Санин А.В., Пронин А.В., Наровлянский А.Н., Кожевникова Т.Н.,Сосновская О.Ю.
ФГБУ Федеральный научно-исследова-тельский центр эпидемиологии им. Н. Ф. Гамалеи Минздрава России, г Москва
Беляева М.В., Анников В.В. ФГБОУВПО "Саратовский государственный аграрный университет им. Н. И. Вавилова", г. Саратов
Гиперлипидемия - распространенное нарушение метаболизма у мелких домашних животных. Одним из самых серьезных её осложнений считается панкреатит [7]. Для коррекции гиперлипидемии у животных помимо диетотерапии используют пребиотики, фосфолипиды и противовоспалительные агенты, но их эффект, как правило, непродолжителен [5]. Это обусловливает необходимость разработки новых эффективных и безопасных средств для фармакокоррекции данной патологии. В настоящей работе использовали новое комплексное лекарственное средство на основе полипре-нилфосфата натрия (ППН) и бета-ситостерина, полученных из зелени пихты.
Материалы и методы. Использовали комплексное лекарственное средство (рабочее название Витапрен) на основе ППН и бета-си-тостерина. Одна таблетка производства ООО Гамаветфарм содержала 8 мг ППН и 10 мг бета-ситостерина, а в качестве вспомогательных веществ - стеарат магния - 2,5 мг и сорбит 229,5 мг. В качестве препарата сравнения применяли аторвастатин (Тева фармацевтические предприятия ЛТД, Израиль).
В исследование было включено 40 собак разных половозрастных групп, разделенных на 2 группы: 35 голов в 1-й группе и 5 - во 2-ой. Собакам 1-й группы (опытная) при лечении давали комплексное лекарственное средство внутрь в дозе 3-6 мг/кг веса 2 раза в сутки в течение 2-х месяцев. Собакам 2-й группы (контрольная) - аторвастатин внутрь в дозе 0,4 мг/кг веса.
Клинические исследования (осмотр, пальпация, аускультация. термометрия, наличие аппетита, исследование видимых слизистых оболочек) проводили общепринятыми в ветеринарии методами на базе Саратовского госагроуниверситета им.Н.И.Вавилова и ветеринарной клиники доктора Анникова (г. Саратов).
Гематологические исследования (количество лейкоцитов, эритроцитов, уровень гемоглобина, гематокрита) проводили на гемоанализаторе "Mindray BC-2300" (Китай), с использованием стандартных реагентов. СОЭ определяли на аппарате Панченкова, а подсчет лей-кограммы проводили исследованием мазка крови, окрашенного набором Лейкодиф-200.
Биохимические исследования сыворотки крови выполняли на анализаторе "BioSystems BTS-350" (Испания), с использованием реактивов фирмы "Диакон ДДС". Исследования проводили до начала лечения, а также через 30 и 60 суток терапии.
Ультрасонографические исследования проводили на аппарате MyLab 20. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью программы Statistica 6.
Результаты и обсуждение. При определении нозологического профиля болезней собак, сопровождающихся нарушением липидного обмена, было установлено, что поражения кожи и желудочно-кишечного тракта у собак присутствуют в 15,5% случаев (50 животных из 620 пришедших на первичный прием), из них у 80% (40 голов) наблюдается дислипидемия.
Среди этих животных 27 были кастрированы. Высокая пропорция дислипидемии у таких собак, скорее всего, связана с нарушением липидного обмена, возникшего в результате снижения уровня половых гормонов.
На момент начала лечения клинически у больных дислипидеми-ями наблюдали ослабление или отсутствие аппетита и жажды, галитоз, у некоторых животных - рвоту и диарею. Слизистые оболочки чаще всего были бледно-розового цвета. При пальпации брюшная стенка напряжена и болезненна. Шерстный покров тусклый и взъерошенный, волос плохо удерживался в волосяной луковице. Тургор кожи ослаблен, у некоторых животных на коже имелись алопеции или экзематозные поражения.
Через 30 суток терапии у животных опытной группы клинически наблюдали улучшение аппетита, у четырех животных сохранился галитоз, рвота и диарея прекратились. Брюшная стенка при пальпации мягкая и безболезненна. Шерстный покров оставался тусклым, волос плохо удерживался в волосяной луковице, у некоторых животных алопеции, мокнущие экземы перешли в сухие. Нормализовался тургор кожи.
При лечении животных контрольной группы возникли осложнения (рвота, диарея, потеря аппетита, абдоминальные боли), из-за чего терапию аторвастатином пришлось прекратить.
Через 2 месяца терапии у животных опытной группы наблюдали хороший аппетит, галитоз исчез. Шерстный покров тусклый, волос хорошо удерживался в волосяной луковице, на месте алопеций появлялся новый волос, отмечалось ослабление экзематозного процесса.
При проведении гематологических исследований были получены данные, представленные в таблице 1.
Таблица 1. Динамика гематологических изменений при терапии собак с дислипидемиями (n=40, M ± m, P)
| Показатели | Норма | До начала лечения | 30 сутки терапии | 60 суток терапии | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Группы животных | Группы животных | Группы животных | |||||
| 1 | 2 | 1 | 2 | 1 | 2 | ||
| Гемоглобин, г/л | 115-180 | 183,4±6,94 | 189,3±5,6 | 162,2±7,9 | ND | 151,4±6,5 | ND |
| Гематокрит,% | 37-54 | 68,1±5,9 | 63,6±4,9 | 47,9±3,8 | ND | 45,8±3,5 | ND |
| СОЭ, мм/ч | 0-22 | 5,8±1,2 | 4,1±0,9 | 3,9±1,4 | ND | 2,6±1,3 | ND |
| Общее кол-во эритроцитов, 1012/л | 5,5-8,5 | 9,9±1,0 | 8,9±1,3 | 7,42±2,03 | ND | 7,6±2,3 | ND |
| Общее кол-во лейкоцитов, 109/л | 6,0-17,0 | 13,8±3,3 | 12,8±9,0 | 8,4±1,52 | ND | 9,8±2,2 | ND |
| Эозинофилы, % | 2-10 | 6,3±1,4 | 5,8±1,8 | 4,9±0,8 | ND | 5,6±1,1 | ND |
| Юные, % | 0 | 0 | 0 | 0 | ND | 0 | ND |
| Базофилы, % | 0-1 | 0,1±0,01 | 0 | 0 | ND | 0 | ND |
| Палочкоядерные нейтрофилы,% | 0-3 | 1,1±0,5 | 1,3±0,5 | 1,1±0,3 | ND | 1,2±0,4 | ND |
| Сегментоядерные нейтрофилы,% | 60-70 | 74,3±3,8 | 75,9±3,6 | 69,4±3,6 | ND | 71,4±2,9 | ND |
| Моноциты, % | 3-10 | 3,1±0,9 | 2,7±1,1 | 3,8±0,15 | ND | 2,9±1,5 | ND |
| Лимфоциты, % | 12-30 | 24,3±1,3 | 29,4±1,5 | 25,4±1,5 | ND | 28,3±1,3 | ND |
Примечание: ND- not done (из-за токсического эффекта аторвастатина эксперимент пришлось прекратить)
Из данных таблицы видно, что до начала терапии у животных обеих групп наблюдали повышенный уровень гематокрита, что связано с дегидратацией из-за наличия у животных рвоты и диареи. По этой же причине отмечали повышение уровня эритроцитов и гемоглобина.
Сдвиг нейтрофильного ядра вправо косвенно свидетельствует о сни- 15 жении резистентности, вызванной, очевидно, нарушением барьерной функции печени по причине ее гиперлипидемии (стеатоза).
На 30-е и 60-е сутки терапии все гематологические показатели находились в пределах референсных величин. При проведении биохимических исследований были получены данные, представленные в таблице 2.
Таблица 2. Динамика биохимических изменений при терапии собак с дислипидемиями (n=40, M ± m)
| Показатели | Норма | До начала терапии | Через 30 суток терапии | Через 60 суток терапии | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Группы | Группы | Группы | |||||
| 1 | 2 | 1 | 2 | 1 | 2 | ||
| Холестерин,ммоль/л | 2,9-6,0 | 8,26±1,45 | 7,98±1,78 | 6,98±0,73 | ND | 5,31±0,98 | ND |
| Триглицериды,ммоль/л | 0,2-1,0 | 3,63±0,9 | 3,45±0,7 | 2,43±0,83 | ND | 1,01±0,76 | ND |
| АЛТ, U/L | 8,0-7,0 | 63,51±3,23 | 71,35±4,67 | 69,89±2,43 | ND | 49,51±1,23 | ND |
| ЛДГ U/L | 22-210 | 274,36±10,31 | 283,57±9,83 | 253,8±8,49 | ND | 201,48±7,67 | ND |
| ЩФ, U/L | 18-70 | 89,4±3,89 | 85,61±3,67 | 79,36±2,95 | ND | 68,25±2,1 | ND |
| а-амилаза,U/L | 250-1520 | 1678,3±29,6 | 1589,58±31,7 | 1538,71±26,83 | ND | 1248,31±18,09 | ND |
| Панкреатическая липаза, U/L | 30-60 | 51,42±3,81 | 49,83±2,45 | 33,38±1,48 | ND | 30,51±1,5 | ND |
| ГГТ, U/L | 1,0-10,0 | 11,52±3,53 | 13,65±2,49 | 9,87±3,21 | ND | 8,9±2,42 | ND |
| Билирубин,мкмоль/л | 0,1-10,3 | 9,85±1,48 | 10,35±,15 | 8,53±,41 | ND | 5,39±1,82 | ND |
| Холинэсте- раза, U/L | от 2200 | 10188,7±1150,38 | 9845,3±1213,51 | 15293±1050,67 | ND | 13748±989,75 | ND |
| Глюкоза, ммоль/л | 3,4-6,5 | 6,93±1,31 | 6,48±1,16 | 6,39±1,3 | ND | 5,93±1,45 | ND |
| ОБ, г/л | 50,8-77,2 | 89,05±3,48 | 92,31±4,01 | 81,43±3,01 | ND | 65,31±3,42 | ND |
| Креатинин,ммоль/л | 44,3-138,4 | 108,07±3,4 | 98,45±2,85 | 121,75±4,89 | ND | 101,38±3,64 | ND |
| Са,ммоль/л | 2,0-3,0 | 1,98±0,51 | 1,73±0,42 | 2,53±0,38 | ND | 2,61±0,52 | ND |
| Р, ммоль/л | 1,0-2,1 | 1,49±0,53 | 1,52±0,39 | 1,47±0,15 | ND | 1,53±0,22 | ND |
| Са++,ммоль/л | 1,09-1,20 | 0,69±0,14 | 0,58±0,21 | 1,12±0,08 | ND | 1,19±0,03 | ND |
| С-рб,мкмоль/л | Отсутствует | 6,16±1,02 | 7,01±1,23 | 5,37±1,84 | ND | 2,12±0,76 | ND |
Примечание: ND- not done (из-за токсического эффекта аторвастатина эксперимент пришлось прекратить)
Как показывают данные, приведенные в таблице 2, уровень холестерина до начала лечения был повышен и составил в 1-й группе 8,26±1,45 и 7,98±1,78 ммоль/л, что указывает на патологию печени и нарушение липидного обмена. Через 30 суток терапии в 1-й группе его уровень несколько снизился и составил 6,98±0,73. Через 60 суток терапии показатель снизился до нормальных величин 5,31±0,98 ммоль/л.
Концентрация триглицеридов в крови до начала лечения была повышена, что связано с нарушением липидного обмена и составила 3,63±0,9 в 1-й группе и 3,45±0,7 ммоль/л во 2-й. Через 30 суток этот показатель в опытной группе снизился, но остался повышенным относительно нормы (2,43±0,83 ммоль/л). К моменту окончания лечения уровень триглицеридов отмечен на верхней границе нормы.
Уровень аланинаминотрансферазы в начале лечения был повышен и составил в 1-й группе 63,51, а во 2-й - 71,35±4,67 U/L, что свидетельствует в данном случае, вполне очевидно, о поражении ге- патоцитов. Через 30 суток терапии у животных опытной группы уровень АЛТ повысился по отношению к начальным данным и составил 69,89±2,43 U/L. На момент окончания лечения этот показатель достиг референсных величин.
Уровень лактатдегидрогеназы до начала лечения был несколько повышен, и постепенно снижался в процессе лечения.
Уровень щелочной фосфатазы до начала лечения составил 89,4±3,89 и 85,61±3,67 U/L в 1-й и 2-й группах, соответственно. Повышение этого показателя также свидетельствует о поражении печени. В процессе лечения уровень щелочной фосфатазы постепенно снижался и к концу лечения составил 68,25±2,1 U/L, что свидетельствует о некотором гепатопротективном влиянии комплексного препарата на основе полипренилфосфатов и бета-ситостерина.
Общий белок до начала лечения был повышен и составил в 1 группе 89,05±3,48 г/л и 92,31±4,01 г/л во второй, что можно объяснить как излишне калорийным питанием пациентов (о чем свидетельствовали данные анамнеза), так и воспалительным поражением печени на стадии декомпенсации. Через 30 суток терапии данный показатель снизился, но остался повышенным относительно нормы и составил 81,43±3,01, что может свидетельствовать о сохраняющихся воспалительных явлениях в печени. К концу лечения его уровень пришел в норму.
Уровень кальция был незначительно снижен в обеих группах до начала лечения, но уже к 30 суткам пришел в норму. Возможно, снижение уровня общего кальция связано с нарушением его всасывания из кишечника.
Уровень ионизированного кальция также понижен в обеих группах до начала терапии, но на 30-е сутки лечения достиг нормальных величин.
С-реактивный белок обнаруживался в крови на протяжении всего лечения. Однако, если в начале лечения его уровень составил 6,16±1,02 и 7,01±1,23 мкмоль/л в 1-й и 2-й группе, соответственно, в середине 5,37±1,84 мкмоль/л, то к концу лечения он снизился до 2,12±0,76, что говорит о присутствии воспалительных единиц при дислипидемиях и об их незначительном сохранении в конце эксперимента [1].
Результаты исследований показали, что дислипидемии регистрируются в 80% случаев у животных с поражением кожи и желудочно-кишечного тракта (40 голов из 50). Через 30 суток терапии Витапреном отмечается улучшение аппетита, у четырех животных сохранился галитоз, рвота и диарея прекратились. Брюшная стенка при пальпации мягкая и безболезненна. Шерстный покров тусклый, волос плохо удерживался в волосяной луковице. У некоторых животных алопеции, мокнущие экземы перешли в сухие. Нормализовался тургор кожи. В группе контроля пришлось прекратить наблюдение по причине негативных явлений, связанных с применением аторвас-татина. Гематологические изменения на протяжении всего периода лечения существенно не изменялись. Тем не менее, нормализация уровня гемоглобина, гематокрита и эритроцитов, что было связано с ослаблением интоксикации.
Нормализация уровня холестерина и триглицеридов (5,31±0,98 ммоль/л и 1,01±0,76 ммоль/л, соответственно) к окончанию эксперимента позволяет судить о восстановлении липидного обмена. Снижение концентрации аланинаминотрансферазы с 63,51±3,23 до 49,51±1,23 U/L свидетельствует о восстановлении гепатоцитов. Косвенно это подтверждается результатами динамики щелочной фосфатазы с 89,4±3,89 до 68,25±2,1 U/L и лактатдегидрогеназы с 274,36±10,31 до 201,48±7,67 U/L, и общего белка с 89,05±3,48 до 65,31±3,42 г/л. Динамика данных биохимических показателей, а также С-реактивного белка свидетельствует об ослаблении окислительного стресса. Выявление у всех пациентов гипертриглицеридемии и гиперхолестеринемии говорит о наличии у них метаболического синдрома (МС). В качестве нозологической единицы МС был введен в 2004 году. При МС нарушен обмен белков и липидов, к основным диагностическим показателям относят ожирение, гипертриглицери-демию, гиперхолестеринемию и др. В группе самого высокого риска находятся кастрированные коты и стерилизованные суки среднего возраста. Для коррекции МС рекомендуют диетотерапию, пребио-тики, пробиотики, противовоспалительные агенты, антиоксиданты, а также препараты центрального действия - симпатомиметики; для коррекции дислипидемии - никотиновую кислоту, ниацин [8]. Терапия статинами у собак и кошек не применяется из-за побочных реакций: рвоты, диареи, потери аппетита, абдоминальных болей. Поскольку проявления МС обратимы на любой стадии, кроме инсулинозависимой формы диабета, поиск средств его фармакокоррекции у МДЖ является высоко актуальной задачей [2]. В недавнем исследовании при фармакокоррекции МС у 4 собак и кошек с помощью Витапрена наблюдали нормализацию основных показателей липидного обмена, содержания в крови билирубина, щелочной фосфатазы и у - глутамил-транспептидазы, а также снижение повышенной массы тела [3].
Использованное в настоящей работе комплексного лекарственного средства под рабочим названием Витапрен относится к гиполи-пидемическим средствам. Входящие в его состав полипренилфосфаты, стимулируя продукцию ИФН I типа, подавляют активность SREBP2 (белка 2, связывающегося со стерол-регулирующими элементами) и, как следствие, синтез холестерина, а бета-ситостерин конкурентно ингибирует всасывание холестерина в кишечнике, подавляя его взаимодействие с рецепторами NPC1L1 - белка 1, похожего на белок Ниманна-Пика С1 [6]. Кроме того, полипренилфосфаты, подавляя активность ферментов 5-липоксигеназы и 15-липоксигеназы, оказывают противовоспалительное действие [4], а также защищают печень, стимулируя регенерацию гепатоцитов. Учитывая природное происхождение и доказанное при доклинических испытаниях отсутствие токсичности и побочных эффектов, комплексное лекарственное средство Витапрен может быть рассмотрено в качестве перспективного средства фармакокоррекции метаболичекого синдрома у мелких домашних животных.
Список литературы:
Резюме. Для коррекции у животных помимо диетотерапии используют пребиотики, фосфолипиды и противовоспалительные агенты, но их эффект, как правило, непродолжителен. В исследование было включено 40 собак разных половозрастных групп, разделенных на 2 группы. Собакам 1-й группы (опытная) при лечении давали комплексное лекарственное средство внутрь в дозе 3-6 мг/ кг веса 2 раза в сутки в течение 2 месяцев. Собакам 2-й группы (контрольная) - аторвастатин внутрь, 0,4 мг/кг веса. Авторы изучали эффективность нового комплексного лекарственного средства на основе полипренилфосфата натрия (ППН) и бета-ситостерина (рабочее название Витапрен) при гиперлипедемии. На момент начала лечения клинически у больных дислипидемиями наблюдали ослабление или отсутствие аппетита и жажды, галитоз, у некоторых животных - рвоту и диарею. Высокая пропорция дислипидемии у кастрированных собак связана с нарушением липидного обмена, возникшего в результате снижения уровня половых гормонов. Терапия статинами у собак и кошек не применяется из-за побочных реакций: рвоты, диареи, потери аппетита, абдоминальных болей. До начала лечения у всех собак наблюдали гиперхолестеринемию, ги-пертриглицеридемию, а также увеличенное содержание в крови билирубина, щелочной фосфатазы, у-глутамилтранспептидазы и С-реактивного белка. После 60-ти дней фармакокоррекции с помощью Витапрена все эти показатели пришли в норму или доставерно снизились. Учитывая природное происхождение и доказанное при доклинических испытаниях отсутствие токсичности и побочных эффектов, комплексное лекарственное средство Витапрен может быть рассмотрено в качестве перспективного средства фармакокоррекции метаболического синдрома у мелких домашних животных.
Ключевые слова: липидный обмен, дислипидемия, гиперлипидемия, холестерин, метаболический синдром, ожирение, фармакокоррекция, полипре-нилфосфат, бета-ситостерин, панкреатит, стеатоз печени.
Сведения об авторах
Санин Александр Владимирович, профессор, заведующий лабораторией клеточного иммунитета ФГБНУ "ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им.
Н.Ф.Гамалеи РАМН"; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail info@riem.ru.
Пронин Александр Васильевич, доктор биологических наук, профессор, заведующий лабораторией естественного иммунитета ФГБНУ "ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи РАМН"; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail info@riem.ru.
Наровлянский Алесандр Наумович, доктор биологических наук, профессор, заведующий лабораторией цитокинов ФГБНУ "ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи РАМН"; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail info@riem.ru.
Сосновская Ольга Юрьевна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник ФГБНУ "ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи РАМН"; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(499)1905851; e-mail info@ riem.ru.
Анников Вячеслав Васильевич, профессор, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры болезней животных и ВСЭ ФГБОУ ВПО "Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И.Вавилова"; 410012, г. Саратов, ул. Театральная пл., 1; тел.: (8452)233292; e-mail: rector@sgau.ru.
Беляева Мария Владимировна, аспирант кафедры болезней животных и ВСЭ ФГБОУ ВПО "Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И.Вавилова"; 410012, г. Саратов, ул. Театральная пл., 1; тел.: (8452)233292; e-mail: rector@sgau.ru.
Ответственный за переписку с редакцией: Кожевникова Татьяна Николаевна, кандидат медицинских наук, научный сотрудник ФГБНУ "ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи РАМН"; 123098, г. Москва, ул. Гамалеи, 18; тел.: 8(985)145-63-88; e-mail: tatiana@micro-plus.ru.
http://vetkuban.com/num3_201503.html