|
|
Александрова С. С. СГАУ им. Н.И. Вавилова., г. Саратов
В условиях современного животноводства, актуальной остается проблема иммунодефицитов животных, особенно молодняка.
Иммунодефицитами считают нарушения нормального иммунологического статуса, обусловленные дефектом одного или нескольких механизмов иммунного ответа. В зависимости от уровня нарушений различают гуморальные клеточные и комбинированные формы иммунодефицитов. По происхождению различают врожденные (первичные), приобретенные (вторичные) и возрастные (физиологические).
Наибольшее практическое значение имеют приобретенные иммунодефицитные состояния [2. 6. 8]. Бактериальные и вирусные инфекции могут быть как следствием, так и причиной вторичных иммунодефицитов. При острых инфекционных заболеваниях, прежде всего, страдает Т-система иммунитета со снижением репродукции Т-хелперов. нарушением дифференцировки популяций, снижением гиперчувствительности замедленного типа. В меньшей степени поражается В-система. При развитии инфекции на фоне уже имевшегося иммунодефицита показатели иммунного статуса снижаются до минимума, заболевание приобретает тяжелое течение с нередким летальным исходом.
Фармакологические вещества так же индуцируют иммуносупрессию. Антибиотики и сульфаниламиды, такие как хлорамфеникол. сульфаметоксипиридазин. клиндамицин. линкомицин. гризеофульвин. интенсивно применяемые при лечении, вызывают дисбактериозы. что также приводит к развитию иммунодефицитов [1].
Иммунодефицитные состояния в совокупности с загрязнением внешней среды микроорганизмами способствует нарушению взаимоотношений между макро- и микроорганизмами, что приводит к развитию различных заболеваний и в частности желудочно-кишечного и респираторного тракта и др. Снижение иммунологической реактивности так же оказывает влияние на эффективность специфической профилактики инфекционных болезней. [6]. Снижается эффективность вакцинирования, что также приводит к дополнительным затратам [9].
Применение современных средств иммунокоррекции в животноводстве позволяет повысить эффект традиционной терапии, значительно снизить заболеваемость и смертность животных, и тем самым уменьшить затраты на лечение и повысить экономическую эффективность производства [6].
В настоящее время существует большое количество иммуно-коррегирующих препаратов, которые по химической структуре и биологическим свойствам можно разделить на несколько групп. В том числе микробного происхождения (продигиозан, пирогенал, Рибомунил, ликопид, бронхомунал, имудон), тимические препараты (т-активин, тимопоэтин, тимоген), костномозговые регуляторы (миелопид и др.), цитокины (лейкинферон, суперлимф), производные нуклеиновых кислот (полудан, инозин, анобекс, метилурацил, натрия нуклеинат, риботан) [7].
Натрия нуклеинат, представляет собой натриевую соль низкомолекулярной РНК. Его активным биологическим компонентом являются нуклеотиды Препарат по своему химическому составу мало чем отличается от эндо - и экзогенных нуклеиновых кислот, обычно присутствующих в организме, в связи с чем, при его приеме моделируются некие естественно возникающие ситуации.
С лечебной целью препараты РНК использовались еще с конца прошлого столетия, и уже в первом десятилетии XX века они ста ли применяться при инфекционных заболеваниях, авитаминозах, нарушениях обмена веществ. Однако скоро об РНК забыли. Интерес к препаратам рибонуклеиновой кислоты в нашей стране снова возник в 70-х годах. Было разрешено применение нуклеината натрия в медицинской практике, а также его промышленное производство в латвийском городе Олайне Однако с распадом СССР НПО "Биолар", где производился препарат, закрылось.
ЗАО "Ветзвероцентр" совместно с ЗАО "Биоамид" разработали новый способ получения субстанции препарата гидролизом хлебопекарских дрожжей Sarcchomyces cerevisiae. Процесс получения препарата стал включать специальную стадию ферментной очистки от белковых примесей, чего ранее не было.
Поданным ряда авторов [4. 6], ранее производимый НПО "Биолар- препарат обладает широким спектром биологической активности. Стимулирует лейкопоэз, процессы регенерации, функциональную активность нейтрофилов, усиливает антиинфекционную устойчивость организма, повышает функциональную активность Т-хелперов и Т-киллеров, пролиферацию клеток и синтез антител, является выраженным индуктором интерферона.
В результате разработки нового способа получения натрия нуклеината встал вопрос о детальном изучении влияния данного препарата на иммунный статус различных видов животных, и в том числе свиней. Нам представилась возможность в полной мере изучить влияние натрия нуклеината производимого ЗАО "Биоамид" на организм свиней, а именно поросят.
Материалы и методы исследования. Эксперимент проводился на поросятах 3 месячного возраста. По принципу аналогов были сформированы 2 группы по 5 голов. Эксперимент продолжался в течение 21 дня. Опытной группе вводили натрия нуклеинат в дозе 1.0 мл 0.2% раствора внутримышечно, на первый день опыта, вторая являлась контрольной. Кровь исследовали в начале эксперимента для получения исходных данных, а также на 7.14 и 21 дни эксперимента. Для этого применяли утвержденные методики по оценке иммунного статуса. После окончания эксперимента провели диагностический убой для выявления морфологических изменений в иммунных органах.
Результаты исследований и обсуждение. Учитывая, что морфологическая структура органов и тканей иммунной системы является важным показателем становления клеточной и гуморальной системы защиты организма, мы посчитали необходимым изучить структуру лимфатических узлов, селезенки, пейеровых бляшек кишечника. Также исследовались печень и мозг для изучения токсического влияния препарата на организм животных.
При гистологическом исследовании в лимфоузлах животных контрольной группы (рис.1) выявлены изменения характерные для иммунодефицитныхсостояний. Отмечена гипоплазия лимфоидной ткани. Фолликулы уменьшены в размере. Нет четкой границы между зонами Т и В лимфоцитов. В центре фолликулов отмечается разрешение клеток. Синусы лимфоузлов расширены, наблюдается отек стромы.
В лимфоузлах животных опытной группы (рис. 2) отмечено увеличение количества лимфофолликулов, в которых наблюдается выраженная гиперплазия. Границы их четкие, хорошо заметны зоны Т и В лимфоцитов. Клетки хорошо воспринимают окраску гематоксилин-эозином. Хроматин ядер окрашен в густой темно-фиолетовый цвет. Это свидетельствует о повышении иммунного статуса под влиянием препарата.
|
В антителообразовании особое значение имеет белая пульпа селезенки. В селезенке животных опытной группы (рис. 3) наблюдается значительное увеличение лимфоидных фолликулов в поле зрения микроскопа. Все они имеют четкую границу. В фолликулах четко видны зоны Т и В лимфоцитов. Клетки лимфофолликулов хорошо восприняли краску и поэтому четко различаются по архитектонике. Среди клеток лимфоидного ряда выявляются крупные клетки - мегакариоциты. Пролиферация клеток захватывает и строму селезенки. Увеличена красная пульпа селезенки в виде повышенного кровенаполнения. Все это говорит об активизации функций селезенки как иммунного органа.
В селезенке животных контрольной группы (рис. 4) большинство фолликулов уменьшены в объеме, их центры находятся в состоянии разрежения, во многих отмечается некроз клеточных элементов переходящий в некробиоз. Это говорит об имму-нодефицитном состоянии.
|
Кишечник, а точнее пейеровы бляшки, расположенные в подслизистом слое играют немаловажную роль в формировании иммунного ответа. У животных опытной группы (рис. 5) видна более четкая структура всех слоев стенки кишечника. Строение железистого аппарата кишечника выражено более четко, чем у поросят контрольной группы. Пейеровы бляшки увеличены в размере, наблюдается усиление процесса гиперплазии. Наряду с этим увеличено количество лимфоидных клеток. Клетки лимфоидного ряда выходят за границы бляшек, скапливается в подслизистом слое кишечника, захватывая и слизистую оболочку. Все эти признаки говорят об усилении иммунных процессов под действием иммуномодулятора.
В кишечнике животных контрольной группы (рис. 6) лимфо-фолликулы не имеют четких границ. Пейеровы бляшки увеличены в размере, наблюдается усиление процесса гиперплазии. Границы их расширены, клетки лимфоидного ряда выходят за границы бляшек, скапливаясь в подслизистом слое кишечника, захватывая и слизистую оболочку.
|
Иммуностимулятор, как и любой лекарственный препарат, помимо положительного влияния не должен оказывать отрицательного действия на организм животного. В связи с этим, мы изучили влияние препарата на такие жизненно-важные органы, как печень и головной мозг.
Структура ткани головного мозга (рис. 7) четко выражена. Встречается пролиферация лимфоидных клеток внутри кровеносных сосудов. В отдельных участках наблюдается пролиферация глиальных клеток. Возможно эти изменения возникают как усиление иммунной реакции у поросят под влиянием препарата.
В печени животных опытной группы (рис. 8) отмечается нормальное балочное строение, меньше участков мутного набухания гепатоцитов. Границы клеток печени обозначены четче, чем в контрольной группе. По ходу стромы стало больше лимфоидных клеток Никаких дистрофических и некробиотических изменений не выявлено Заметно повышение желчеобразовательной функции печени Клетки печени хорошо воспринимают окраску.
|
Результаты изучения морфологической структура органов иммунной системы животных после применения натрия нуклеината подтверждают, что под действием препарата происходит активное становление иммунной системы. Кроме того, исследование гистологического строения печени и мозга доказывает отсутствие токсического действия препарата на организм животных.
Важную роль в иммунных реакциях играют лимфоциты, которые посредством клеточных рецепторов распознают антигены. Поэтому их называют антигенреактивными, или иммунокомпетентными, клетками.
Многообразие функций, которые выполняют Т-лимфоциты в рамках реализации иммунного ответа организма связано с существованием различных субпопуляций Т-лимфоцитов, "запрограммированных" на выполнение конкретной функции при формировании иммунных реакций. Иммунокомпетентные клетки находятся в определенном кооперативном взаимодействии Функцию обеспечения иммунокомпетентности лимфоидных клеток и регуляции функции В- системы выполняет Т- система.
Очевидна необходимость изучения реакции Т-клеток на различные медикаментозные препараты, используемые в настоящее время клиникой в качестве иммуномодуляторов. для объективизации их назначения в каждом конкретном случае. Т-активная субпопуляция представляет собой преимущественно клетки, несущие супрессорную функцию (есть исследования, характеризующие их и как клетки-помощники).
Теофиллинчувствительные клетки представлены субпопуляцией супрессоров а теофилли-нустойчивые — клетками-помощниками. Т-клетки, образующие розетки с аутоэритроцитами, как полагают, несут киллерную функцию и играют основную роль в механизмах аутоагрессии. В лимфоциты, ответственны за синтез и секрецию различных изотипов иммуноглобулинов. Мигрируя в периферические лимфоидные органы они расселяются в тимуснезависимых, или В - зонах. Такими зонами являются мозговой и герминативный центры лимфатических узлов, периферический слой лимфатических фолликулов, перифолликулярная область и красная пульпа селезенки групповые лимфатические фолликулы. В-лимфоциты являются предшественниками антителообразующих (плазматических) клеток, которые после антигенной стимуляции секретиру-ют молекулы антител специфически реагирующих с антигенными детерминантами.
Проведенные исследования количества Т и В лимфоцитов в крови животных показывают, что количество Т лимфоцитов (рис. 9) в опытной группе несколько снизилось на 7 день опыта, однако на 14 день наблюдалось повышение на 13 %. На 21 день их уровень составил 44.00±4 82 109/л., что в 1-3 раза выше показателей контрольной группы.
Рис.9. Тлимфоциты, 10/л
Количество В лимфоцитов (рис. 10) так же снижалось на 7 день исследования в обеих группах, но затем возросло, достигнув максимального значения в крови животных опытной группы на 21 день опыта составив 26.20±2.18 109/л.
Рис.10. В лимфоциты, 10/л
Таким образом на основании проведенных исследований мы пришли к выводу, что натрия нуклеинат способствует увеличению количества Т- лимфоцитов в 1,8 раза. В- лимфоцитов соответственно в 3,2 раза. Результаты изучения морфологической структуры органов иммунной системы, подтверждают, что препарат стимулирует активное становление иммунологической устойчивости организма.
Применение данного препарата поросятам позволяет повысить иммунологическую устойчивость организма кинфекциям. вызванным патогенной и условно-патогенной микрофлорой, и тем самым снизить заболеваемость животных и повысить их сохранность.
Список литературы
Реферат
Нами изучено влияние иммуномодулятора натрия нуклеината на иммунологическую систему защиты организма поросят. Результаты эксперимента позволяют сделать вывод, что натрия нуклеинат оказывает стимулирующее действие на факторы клеточного иммунитета.
Ключевые слова: иммунобиологическая система, иммунодефицит иммуномодуляция, иммуностимуляторы, натрия нуклеинат, свиньи.
Summary
We have studied influence of natrn nucleinate on immune system of pigs. Our researches have shown, that natrii nucleinate improves cellular factors of immunity.
Key words: immunobiological system, immunodeficiency, immunomodulation, Immunostimulation, natrii nucleinas, pigs.
Сведения об авторе
Ответственный за переписку с редакцией: Александрова Светлана Сергеевна аспирант кафедры "Морфология и патология животных" СГАУ им. Н.И. Вавилова. 410005 г. Саратов ул. Соколовая, 335 т. 8 (8452) 69-25-31; svetavlad66@yandex.ru. т.8 917 3140485
http://vetkuban.com/num6_201010.html
