УДК 618.14-002:636.22/.28
DOI 10.33861/2071-8020-2024-3-9-12
Староселов М. А., Мирошниченко П. В. Федеральное государственное бюджетное научное учреждение
«Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии», г. Краснодар / Федеральное государственное
бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Кубанский государственный
аграрный университет имени И. Т. Трубилина», г. Краснодар
Cхатум А. К., Трибурт А. В. Федеральное государственное бюджетное научное учреждение
«Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии», г. Краснодар
Горпинченко Е. А., Пономаренко В. А. Федеральное государственное бюджетное образовательное
учреждение высшего образования «Кубанский государственный аграрный
университет имени И. Т. Трубилина», г. Краснодар
Актуальной проблемой в сфере животноводства на сегодняшний день являются послеродовые осложнения, а к наиболее распространённым среди них относится эндометрит, который может нанести значительный экономический ущерб и колоссальные потери. Особенно это касается высокопродуктивного стада, где ущерб может доходить до 90% [2].
Пагубное действие эндометрита крупного рогатого скота заключается в задержке роста поголовья и снижении количества удоев. У переболевших коров возникают серьезные проблемы с репродуктивной системой, что приводит искусственное осеменение к бессмысленному применению. Вследствие этого, все мероприятия, направленные на увеличение числа поголовья, сводятся к нулю. Еще одним звеном в данной проблеме является бессимптомное течение эндометрита у более чем 60 % животных, что значительно затрудняет своевременное лечение [1].
Помимо всего прочего, у больных коров в предродовой период отмечались нарушения в обмене витаминов. Снижение бета-каротина, ретинола, повышение уровня токоферола отрицательно повлияли на организм в послеродовой период и повлекли за собой гинекологические проблемы. Высокое содержание токоферола повлекло развитие маточного воспаления и задержку инволюции, а низкое содержание ретинола вызвало защитную реакцию на дегенеративные изменения при воспалении эндометрия [3].
В последние годы в нашей стране ведутся интенсивные работы по созданию новых, высокоэффективных лекарственных средств антибиотического и противовоспалительного действия, доступных к использованию в условиях современных животноводческих ферм для лечения коров и других видов животных с заболеваниями репродуктивных органов.
Поиск новых препаратов для лечения высокопродуктивных коров при воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии, не обусловливающих антибиотикорезистентность и не снижающих качество получаемой продукции, является актуальной задачей акушеров [4].
Применение комплексных препаратов, не содержащих антибиотиков, обладающих не только высокой сорбционной активностью, но и антитоксическими, бактерицидными, фунгицидными и ростостимулирующими свойствами в современных условиях интенсивного ведения животноводства, может способствовать существенному повышению эффективности животноводческой отрасли [5].
Целью наших исследований является создания нового препарата при эндометрите у коров, изучение состава бактериальной флоры, участвующей в возникновении и развитии эндометритов у коров, а также изучение бактерицидной и фунгицидной активности компонентов нового препарата.
Материалы и методы исследований. От коров, клинически больных эндометритом, отбирали истечения из половых путей в пробирки со стерильным физиологическим раствором хлорида натрия.
При конструировании препарата использовался СО2-экс-тракт животного компонента, который является сложным белко-во-липидным, меланиновым комплексом, проявляющим активное бактерицидное действие в отношении грамположительной и грамотрицательной микрофлоры, выделяемой от коров, больных эндометритами.
Результаты исследований и их обсуждение. Изучен состав бактериальной флоры, участвующей в возникновении и развитии эндометрита у коров (рисунок 1).
Рис. 1. Микробный фон матки коров, больных острым эндометритом
По данным бактериологических исследований (рисунок 2) установлено, что Escherichia coli выделялась в 30% случаев, 9 Streptococcus spp. - в 15% случаев, Staphylococcus aureus и Enterobacter agglomerans - 10,40%, Kluyvera cryocrescens - в 8%, Proteus vulgaris и Proteus mirabilis - 6,40% и 5,80% соответственно, в числе исследованных проб (n=268).
Рис. 2. Наиболее часто выделяемые при эндометрите у коров монокультуры микроорганизмов
Выделенная микрофлора оказалась резистентна к азитромицину, амоксициллину, пенициллину, линкомицину, триметоприму, эритромицину и некоторым другим препаратам. При этом наибольшей устойчивостью к антибиотикам обладали Staphylococcus aureus, Streptococcus spp. и Escherichia coli. Низкая антибактериальная активность к выделенной микрофлоре была выявлена у азитронита, окситетрациклина, пенстрепа, спектама и других препаратов.
Антимикробная активность к микроорганизмам, выделенным из матки больных эндометритом коров, была выше у амоксициллина, гентамицина и энрофлоксацина.
Исходя из данных исследования чувствительности выделенных культур к антимикробным препаратам, следует, что: Streptococcus spp. (n=4) чувствительны ко всем исследуемым антибиотикам, кроме Амоксигарда и Амоксимага, что составило 88,23%; Staphylococcus aureus (n=8) устойчив к Амоксимагу, Пенстрепу, Энрониту, Сульфетрисану, Энроксилу, чувствителен к 70,5% антибиотиков; Enterobacter agglomerans (n=8) чувствителен ко всем исследуемым антибиотикам (94,1%), но устойчив к Доксилоксу; Kluyvera cryocrescens (n=5) чувствительна к Амокси-цилину, Азитрониту, Энроксилу, Кобактану, Тетравету, Гентаприму, Пенстребу, Пульсоцефалику, Офлосану, Сульфетрисану, Спектаму (64,7%); Escherichia coli (n=6) чувствительна к Кобактану, Тетравету, Спектаму, Энроксилу, Пенстребу, Офлосану, Пульсоцефалику (41,1%); Enterococcus hirae (n=5) чувствительна к Тиалонгу, Лексо-флону, Гентаприму, Энроксилу, Тетравету, Пенстрепу, Пульсоцефа-лику, Офлосану (47,1%); Enterococcus faecalis (n=9) чувствителен к Азитрониту, Энроксилу, Кобактану, Пульсоцефалику, Лексофло-ну, Спектаму, Гентаприму, Офлосану (58,8%).
Результаты исследований представлены в таблице 1.
Для создания нового препарата при эндометрите у коров были подобраны следующие компоненты: СО2 экстракт животного компонента, является сложным белково-липидным комплексом, проявляющим активное бактерицидное действие, в отношении грам+ и грам- микрофлоры, выделяемой от коров, больных эндометритами. Монолаурин - органическое химическое вещество животного происхождения, являющееся моноглицеридом. Разрушает липиды и фосфолипиды в мембране патогенных организмов, тем самым вызывая разрушение их наружной оболочки. Это препятствует прикреплению вируса к здоровым клеткам, его размножению и дальнейшему инфицированию организма. Хитин-хитозан-меланиновый комплекс представляет собой соединение частично деацетилированного хитина с меланином, обладает сорбционными и детоксикационными свойствами, выступает в качестве антиоксиданта. Содержит антимикробный комплекс, который включает очищенный комплекс антимикробных пептидов, в состав которого входят дефензин, характеризуемый аминокислотным сиквенсом; СО2 экстракт ромашки лекарственной оказывает выраженное противовоспалительное действие на слизистую матки, усиливает регенеративные способности ткани, снижает антибиотикорезистентность выделяемых культур микроорганизмов; ихтиол оказывает антимикробное, противопаразитарное, противовоспалительное, кровоостанавливающее, местноанестезирующее и кератопластическое действие; диметилсульфоксид (ДМСО) способствует заживлению ран, облегчает боль, предотвращает повреждение клеток и улучшает биодоступность препарата; полиэтиленгликоль (ПЭГ 400), гипоаллергенный наполнитель препарата, который помимо прочего, стимулирует сокращение миометрия при внутриматочном введении.
В результате проведенных исследований установлено что, растительные компоненты, входящие в состав препарата обладают выраженной бактерицидной активностью по отношению к бактериальным культурам в концентрациях от 31,25 до 62,5 мг/мл., в отношении дрожжеподобных и плесневых грибов - от 62,5 до 125 мг/мл (рисунок 3).
Липидные продукты переработки массы личинок мух обладают выраженными бактерицидными свойствами в отношении бактериальных культур в концентрациях от 1,95 до 31,25 мг/мл, в отношении дрожжеподобных и плесневых грибов в пределах 31,25-62,5 мг/мл. В том числе по отношению к культурам Staphylococcus aureus - 1,95 - 3,9 мг/мл, Candida albicans -31,25 мг/мл, Escherichia coli - 3,9 мг/мл.
Таблица 1 Зона ингибиции роста наиболее часто выделяемых культур, мм (M±m)
| Препараты | Streptococcus spp., n=4 | Enterobacter agglomerans, n=8 | Kluyvera cryocrescens, n=5 | Staphylococcus aureus, n=8 | Escherichia coli, n=6 | Enterococcus faecalis, n=9 | Enterococcus hirae, n=5 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Азитронит | 22,0±1,4 | 21,5±1,5 | 22,0±0,9 | 20,6±1,3 | 12,0±1,0 | 22,5±0,2 | 18,5±1,0 |
| Амоксигард | 15,5±1,1 | 19,2±0,4 | 17,5±0,9 | 20,2±1,3 | 8,7±0,4 | 18,5±0,5 | 14,2±0,2 |
| Амоксимаг | 18,5±0,6 | 19,2±0,4 | 13,0±1,2 | 18,4±1,0 | 12,0±1,5 | 17,0±0,3 | 14,2±0,5 |
| Амоксицилин | 25,2±1,8 | 20,7±0,7 | 20,2±1,3 | 20,6±0,6 | 12,7±1,1 | 18,0±0,7 | 14,7±0,6 |
| Гентаприм | 25,2±0,9 | 24,2±0,7 | 22,5±0,8 | 21,4±1,3 | 14,0±0,4 | 20,2±0,7 | 22,2±0,2 |
| Доксилокс | 23,5±1,1 | 17,2±0,8 | 12,7±1,6 | 19,8±1,0 | 14,7±1,1 | 11,2±0,8 | 18,2±0,9 |
| Кобактан | 26,2±1,2 | 24,0±0,5 | 21,5±1,1 | 19,8±0,4 | 19,5±0,8 | 20,0±0,7 | 15,0±0,2 |
| Лексофлон | 23,0±0,7 | 21,2±0,7 | 14,2±0,7 | 20,2±0,5 | 13,0±1, | 20,1±0,7 | 20,2±0,5 |
| Офлосан | 23,7±0,8 | 22,0±1,4 | 20,5±0,8 | 24,2±0,8 | 20,2±0,8 | 21,0±0,4 | 25,0±1,3 |
| Пенстреп | 25,0±1,4 | 22,0±0,7 | 24,0±1,6 | 18,4±0,5 | 19,7±1, | 14,0±0,1 | 21,0±0,7 |
| Пульсоцефалик | 24,2±0,8 | 21,5±0,6 | 19,5±1,0 | 24,4±0,8 | 22,2±0,4 | 20,5±0,2 | 22,0±0,5 |
| Спектам | 20,5±1,1 | 23,5±1,1 | 19,2±0,9 | 26,2±0,05 | 19,2±0,4 | 21,5±0,2 | 15,2±0,1 |
| Сульфетрисан | 26,2±0,05 | 22,0±0,9 | 20,5±1,2 | 17,0±0,7 | 16,0±0,7 | 18,0±0,8 | 18,0±0,9 |
| Тетравет | 24,2±0,9 | 23,7±0,7 | 21,2±1,5 | 19,6±0,6 | 19,5±0,9 | 20,5±0,5 | 22,0±0,7 |
| Тиалонг | 22,0±0,9 | 19,2±0,4 | 9,5±0,6 | 21,2±1,1 | 12,2±1,6 | 18,2±0,4 | 22,2±0,38 |
| Энроксил | 27,0±1,0 | 23,7±0,4 | 21,5±1,1 | 18,8±1,2 | 19,7±0,8 | 20,6±0,5 | 23,7±0,4 |
| Энронит | 21,0±0,9 | 19,5±0,6 | 16,7±1,3 | 17,2±0,8 | 13,5±1,9 | 17,3±0,5 | 18,0±0,60 |
Рис. 3. Бактерицидная и фунгицидная концентрации компонентов растительного и животного происхождения
Аналогичные липиды, полученные с помощью технологии, разработанной германской компанией ГЕА Вестфалия обладали бактерицидными и фунгицидными свойствами в концентрациях 250-500 мг/мл.
Хитино-меланиновые компоненты массы личинок мух, полученные по оригинальной технологии без применения растворителей (прикурсоров) обладали бактерицидной активностью в концентрациях 3,9-31,25 мг/мл. В том числе по отношению к культурам Staphylococcus aureus - 31,25 мг/мл, Escherichia coli - 3,9 мг/мл, Candida albicans - 62,5 мг/мл.
Бактерицидная и фунгицидная активность компонентной базы нового препарата по отношению к основным бактериальным и грибным агентам, участвующим в возникновении и развитии эндометритов и маститов у сельскохозяйственных животных, находится в пределах наиболее эффективных препаратов, применяемых для терапии данных болезней, за счет синергического действия входящих в его состав компонентов.
Лабораторные исследования показали, что препарат оказывает противовоспалительную активность и анальгезирующее действие (табл. 2, рисунок 4).
Таблица 2 Биологическая активность нового препарата при эндометрите у коров
| Культуры | Бактерицидная активность, мг/мл, /мм |
|---|---|
| C. albicans | 62,5 / 15 |
| E. aglomerans | 31,25 / 20 |
| E. coli | 3,9 / 22 |
| E. faecalis | 15,6 / 16 |
| E. hirae | 31,25 / 18 |
| K.cryocrescens | 31,25 / 19 |
| S. aureus | 15,6 / 18 |
| Str. spp | 15,6 / 17 |
При предварительных исследованиях бактерицидной активности в отношении культур участвующих в развитии эндометритов у коров установили, что бактерицидная концентрация была в пределах 3,9-62,5 мг/мл, зоны ингибиции роста - 15-22 мм, что оценивается как средняя и высокая активность.
Рис. 4. Сравнение биологической активности нового препарата с антимикробными препаратами, зона ингибиции роста культур, мм
Заключение. Изучен состав бактериальной флоры, участвующей в возникновении и развитии болезней репродуктивной системы у крупного рогатого скота. Определена биологическая характеристика наиболее часто выделяемой флоры. При конструировании нового препарата были использованы СО2 экстракт животного компонента, СО2 экстракт ромашки лекарственной, ихтиол, диметилсульфоксид (ДМСО), полиэтиленгликоль (ПЭГ 400). Определены бактерицидная и фунгицидная активность компонентов нового препарата. Биологическая активность нового препарата в отношении культур участвующих в развитии эндометритов у коров оценивается 11 как средняя и высокая.
Список литературы:
1. Терапевтическая эффективность антибактериального препарата прималакт при хроническом и скрытом эндометрите у коров / И. В. Брюхова, Г. А. Востроилова, А. Г. Нежданов [и др.] // Ветеринария. 2019. № 4. С. 10.
2. Вторый, С. В. Влияние внешних погодных условий на продуктивность коров при привязном содержании / С. В. Вторый, Р. М. Ильин // Технологии и технические средства механизированного производства продукции растениеводства и животноводства. 2019. № 2 (99). С. 269-277.
3. Николаев, С. В. Антимикробные свойства и эффективность применения озонированного льняного масла при эндометрите у коров / С. В. Николаев, И. Г. Конопельцев // Ветеринария. 2021. № 3. С. 40-42.
4. Тузов, И. Н. Современные проблемы в скотоводстве: учеб. пособие / И. Н. Тузов, М. Г. Григорьева // КубГАУ. 2016. 117 с.
5. Тыщенко, К. А. Состав бактериальной флоры, участвующей в возникновении эндометрита у коров / К. А. Тыщенко, М. А. Ста-роселов, А. В. Скориков // Сборник научных трудов Краснодарского научного центра по зоотехнии и ветеринарии. 2022. Т. 11. № 2. С. 108-112.
Резюме. В статье представлен новый препарат животного и растительного происхождения, результаты бактериологических исследований микрофлоры, выделенной при эндометритах у коров, находящихся в животноводческих хозяйствах Краснодарского края. Определена биологическая характеристика наиболее часто выделяемой микрофлоры. Также подобраны компоненты для конструирования нового препарата: СО2 экстракт животного компонента, СО2 экстракт ромашки лекарственной, ихтиол, диметилсульфоксид (ДМСО), полиэтиленгликоль (ПЭГ 400) и изучены его фунгицидные и бактерицидные свойства.
Ключевые слова: корова, эндометрит, антибиотики, микроорганизмы, резистентность, чувствительность, антимикробное действие, лечение, бактериальная флора, липиды.
Сведения об авторах:
Мирошниченко Петр Васильевич, кандидат ветеринарных наук, заведующий отделом эпизоотологии, микологии и ветсанэкспертизы ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии», доцент кафедры паразитологии, ветсанэкспертизы и зоогигиены ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина»; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, 1; тел.: 8-918-4470155; e-mail: mpetrvas@mail.ru.
Схатум Аминет Кадыровна, кандидат ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник отдела терапии и акушерства ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии»; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, 1; тел.: 8-918-4725784; e-mail: knivitherapy@gmail.com.
Трибурт Анна Владимировна, аспирант, младший научный сотрудник отдела терапии и акушерства ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии»; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, 1; тел.: 8-918-1980158; e-mail: triburt2000@gmail.com.
Горпинченко Евгений Анатольевич, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры терапии и фармакологии ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина»; 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13; тел.: 8-861-2215820; e-mail: veterinary@kubsau.ru.
Пономаренко Вероника Алексеевна, студент ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина»; 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13; тел.: 8-900-2601656; e-mail: knivitherapy@gmail.com.
Ответственный за переписку с редакцией: Староселов Михаил Александрович, кандидат ветеринарных наук, заведующий отделом терапии и акушерства ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии», доцент кафедры микробиологии, эпизоотологии и вирусологии ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубили-на»; 350004, г. Краснодар, ул. 1-я Линия, 1; тел.: 8-953-1122803; e-mail: knivitherapy@gmail.com.
http://vetkuban.com/num3_202403.html