозиво (группа 2) | |||
| Ki-67 | 96,8±0,38 (1) | 52,4±0,87 (1, 3) | 45,5±0,77 (1) |
| CD-3+ | 95,2±0,66 | 43,5±0,58(1, 3) | 34,3±0,91 (1) |
| PAX-5 | - | 53,1±0,87 | 35,8±0,82 |
| Поросята-гипотрофики + Простимул (группа 3) | |||
| Ki-67 | 97,4±0,54(1) | 55,7±0,74 (2) | 44,9±0,91 |
| CD-3+ | 97,7±0,44 (1) | 45,5±0,71 (2) | 33,4±1,28 (1) |
| PAX-5 | - | 56,1±1,0 (1,2) | 38,4±1,75 |
Примечание: 1 - p<0,05 по отношению к группе 1; 2 - p<0,05 по отношению к группе 2; 3 - p<0,05 по отношению к группе 3
Рис. 3. Иммуногистохимическое исследование органов поросят на 14-е сутки опыта: а - тимус поросят группы 1, маркер Ki-67 (*400); б - тимус поросят группы 3, маркер Ki-67 (*400); в - селезенка поросят группы 1, маркер Ki-67 (*100); г - селезенка поросят группы 2, маркер Ki-67 (*100); д - селезенка поросят группы 3, маркер Ki-67 (*100); е - лимо-фузлы поросят группы 1, маркер PAX-5 (*100)
Из таблицы 4 видно, что на 21 сутки эксперимента разница в количестве Ki-67-позитивных клеток в тимусе во всех группах находилась на одинаковом уровне и различалась менее, чем на 1%. Аналогично количество клеток, экспрессирующих CD-3, также различалось между группами менее, чем на 1%. PAX-5 позитивные клетки в тимусе визуализировались в единичном количестве. В селезенке же наибольшее количество Ki-67 положительных клеток было отмечено в группе поросят, которым применяли Простимул, где оно было на 6,4% (p<0,05) и 5,4% (p<0,05) выше, чем в группе, в которой использовалось коровье молозиво, и группой нормотрофиков. Количество CD-3+ лимфоцитов в селезенке (рисунок 4 а, б) в группе нор- мотрофиков было меньше, чем в группе, которым применяли молозиво и Простимул на 4,6%. Экспрессия PAX-5 в селезенке была наибольшей в группе 3, однако различия между группами были менее 2% и не были статистически значимыми. При исследовании экспрессии Ki-67 в лимфоузлах, было отмечено, что наибольшее количество положительных клеток было в группе 3 (рисунок 4 в). Так, разница составила 8,1% (p<0,05) и 24,1% (p<0,05) относительно поросят, получавших молозиво, и поросят-нормотрофиков, соответственно. При этом также была отмечена достоверная разница между группами 1 и 2, которая составила 14,7%. При исследовании маркера CD-3 в лимфоузлах (рисунок 4 г, д) были получены аналогичные результаты. Так, в группе 1 количество позитивных клеток было меньше, чем в группе 2 и 3 на 10,4% и 24,3%, соответственно. А между группами 2 и 3 разница составила 12,6% в пользу группы 3. В лимфоузлах экспрессия гена PAX-5 в группе нор-мотрофиков (рисунок 4 е) была ниже, чем в группах 2 и 3 на 13,0% и 35,0%. При этом разница в экспрессии PAX-5 между поросятами, получавшими молозиво и Простимул составила 19,2%.
Таблица 4 Результаты подсчета иммунокомпетентных клеток у поросят через 21 дней
|
| Тимус | Селезёнка | Лимфоузлы |
|---|---|---|---|
| Поросята-нормотрофики (группа 1) | |||
| Ki-67 | 96,2±0,46 | 64,3±1,12 (3) | 50,3±2,25 (2, 3) |
| CD-3 | 95,8±0,38 | 52,2±0,51 (1, 3) | 50,9±1,66 (2, 3) |
| PAX-5 | - | 49,2±1,36 | 40,3±1,39 (2, 3) |
| Поросята-гипотрофики + молозиво (группа 2) | |||
| Ki-67 | 95,6±0,74 | 63,7±0,67 (3) | 57,7±1,82 (1, 3) |
| CD-3 | 95,5±0,54 | 54,6±0,67 (1) | 56,2±1,06 (1, 3) |
| PAX-5 | - | 48,8±1,82 | 45,8±1,28 (1, 3) |
| Поросята-гипотрофики + Простимул (группа 3) | |||
| Ki-67 | 95,3±0,78 | 67,8±0,41 (1, 2) | 62,4±1,64 (2, 3) |
| CD-3 | 95,1±0,82 | 54,7±0,86 (1) | 63,3±0,73 (1, 2) |
| PAX-5 | - | 50,2±2,00 | 54,8±0,64 (1, 3) |
Примечание: 1 - p<0,05 по отношению к группе 1; 2 - p<0,05 по отношению к группе 2; 3 - p<0,05 по отношению к группе 3
Рис. 4. Иммуногистохимическое исследование органов поросят на 21-е сутки опыта: а - селезенка поросят группы 1 маркер CD-3 (*100); б -селезенка поросят группы 2 маркер CD-3 (*100); в - лимфоузлы поросят группы 1 маркер Ki-67 (*100); г - лимфоузлы поросят группы 2 маркер CD-3 (*100); д - лимфоузлы поросят группы 1 маркер CD-3 (*100); е -лимфоузлы поросят группы 1 маркер PAX-5 (*100)
Таким образом, при гипотрофии у поросят наблюдается частичная дисфункция тимуса, лимфатических узлов и селезенки, которая проявляется снижением митотической активности, а также гипоплазией Т- и В-лимфоцитов. Такие изменения могут сказываться на уровне неспецифической резистентности и гуморальном звене иммунной системы, поэтому их коррекция является необходимым мероприятием для сохранения продуктивности молодняка.
В отличие от гипотрофиков после рождения у поросят нормотрофиков происходит увеличение количества лимфоцитов во вторичных иммунных органах, отмечается увеличение пролиферации иммунокомпетентных клеток, усиление миграции лимфоцитов в слизистые оболочки и периферический лимфоидный пул благодаря воздействию различных антигенных стимулов, например, молекулярных паттернов, ассоциированных с патогенами [10]. Клетки свиней содержат рецепторы различных патогенов, активирующие провоспалительные пути иммунного ответа с помощью таких цитокинов как: IL-1p, IL-2, TNF-a, IFN-a и -y, а также многих других сигнальных молекул, которые влияют на активность, пролиферацию и рекрутинг иммунных клеток [11]. Взаимодействие с антигенами окружающей среды и получение иммунных молекул через молозиво, приводит к появлению прай-мированных Т- и В-клеток, которые в дальнейшем развиваются в эффекторные клетки и клетки памяти, что способствует созреванию адаптивного иммунитета у поросят в постнатальном периоде [10]. Представленные данные могут объяснить выявленное нами иммуномодулирующее действие молозива на поросят-гипотро-фиков (группа 2). Вместе с тем, у свиней с различными патологиями может наблюдаться разбалансировка системы регуляции цитокинов, приводящая к неадекватному иммунному ответу, который может быть скорректирован введением соответствующих цитокинов [12]. Поэтому увеличение числа Т- и В- лимфоцитов в тимусе, селезенке и лимфоузлах поросят-гипотрофиков после введения препарата Простимул, содержащего рекобинантные цитокины типа I может являться свидетельством формирования адаптивной иммунной системы и коррекции иммунодепрессивного состояния. Полученные данные согласуются с результатами исследований, которые показывают увеличение содержания Т- и В- лимфоцитов, а также стимуляцию иммунной системы при введении рекомбинантных ИФН-a и ИФН-y поросятам [13].
Заключение. Проведенные исследования показывают, что применение препарата «Простимул» оказывает положительное влияние на функциональное состояние селезенки, тимуса и лимфоузлов поросят-гипотрофиков, и может быть использован в качестве средства коррекции иммунодефицитных состояний поросят при гипотрофии. Так, на 7-е сутки отмечалось увеличение митотической активности (Ki-67) в тимусе на 5,8% (p<0,05), повышение количества CD-3+ клеток в селезенке на 11,1% (p<0,05) и увеличение PAX-5-лимфоцитов в тимусе на 20,0% (p<0,05) относительно гипотрофиков из группы 2. В конце эксперимента на 21-е сутки было также отмечено увеличение митотической активности в селезенке на 6,4% (p<0,05) и 5,4% (p<0,05) относительно поросят номо- и гипотрофиков (группы 1 и 2). Также отмечено увеличение митотической активности в лимфоузлах на 8,1% (p<0,05) и 24,1% (p<0,05) относительно гипо- и нормотрофиков (группы 2 и 1), соответственно. Применение молозива также оказывало положительный эффект, который проявлялся в увеличении количества PAX-5 лимфоцитов на 13,0% относительно гипотрофиков. В то же время в группе поросят, получавших Простимул разница относительно гипо-трофиков составила 35,0% (p<0,05). Таким образом, введение исследуемого препарата оказывало иммуномодулирующее действие на поросят-гипотрофиков, которое приводило к увеличению пролиферации иммунных клеток в переферических иммунных органах и накоплению в них клеток, несущих маркеры Т- и В-лимфоцитов. При этом эффект от введения препарата Простимул гипотрофикам превосходил действие на иммунные органы молозива.
Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 23-26-00020 «Изучение патогенеза иммунодефицитных состояний у поросят-гипотрофиков постнатального периода развития и фармакокоррекция их иммунного статуса посредством применения видоспецифичных белков на основе рекомбинантных цитокинов с целью повышения продуктивности и сохранности молодняка».
Список литературы:
1. Спиридонов, Г. Н. Этиологическая структура инфекционных болезней поросят-отъемышей в свиноводческих комплексах / Г. Н. Спиридонов, Е. Л. Кузнецова, Н. И. Данилова // Ветеринарная патология. 2003. №. 3. С. 61-62.
2. Савельева, Л. Н. К вопросу о желудочно-кишечных расстройствах у поросят и ущербе, наносимом свиноводству Забайкальского края / Л. Н. Савельева [и др.] // Международный научно-исследовательский журнал. 2016. № 11-2 (53). С. 161-165.
3. Владимирцева, В. В. Антибиотикотерапия поросят в условиях производства / В. В. Владимирцева, В. В. Шитиков // Современные тенденции развития ветеринарной науки и практики. 2021. С. 20-22.
4. Peng Z. et al. Antimicrobial resistance and population genomics of multidrug-resistant Escherichia coli in pig farms in mainland China // Nature communications. 2022. 13. Р. 1116.
5. Владимирова, Ю. Ю. Иммунный статус и цитокиновый профиль у поросят в критические периоды выращивания и их коррекция / Ю. Ю. Владимирова // 2022. 173 с.
6. Применение препарата Простимул для коррекции иммунного статуса поросят при технологическом стрессе / А. Г. Шахов [и др.] // Ученые записки УО ВГАВМ. Т. 57. № 3. 2021. C. 44-49.
7. Интерфероны-a и -у в клинической ветеринарной практике при профилактике и лечении инфекционных заболеваний у крупного рогатого скота и свиней (обзор) / С. В. Шабунин [и др.] // Аграрная наука Евро-Северо-Востока. 2022. № 23 (1). С. 16-35.
8. Ческидова, Л. В. Терапевтическая эффективность препарата простимул у телят с респираторной патологией / Л. В. Ческидова, А. А. Корчагина, И. Е. Бутковой // Ветеринарно-санитарные аспекты качества и безопасности сельскохозяйственной продукции. 2021. С. 472-476.
9. Влияние простимула на иммунный статус, продуктивность и сохранность отставших в росте поросят / А. Г. Шахов [и др.] // Ученые записки учреждения образования Витебская ордена Знак почета государственная академия ветеринарной медицины. 2021. Т. 57. № 2. С. 133-137.
10. Sinkora M. et al. The ontogeny of the porcine immune system. Dev Comp Immunol. 2009. No. 33 (3). Р. 273-283.
11. Mair K. et al. The porcine innate immune system: an update. Dev Comp Immunol. 2014. No. 45 (2). Р. 321-343.
12. Cheng C. et al. Early intervention with faecal microbiota transplantation: an effective means to improve growth performance and the intestinal development of suckling piglets. Animal. 2019. No. 13 (3). Р. 533-541.
13. Shakhov A. G. Correction of cellular immunity with biferon-C in piglets in case ofspecific prevention of circovirosisand mycoplasmosi // E3S Web of Conferences. 2020. P. 02056.
Резюме. Применение препаратов, содержащих рекомбинантные цитокины, может являться перспективным решением для повышения эффективности иммунного ответа поросят и взрослых свиней. Одним из таких лекарственных составов является препарат Простимул, содержащий рекомбинантные видоспецифичные цитокины первого типа и витамины А, Е, С. В ходе экспериментов была проведена оценка состояния иммунокомпетентных органов поросят-гипотрофиков на фоне применения видоспечи-фичного рекомбинатного интерферона методами иммуногистохимии. Были сформированы три группы животных по n=20 в каждой. Группой контроля выступали поросята-нормотрофики (группа 1). В группе 2 поросятам-гипо-трофикам выпаивали коровье молозиво в дозировке 2,5 мл на голову в течение 3 дней. Группой 3 были поросята-гипотрофики, которым парентерально применяли препарат Простимул двукратно в первый и третий дни жизни в дозе 0,1 мл/кг массы тела. До введения препаратов, а также в возрасте 7, 14 и 21 дней, проводили вынужденный убой по 5 животных от группы, у которых был отобран биологический материал (тимус, селезенка, паховые лимфатические узлы) для иммуногистохимического исследования с использованием антител к кластеру дифференцировки Ki-67, CD-3 и PAX-5. В ходе экспериментов в группе 3 на 7-е сутки отмечено увеличение митотической активности (Ki-67) в тимусе на 5,8% (p<0,05), повышение количества CD-3+ клеток в селезенке на 11,1% (p<0,05) и увеличение РАХ-5+-лимфоцитов в тимусе на 20,0% (p<0,05) относительно гипотрофи-ков из группы 2. На 21-е сутки было отмечено увеличение митотической активности в селезенке и лимфоузлах на 5,4% и 8,1% (p<0,05), соответственно относительно поросят-гипотрофиков (группа 2). Проведенные исследования показывают, что применение препарата Простимул оказывает положительное влияние на функциональное состояние селезенки, тимуса и лимфоузлов поросят, и может быть использован в качестве средства коррекции иммунодефицитных состояний поросят при гипотрофии.
Ключевые слова: рекомбинантный интерферон, поросята-гипотро-фики, неонатальный период, иммуногистохимия, иммунные органы.
Сведения об авторах:
Михайлов Евгений Владимирович, кандидат ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б; тел.: 8-910-2448543; e-mail: voronezh81@rambler.ru.
Шабунин Борис Викторович, аспирант, младший научный сотрудник ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б; e-mail: bv.shabunin@gmail.com.
Некрасов Артём Валерьевич, аспирант, младший научный сотрудник ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б; e-mail: artem_artem_nekrasov@inbox.ru.
Степанов Денис Сергеевич, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б; e-mail: gittis@yandex.ru.
Шабанов Дмитрий Игоревич, соискатель, научный сотрудник ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б; e-mail: am7d@mail.ru.
Шутиков Виктор Алексеевич, аспирант, младший научный сотрудник ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б; e-mail: shutikov.02@yandex.ru.
Ответственный за переписку с редакцией: Хохлова Нина Алексеевна, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии; 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114б; тел.: 8-908-1376923; e-mail: nina_xoxlova@mail.ru.
http://vetkuban.com/num6_202407.html