УДК 619:616-006.44
DOI 10.33861/2071-8020-2022-5-6-8
Староселов М.А. Федеральное государственное бюджетное научное учреждение
«Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии», г. Краснодар
Внедрение в производство промышленной технологии выращивания молодняка крупного рогатого скота и замены местных пород высокопродуктивными животными, часто завезенными из-за рубежа, привело к резкому росту заболеваний [5].
Иммунитет составляет одну из важнейших основ поддержания гомеостаза организма человека и животных. Главная задача иммунной системы - контроль за постоянством внутренней среды организма -иммунологический надзор. Сформировавшись в процессе эволюции для защиты от инфекций, иммунная система элиминирует чужеродные агенты как экзогенной, так и эндогенной природы [8].
В развитии целого ряда болезней неинфекционной этиологии, таких как бронхопневмония в конечном итоге принимают участие бактериальные и вирусные агенты, часто сами выступающие в роли иммуно-супресоров (вирус лейкоза крупного рогатого скота, герпес вирус, парамиксовирус) [6]. Кроме воздействующих на животных антропогенных, техногенных, экологических факторов в условиях Краснодарского края активным иммуносупрессором в последние годы является вирус лейкоза крупного рогатого скота [7].
Клинические проявления иммунодефицитов ассоциируются с увеличением частоты и тяжести инфекций. Инфекционные процессы у животных с иммунологической недостаточностью становятся хроническими и не поддаются традиционному лечению, или же непатогенные микроорганизмы могут стать причиной развития болезней. Вирусы, патогенная и условно патогенная микрофлора поражают органы дыхания на фоне снижения естественной резистентности организма животных, обусловленного нарушением условий содержания, а также неполноценным кормлением животных [5].
Иммунодепрессивные агенты поражают компоненты гуморального и клеточного иммунитета, активность полиморфонуклеарных лейкоцитов. Критериями влияния иммунодепрессивных агентов являются макро- и микроскопические изменения центральных и периферических органов иммунной системы, концентрация и соотношение различных классов иммуноглобулинов, изменение уровня комплемента сыворотки крови, числа и жизнеспособности клеток органов [3].
Вирус лейкоза крупного рогатого скота проявляет тропизм к В-клет-кам, в которых он вызывает пролиферацию и иногда неопластическую трансформацию. Влияние его на иммунологические параметры зависит от типа и стадии болезни. Обычно наблюдается лимфоцитоз с увеличением количества В-клеток, экспрессирующих поверхностные иммуноглобулины [5].
В общей структуре заболеваемости крупного рогатого скота на долю молодняка приходится 54-68%, а на незаразные болезни телят -до 97-98%. Болезнями органов дыхания ежегодно переболева-ет 17,7-19% поголовья крупного рогатого скота, гибель доходит до 24-27% от числа заболевших.
При изучении титров колостральных и активных антител у телят, полученных от инфицированных и интактных коров, привитых против парагриппа-3 вакциной «Паравак», выпускаемой Щелковской биофабрикой, установили, что у 45% новорожденных телят имеют место колостральные противовирусные антитела в низких титрах, в пределах 1:2 - 1:16 в РТГА, не обеспечивающие надежную защиту от заболевания. К 25-35 дню жизни у таких телят появляются антитела к возбудителю парагриппа-3 в более высоких титрах (1:64 - 1:512), что свидетельствует о развитии у них заболевания в 14-20-дневном возрасте.
Экономический ущерб от респираторных болезней складывается из прямых убытков от падежа и вынужденного убоя животных, снижения продуктивности, затрат на лечебные и профилактические мероприятия, ограничения экономических связей между хозяйствами [5, 7].
Привесы у больных и переболевших животных снижаются в 2-3 раза. При дальнейшей эксплуатации у переболевших респираторными болезнями животных не всегда полностью развивается функциональная деятельность репродуктивных органов и молочной железы. В 8% случаев у них отмечается бесплодие и снижение молочной продуктивности вследствие гипогалактии, атрофии или индурации вымени, что в конечном итоге приводит к преждевременной выбраковке до 60% коров. Кроме этого, лечение пневмоэнтеритов телят и их последствий связано с большими затратами [2, 6].
С учетом изложенного весьма актуальным следует считать поиск и применение эффективных и безопасных средств, усиливающих иммунную защиту, устойчивость к стрессам и стимулирующих обменные процессы в организме [1, 4, 9].
Поэтому изучение иммунобиологических параметров крупного рогатого скота при различных факторных болезнях респираторного тракта на фоне инфицирования животных вирусом лейкоза крупного рогатого скота (далее, ВЛКРС) и определение эффективности иммунотропных препаратов для повышения резистентности животных в данной ситуации является актуальной проблемой [2].
Цель исследования - изучение влияния иммуностимулирующих препаратов и схем их применения у инфицированных ВЛКРС животных на развитие факторных болезней и напряженность поствакцинального иммунитета.
Материалы и методы исследований. Исследования проводили в лаборатории терапии Краснодарского НИВИ, в ООО СХП им. Лукьяненко Красноармейского района. Комплексный гематологический анализ проведен на автоматизированном анализаторе «Mythic 18 vet» (Швецария), скорость оседания эритроцитов (СОЭ) - методом Панчен-кова; количественная оценка лимфоидных элементов - с помощью гематологического электронного цифрового счетчика, согласно методическим рекомендациям по ветеринарной гематологии [9], биохимические - на автоматизированном биохимическом анализаторе «Vitalab SelectraJunior»; бактерицидную активность сыворотки крови - нефелометрическим методом по отношению к референтному штамму E. coli О55 в нашей модификации; лизоцимную активность сыворотки крови - нефелометрическим методом с M. lysodeiticus (ацетоновая культура); фагоцитарную активность нейтрофильных гранулоцитов периферической крови - с тест-культурой St. aureus 209р; оценку функциональной активности микробицидной системы нейтрофильных гранулоцитов - по спонтанному и стимулированному NBT-тесту, стимуляцию проводили тест-культурой St. aureus 209р; количество Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования со стабилизированными эритроцитами барана; количество В-лимфоцитов - розеткообразовани-ем с ЕАС-комплексом с использованием стабилизированных эритроцитов быка, основываясь на «Методических указаниях по тестированию естественной резистентности телят», «Методах оценки функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов». Антитела к вирусу парагриппа-3 в сыворотке крови животных определяли в РТГА.
Результаты исследований и их обсуждение. Для проведения исследований по принципу пар-аналогов сформировали три группы коров (две опытные и контрольная) в возрасте 2-4 отела, со сроком стельности 7-7,5 месяцев
Все животные получали общий для данной физиологической группы рацион с добавлением минерально-витаминного кормового премикса, нормализующего обменные процессы.
Всех взятых в опыт коров вакцинировали согласно схемам, применяемым в хозяйствах. Коровам 1-й опытных групп дважды, с интервалом 14 дней внутримышечно вводили 10% раствор левомизола из расчета 1 мг/кг массы тела и вакцину против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота инактивированную сорбированную (ВНИИЗЖ, г. Владимир) в дозе 5,0 см3 дважды, с интервалом 14 дней (согласно наставлению по применению). Телятам, полученным от коров 1-й опытной группы (с 14-дневного возраста) дважды с интервалом 14 дней вводили левамизол в той же дозе. Коровам и телятам 2-й опытной группы по аналогичной схеме вводили иммунофан (НПП «Бионокс», серия 1410204) в объеме 5,0 см3 и 1,0 см3, соответственно. Животным контрольных групп вместо иммуностимуляторов вводили стерильный физиологический раствор.
Кроме того телят, полученных от коров опытных и контрольной групп, в 14-20-дневном возрасте дважды, с интервалом 14 дней вакцинировали против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, инактивированной сорбированной вакциной, выпускаемой ВНИИЗЖ, согласно наставлению по применению.
Кровь для проведения гематологических, биохимических, иммунологических серологических исследований брали до применения иммуностимуляторов и через 14 дней после повторного введения препарата. Критериями оценки эффективности применения иммунофана были показатели живого веса телят при рождении, заболеваемости, сохранности, прироста живой массы, а также титры специфических антител к парагриппу-3.
При анализе полученных результатов установили, что у телят опытных и контрольных групп до начала опыта нет достоверного различия показателей, характеризующих естественную резистентность и обмен веществ. Через 14 дней после второго введения иммуностимуляторов у телят контрольных групп установлено достоверное повышение количества эритроцитов (на 12-12,7%), гемоглобина (на 9,8-12,3%), бактерицидной и фагоцитарной активности сыворотки крови, коэффициента мобилизации по НБТ-тесту (табл. 1).
Таблица 1 Влияние иммуностимуляторов на показатели крови телят (M±m, n=15)
| Показатели | Фон | После введения препаратов | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| контроль | левамизол | иммунофан | контроль | левамизол | иммунофан | |
| Лейкоциты, 109/л | 11,2±1,3 | 10,9±1,4 | 10,97±2,3 | 7,28±1,7 | 7,1±1,4 | 7,28±3,0 |
| Эритроциты, 1012/л | 5,6±0,8 | 5,5±0,6 | 5,29±0,4 | 5,2±0,5 | 5,64±0,7 | 5,75±0,3 |
| Гемоглобин, г/л | 100±1,0 | 100±0,8 | 100,07±0,5 | 89±1,5 | 102±1,1 | 112,33±0,3* |
| ЦП, ед. | 0,6± 0,1 | 0,6±0,13 | 0,59± 0,03 | 0,5±0,16 | 0,64± 0,1 | 0,67±0,09** |
| Лейко-формула, % Эозинофилы | 2,2±0,4 | 1,6±0,3 | 2,14±0,3 | 1,2±0,2 | 1,2±0,3 | 1,67±0,3 |
| Нейтрофилы | 31,2± 0,7 | 33,6± 0,6 | 31,86±2,8 | 22,8±1,6 | 22,4±1,0 | 33,0±8,72 |
| Лимфоциты | 66,4±2,1 | 64,3±3,2 | 67,14±4,4 | 64,0±1,9 | 62,2±2,0 | 44,67±2,4** |
| Моноциты | 0,2±0,04 | 0,6±0,05 | 0,66±0,2 | 0 | 0,4±0,05 | 0,42±0,03 |
| БАСК,% | 26,7±4,7 | 31,4±4,1 | 31,79±5,5 | 42,3±5,0 | 70,6±4,6 | 79,43±5,3* |
| ФА, % | 20,8±4,4 | 19,8±3,2 | 24,86±1,9 | 25,3±4,2 | 28,8±2,9 | 32,0±3,12 |
| КМ, ед. | 1,8±0,6 | 1,6±0,5 | 1,61±0,1 | 1,6±0,6 | 1,8±0,61 | 1,88±0,1 |
Количество лейкоцитов у телят опытных групп в конце опыта снизилось на 33,6-40,4% и составило 6,9*109/л - 7,27*109/л, но этот показатель находился в пределах физиологической нормы для животных данной возрастной группы, его снижение свидетельствует об отсутствии воспалительных процессов, тогда как у телят контрольных групп количество лейкоцитов снизилось на 31,4% и этот показатель в конце опыта был выше нормы, что свидетельствует о вероятности наличия воспалительных процессов у отдельных животных, и подтверждается также повышением относительного количества нейтрофильных гранулоцитов и абсолютного количества лимфоцитов в крови телят опытных и контрольных групп.
Бактерицидная активность сыворотки крови у телят опытных групп возросла в среднем на 44,5% по отношению к фоновым показателям и была выше на 40,1-97%, чем у телят контрольных групп в тот же период. Активность фагоцитоза у подопытных и контрольных животных увеличилась по сравнению с фоновыми показателями, однако, у телят опытных групп это увеличение было более значительным.
Титры поствакцинальных антител к парагриппу-3 крупного рогатого скота у телят первой опытной группы (левамизол) находились в пределах Lg2 8,6 и колебались в пределах 1:64 - 1:512, у телят второй опытной группы (иммунофан) - Lg2 8,8 с колебаниями в пределах 1:64 -1:1024, в то время как у телят контрольной группы этот показатель составлял, соответственно, Lg2 7,8 с колебанием титров специфических антител от 1:32 до 1:256. Средние титры специфических антител к парагриппу-3 по двум сериям опыта представлены на рисунке 1.
Рис. 1. Влияние иммуностимуляторов на титры специфических антител к парагриппу-3 у телят в РТГА (n=15)
Изучив влияние иммуностимуляторов на заболеваемость, сохранность телят и прирост массы тела установили, что заболеваемость телят первой опытной группы была ниже, чем контрольной на 13,3%, и составляла в среднем по группам 33,3%, тогда как в контрольной группе этот показатель был равен 46,6%. Во второй опытной группе показатели заболеваемости телят были равны 20%, что ниже показателей контроля на 26,6%. Сохранность телят опытной группы также была выше, чем в контрольных на 6,7% в первой опытной группе, что составило 86,7% против 80% в контрольной группе, во второй опытной группе этот показатель был на 20% выше по сравнению с контролем и равнялся 100% - падежа телят не было.
Среднесуточный прирост живой массы у телят первой опытной группы был выше, чем у контрольных аналогов на 36,1% и составлял 0,464 кг, тогда как в контрольных группах этот показатель был на уровне 0,297 кг. Во второй опытной группе среднесуточный прирост живой массы также был выше контрольных показателей на 15,5% и составлял 0,392 кг.
Живая масса при рождении у телят первой и второй опытных групп была выше, чем у контрольных, соответственно, на 4,16% и 5,23%.
Было установлено, что иммуностимуляторы способствовали повышению количества общего белка и нормализации показателей протеи-нограмм у животных опытных групп за счет повышения относительного количества гамма-глобулинов и снижения альбуминовой фракции, стабилизировался минеральный обмен, и, хотя во всех группах кальций-фосфорное соотношение было нарушено (за счет высокого уровня фосфора), у телят опытных групп этот дисбаланс был выражен меньше (табл. 2).
У новорожденных телят опытных групп уровень общего белка был выше по сравнению с контрольными, увеличилась доля глобулиновой фракции за счет гамма-глобулинов.
Таблица 2 Влияние иммуностимуляторов на биохимические показатели телят (M±m, n=15)
| Группа | Общий белок, г/л | Альбумины, % | Альфа-глобулины, % | Бета-глобулины,% | Гамма-глобулины, % | Мочевина, ммоль/л | Глюкоза, ммоль/л | Кальций, ммоль/л | Фосфор, ммоль/л |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 66,4 | 55,8 | 15,4 | 12,3 | 16,5 | 0,54 | 3,19 | 2,08 | 2,52 |
| 2 | 64,8 | 61,25 | 12 | 11,45 | 15,3 | 0,67 | 4,02 | 2,17 | 2,9 |
| контроль | 62,2 | 62,2 | 11,3 | 10,9 | 15,6 | 0,66 | 3,72 | 2,19 | 3,0 |
Заключение. Для повышения естественной резистентности крупного рогатого скота, снижения его заболеваемости и отхода показано применение иммуностимулирующих препаратов, нормализующих показатели клеточного звена иммунитета, повышающих активность фагоцитов и неспецифических гуморальных факторов - левамизол, иммунофан совместно с проведением вакцинации против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита у коров в 7,5 месяцев стельности и телят в возрасте 14-20 дней. Введение иммуностимуляторов телятам, полученных от инфицированных ВЛКРС и больных лейкозом коров повышает массу тела при рождении на 4,16% и 5,23%, активизирует эритро - и гемопоэз. Применение иммунофана и левомизола глубокостельным коровам нормализует гематологические показатели, белковый, углеводный, витаминный обмены. Заболеваемость телят опытных групп ниже по сравнению с контролем на 13,3-20,0%. Среднесуточный прирост живой массы выше на 36,1% и 15,5%, соответственно. Сохранность телят опытных групп также была выше, чем в контрольных на 6,7% в первой опытной группе и на 20% во второй опытной группе.
Список литературы:
1. Взаимосвязь между возрастом и напряженностью поствакцинального гуморального иммунного ответа у лиц, ранее переболевших COVID-19/ А.И. Андреев, И.В. Андреев, К.О. Нечай, Д.Р. Есаулов, О.С. Баклакова [и др.]// Иммунология. 2022. С. 583-592.
2. Влияние инфицированности вирусом лейкоза крупного рогатого скота на гематологические показатели коров в различные периоды стельности/ Н.Ю. Басова, М.А. Староселов, А.К. Схатум, В.В. Пачина, Н.В. Ковалюк// Ветеринария Кубани. 2021. № 1. С. 3-5.
3. Влияние препаратов ПАК-9000 и ПАК-ПАН на иммуногенез/ Н.Ю. Басова, А.К. Схатум, М.А. Староселов, Ю.Е. Федоров, В.В. Пачина, Р.Р. Юлмухаметова// В сборнике: Актуальные проблемы современной ветеринарной науки и практики. материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института. КубГАУ. 2016. С. 410-412.
4. Встречаемость ретровирусов животных в районах Республики Татарстан/ Р.Ф. Сафина, Г.Р. Сальманова, К.В. Усольцев, Н.И. Хаммадов, Т.Х. Фаизов// Ученые записка Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. 2022. Т. 249. № 1. С. 183-188.
5. Глотова А.Г., Глотова Т.И., Нефедченко А.В., Котенева С.В. Респираторные болезни у импортного скота в период адаптации на молочных комплексах// Ветеринария. 2022. № 2. С. 3-8.
6. Кощаев А.Г., Гугушвили В.М., Черных О.Ю. Фармакокоррекция иммунитета крупного рогатого скота при специфической профилактике лептоспироза// Труды Кубанского государственного аграрного университета. 2021. № 92. С. 211-217.
7. Лазарева Е.Г. К вопросу актуальности исследования молока на наличие вируса лейкоза крупного рогатого скота// Пищевая промышленность. 2022. № 7. С. 45-48.
8. Одновременная идентификация возбудителей лейкоза и иммунодефицита крупного рогатого скота/ К.В. Усольцев, М.Е. Горбунова, Р.Ф. Сафина, Р.И. Шанга-раев, Г.Р. Сальманова, К.А. Осянин, Т.Х. Фаизов, Н.И. Хаммадов// Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2022. № 1. С. 55-64.
9. Этиологическая структура бактериальных заболеваний свиней/ А.В. Скориков, Н.Ю. Басова, М.А. Староселов, Н.Н. Забашта, С.В. Пруцаков, Н.Н. Кружнов, В.А. Агольцов, В.И.Боев// Научная жизнь. 2018. № 8. С. 122-128.
Резюме. Для повышения естественной резистентности крупного рогатого скота, снижения его заболеваемости и отхода показано применение иммуностимулирующих препаратов, нормализующих показатели клеточного звена иммунитета, повышающие активность фагоцитов и неспецифических гуморальных факторов - левамизол, иммунофан совместно с вакцинацией против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита у коров в 7,5 месяцев стельности и телят в возрасте 14-20 дней. Левамизол применяют стельным коровам за 2,5-2 месяца до отела, телятам - с 14-дневного возраста. Иммунофан рекомендуется использовать глубокостельным коровам за 2-2,5 месяца до отела, телятам - с 14-дневного возраста. Применение иммуностимулирующих препаратов: левамизола и иммунофана, - глубокостельным коровам инфицированным вирусом лейкоза крупного рогатого скота, на фоне применения минерально-витаминных премиксов нормализует обменные процессы, увеличивает количество белка в сыворотке крови на 10,9-14,4%, содержание альбуминовой и гамма-глобулиновой фракции, глюкозы, микроэлементов. При профилактике респираторных болезней телят для повышения иммунной реактивности целесообразно применение иммуностимуляторов, активизирующих клеточное звено иммунитета - левамизол и иммунофан. Наиболее эффективной при профилактике респираторных болезней является схема совместного использования иммуномодуляторов и специфических биологических средств. Введение иммуностимуляторов телятам, полученным от инфицированных вируса лейкоза крупного рогатого скота, и больных лейкозом коров повышает массу тела при рождении на 4,16 и 5,23%, соответственно, активизирует эритро- и гемопоэз. Применение иммунофана и левамизола глубокостельным коровам нормализует гематологические показатели, белковый, углеводный, витаминный обмены. Заболеваемость телят опытных групп ниже, по сравнению с контролем на 13,3-20,0%. Среднесуточный прирост живой массы выше на 36,1 и 15,5%. Сохранность телят опытной группы также была выше, чем в контрольных на 6,7% в первой опытной группе, что составило 86,7% против 80% в контрольной группе, во второй опытной группе этот показатель был на 20% выше по сравнению с контролем и равнялся 100%.
Ключевые слова: крупный рогатый скот, вирус лейкоза крупного рогатого скота, парагрипп-3, глубокостельные коровы, телята, иммунитет, иммуностимулирующий препарат, вакцинопрофилактика, гематологический показатель, витаминный обмен, кальций-фосфорное соотношение.
Сведения об авторе: Староселов Михаил Александрович, кандидат ветеринарных наук, заведующий отделом терапии и акушерства ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии; г. Краснодар, ул. 1-я линия, д. 1; тел.: 8-953-1122803; e-mail: knivitherapy@gmail.com - ответственный за переписку с редакцией.
http://vetkuban.com/num5_202202.html