УДК 636.087.72:636.082:636:592
DOI 10.33861/2071-8020-2024-2-18-20
Кощаев А. Г., Косых А. В., Горковенко Н. Е., Шантыз А. Х. Федеральное государственное бюджетное образовательное
учреждение высшего образования «Кубанский государственный аграрный университет
имени И. Т. Трубилина», г. Краснодар
Перед современным птицеводством стоит важная задача, состоящая в обеспечении населения страны мясом птицы и птицепродуктами. При промышленном выращивании птицы, когда на ограниченной площади размещается огромное поголовье, возникает ряд факторов, отрицательно сказывающихся на состоянии их здоровья, среди которых наиболее значимы технологические стрессы и инфекционные болезни [2, 5, 6]. Последние птицеводам удается регулировать путем специфической профилактики наиболее значимых вирусных и бактериальных инфекций птиц с помощью иммунизации [3, 4]. При должном уровне напряженности поствакцинального иммунитета вакцинация птицы обеспечивает благополучие птицеводческих хозяйств по инфекционным болезням [8, 10]. Однако, эффективность иммунизации зависит от множества взаимосвязанных причин [10], в том числе от уровня естественной резистентности, степени полноценности рациона, условий содержания и других факторов. В настоящее время для оптимизации рационов птицы разрабатывается большое количество кормовых добавок для повышения яичной и мясной продуктивности [2, 5, 6, 9]. Вместе с тем, одним из важных свойств кормовых добавок является иммуностимулирующий эффект, обеспечивающий не только повышение уровня естественной резистентности птицы, но и адекватный иммунный ответ после вакцинации.
Целью нашего исследования было изучение влияния кормовой добавки кобаметин на биохимические показатели и иммунный ответ цыплят-бройлеров при вакцинации против болезни Ньюкасла. В задачи исследования входил серологический мониторинг интенсивности иммунного ответа цыплят-бройлеров в разные сроки после вакцинации против болезни Ньюкасла и анализ биохимических параметров сыворотки крови цыплят-бройлеров при включении в рацион кобаметина.
Материал и методы исследований. Исследование проведено на базе вивария научно-испытательного центра «Вет-фармбиоцентр» Кубанского государственного аграрного университета. Для проведения эксперимента были взяты 60 цыплят-бройлеров кросса «Росс 308» трехдневного возраста, которые находились на клеточном содержании. Были сформированы контрольная группа (n= 30) и опытная группа (n=30). Рацион контрольных цыплят-бройлеров состоял из комбикорма без включения добавки. Опытной группе кормовую добавку кобаметин в концентрации 2,0 кг/т включали в основной рацион с 4-дневного возраста и по 42-й день. Начиная с 43-го дня и до конца эксперимента цыплят опытной группы перевели на основной рацион.
Кормовая добавка кобаметин представляет собой хелатное соединение кобальта на органическом носителе, в качестве которого использована аминокислота метионин. Одной из важных функций метионина является инициирование трансляции белка и взаимодействие с матричной РНК, ее первым кодоном, это взаимодействие необходимо для образования пептидной связи, благодаря которой происходит построение молекул в цепочку белка. Кобальт повышает резистентность организма за счет активизации процесса фагоцитоза и выработки антител (А. И. Рыков, 1981). Также кобальт оказывает положительное действие на общее количество сывороточного белка за счет глобулиновой и альбуминовой фракций (В. Ф. Лемеш, 1980).
Для изучения влияния кобаметина на основные гематологические и биохимические показатели крови от пяти голов цыплят в каждой группе была взята кровь в конце эксперимента. Влияние кобаметина на иммунный ответ изучали на фоне вакцинации против болезни Ньюкасла. Для иммунизации цыплят применяли живую вакцину против ньюкаслской болезни из штамма «Бор-74 ВГНКИ», используя интраназальный метод вакцинации. Перед использованием вакцину разводили изотоническим раствором хлорида натрия (0,85%) с активной кислотностью в пределах pH 7,2-7,4. Объем изотонического раствора, которым разбавляли одну дозу вакцины, составил 0,1 см3. Одна капля разведенной вакцины содержала объем 0,05 мл. Согласно инструкции по применению вакцины одна доза для назального применения составляет 6,0 lg ЭИД50/см3 вируса болезни Ньюкасла. Вакцину с помощью пипетки цыплятам-бройлерам закапывали по 2 капли в одну ноздрю, вторая ноздря была закрыта пальцами рук для более глубокого проникновения вакцины в носовую полость птицы [7].
Первая вакцинация проводилась в 4-дневном возрасте, затем дважды цыплята ревакцинировались в возрасте 18 и 33 дней. Перед проведением иммунизации птица подвергалась клиническому осмотру с выборочной термометрией.
У цыплят-бройлеров всех групп, задействованных в эксперименте, через 14 дней после проведения вакцинации и каждой ревакцинации была взята кровь для серологического исследования в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с целью установления эффективности проведенной вакцинопрофилактики и интенсивности антителообразования в ответ на введение вакцины.
Результаты исследований и их обсуждение. Проведенная вакцинация считается эффективной, если спустя 14 суток не менее чем в 80% проб сыворотки крови привитой птицы титр антител в реакции торможения гемагглютинации составляет не менее 1:8 и выше. Полученные нами данные по определению титров антител в сыворотке крови цыплят-бройлеров представлены на рисунке 1.
Результаты определения титра антител в сыворотке крови цыплят-бройлеров показали, что через 2 недели после первой вакцинации иммунный ответ был наиболее слабым как в опытной, так и в контрольной группе. Вместе с тем в опытной группе цыплят по отношению к контролю уровень антител был в 1,16 раз выше. При этом у 66,7 % цыплят опытной группы титр антител находился в диапазоне 32-128 log2, в то время как в контрольной группе 50 % цыплят имели титры антител в диапазоне 4-8 log2.
Спустя две недели после первой ревакцинации (2-е исследование) средний титр антител к вирусу ньюкаслской болезни у цыплят-бройлеров был более чем в десять раз выше, чем после первой вакцинации в обеих группах, но у цыплят опытной группы относительно контроля этот показатель был в 1,3 раза больше. При этом у 76,7 % цыплят опытной группы титры антител находились в диапазоне 128-1024 log2, а в контрольной группе такие титры антител были только у 56,7 % цыплят.
Рис. 1. Динамика иммунного ответа цыплят-бройлеров после вакцинации против болезни Ньюкасла (на фоне применения кормовой добавки кобаметин)
Через 14 дней после проведения второй ревакцинации (3-е исследование), среднее количество антител у цыплят-бройлеров опытной группы было значительно выше этого показателя в контрольной группе цыплят, и составляло 231,9 log2 (разница с контролем достоверна, р<0,001). При этом у 60% цыплят опытной группы титры антител были довольно высокими и находились в диапазоне 64-1024 log2. Несколько иная картина по содержанию антител в сыворотке крови наблюдалась у цыплят-бройлеров контрольной группы. Отмечали значительное падение титра антител по сравнению с показателями после первой ревакцинации, в сравнении с показателями титра антител опытной группы, можно констатировать их уменьшение более чем в четыре раза. Вместе с тем самый высокий титр антител в этой группе составил 256 log2 и был выявлен только у 13,3 % цыплят.
Более высокий уровень антител у цыплят опытной группы мы склонны связывать с положительным влиянием на иммунную систему и процесс антителообразования кормовой добавки кобаметин, которую они получали дополнительно к основному рациону.
Определение титров антител в сыворотке крови цыплят после проведения иммунизации имеет важное практическое значение, поскольку их величина не только имеет решающее значение для принятия решения о ревакцинации, но и является показателем, определяющим степень защищенности поголовья от возбудителя болезни Ньюкасла. Если 20 % и более привитого поголовья имеет титр антител ниже 4 log2, уровень иммунной защиты недостаточный и следует немедленно проводить ревакцинацию. Результаты определения напряженности иммунитета у цыплят опытной группы и в контроле отражены в таблице 1.
Таблица 1 Напряженность иммунитета цыплят-бройлеров после иммунизации против болезни Ньюкасла (на фоне применения кормовой добавки кобаметин)
| Сроки исследования | Эффективность иммунизации, % | |
|---|---|---|
| Опытная группа | Контрольная группа | |
| 1 исследование | 76,7 | 70,0 |
| 2 исследование | 100 | 96,7 |
| 3 исследование | 96,7 | 76,7 |
Полученные нами результаты свидетельствуют, что после первой вакцинации, как в опытной, так и в контрольной группе иммунизированные цыплята имели уровень напряженности иммунитета ниже требуемого, так как 23,3 и 30% поголовья, соответственно, имели титр антител ниже 4 log2. Первая ревакцинация позволила добиться более высокого уровня напряженности иммунитета у привитых цыплят.
При исследовании напряженности иммунитета у цыплят после второй ревакцинации выявлена следующая картина. В контрольной группе этот показатель был на уровне 76,7% и даже не достиг порогового значения, тогда как в опытной группе напряженность иммунитета была значительно выше и составила 96,7%.
Полученные данные согласуются с результатами исследований Н. В. Садовникова, Р. Б. Кондратьева, 2010; И. В. Кукленковой с соавт., 2018; О. А. Миньковой с соавт., 2023; M. E. Sedeik et al., 2019; D. R. Kapczynski et al., 2013 [1, 8, 11, 12].
В конце эксперимента провели биохимическое исследование сыворотки крови цыплят обеих групп, результаты представлены в таблице 2.
Таблица 2 Влияние кормовой добавки кобаметин на биохимические показатели крови цыплят-бройлеров (n = 5)
| Наименование показателя | Значение показателя | |
|---|---|---|
| Опытная группа | Контрольная группа | |
| Гемоглобин, г/л | 124,08 ± 2,37 | 110,62 ± 3,45 |
| Глюкоза, ммоль/л | 7,06 ± 0,37* | 8,14 ± 0,38 |
| Общий белок, г/л | 53,78 ± 1,16* | 46,53 ± 1,13 |
| Кальций, ммоль/л | 2,42 ± 0,05* | 2,13 ± 0,06 |
| Фосфор, ммоль/л | 2,36 ± 0,13* | 2,24 ± 0,06 |
| Мочевая кислота, мкмоль/л | 68,32 ± 1,43 | 65,32 ± 1,52 |
| Щелочная фосфатаза, ед/л | 898,67 ± 18,10 | 1018,32 ± 16,41 |
| Холестерин, ммоль/л | 3,58 ± 0, | 4,38 ± 0,16 |
Примечание: *p<0,05 - различия достоверны в сравнении с контрольной группой
Биохимический анализ сыворотки крови цыплят в конце эксперимента показал достоверное увеличение количества гемоглобина в опытной группе относительно контрольной группы на 10,8%, что обусловлено наличием в кормовой добавке кобальта, играющем важную роль в процессе кроветворения. Также мы констатировали достоверное увеличение на 13,4% общего белка в сыворотке крови цыплят опытной группы по отношению к показателю контрольной группы. Данный факт можно объяснить тем, что содержащийся в кобаме-тине кобальт за счет включения его в коферментную часть сложных ферментов способствует активизации ферментативных процессов, осуществляющих синтез белков. Действие метионина также связано с активизацией синтеза белка в организме.
Кроме того, у цыплят опытной группы, получавшей кормовую добавку кобаметин в количестве 2,0 кг на тонну комбикорма, прирост живой массы был выше на 12,3% по сравнению с таковыми показателями контроля, при лучших показателях конверсии кормов (2,54 кг - в опытной группе против 2,80 кг в контрольной группе).
Заключение. Проведенными исследованиями установлено, что включение в рацион цыплят-бройлеров кормовой добавки кобаметин в количестве 2,0 кг/т кормов основного рациона оказывает положительное влияние на биохимический состав сыворотки крови цыплят, способствует формированию более напряженного иммунитета против болезни Ньюкасла у 97-100% поголовья. При этом у цыплят, получавших кобаметин, отмечали и более высокий уровень титров антител после иммунизации, который превышал показатели контрольной группы от 1,2 до 4,5 раз в разные сроки исследования. Кроме того, у цыплят, получавших в составе рациона кобаметин, были более высокие производственные показатели, что является основанием для рекомендации данной кормовой добавки к использованию в птицеводстве при выращивании цыплят-бройлеров.
Список литературы:
1. Влияние различных доз вирусвакцины против ньюкаслской болезни на напряженность иммунитета у разновозрастных птиц / И. В. Ку-кленкова, А. Г. Самоделкин, В. В. Сочнев [и др.] // Вестник Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии. 2018. № 3(19). С. 39-46. EDN VRGEXB.
2. Влияние функциональной кормовой добавки на продуктивность, иммунный статус и микробиом кишечника кур-несушек / Н. Е. Горковенко, Н. Н. Бондаренко, А. Н. Шевченко, Д. О. Алферов // Труды Кубанского государственного аграрного университета. 2023. № 104. С. 139-146.
3. Генно-инженерные вакцины: принципы и технологии получения / Н. Е. Горковенко, И. С. Жолобова, Н. Н. Гугушвили, Д. О. Алферов // Труды Кубанского государственного аграрного университета. 2022. № 94. С. 203-211. DOI: 10.21515/1999-1703-94-203-211.
4. Горковенко, Н. Е. Вирусологические методы исследования в ветеринарной практике / Н. Е. Горковенко. - Краснодар : Издательство «Новация», 2022. - 113 с. - ISBN 978-5-00179-286-4. - EDN ZCHEDP.
5. Горковенко, Н. Е. Влияние минерального адсорбента на динамику титров специфических антител бройлеров / Н. Е. Горковенко, Ю. А. Макаров // Институциональные преобразования АПК России в условиях глобальных вызовов: материалы II Международной конференции. 2018. С. 42.
6. Горковенко, Н. Е. Кормовые добавки для регуляции иммунобиологического статуса и продуктивности сельскохозяйственной птицы : монография / Н. Е. Горковенко. - Краснодар : КубГАУ, 2023. - 113 с.
7. Инструкция по применению вирусвакцины живой сухой против ньюкаслской болезни из лентогенных штаммов [Электронный текст]. -Официальный сайт VIDAL. Справочник лекарственных средств. Режим доступа : https://www.vidal.ru/veterinar/vaccine-281 74.
8. Минькова, О. А. Динамика роста титра антител у цыплят после иммунизации живой вакциной против болезни Ньюкасла / О. А. Минькова, М. С. Калмыкова, Е. И. Ярыгина // Актуальные проблемы ветеринарной медицины, зоотехнии, биотехнологии и экспертизы сырья и продуктов животного происхождения: Сборник трудов 2-й Научно-практической конференции. Москва: Сельскохозяйственные технологии, 2023. С. 265-266. EDN UFOYGT.
9. Патент на изобретение RU 2 806 138, С1. Кормовая добавка для кур несушек / А. Н. Шевченко, Н. Е. Горковенко, Н. Н. Бондаренко [и др.]. ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет». - Заявка: 2022134438, 26.12.2022. - Опубликовано: 26.10.2023. Бюл. № 30. 13 с.
10. Садовников, Н. В. Биологическая оценка качества промышленной вакцины против болезни Ньюкасла / Н. В. Садовников, Р. Б. Кондратьев // Аграрный вестник Урала. 2010. №1 (67).
11. Comparative efficacy of commercial inactivated Newcastle disease virus vaccines against Newcastle disease virus genotype VII in broiler chickens / M. E. Sedeik, A. R. Elbestawy, N. A. El-shall [et al.] // Poultry Science, V. 98, Issue 5, 2019, P. 2000-2007, ISSN 0032-5791, https://doi. org/10.3382/ps/pey559. (https://www.sciencedirect.com/science/article/ pii/S0032579119300483)
12. Kapczynski DR, Afonso CL, Miller PJ. Immune responses of poultry to Newcastle disease virus. Dev Comp Immunol. 2013 Nov;41(3):447-53. doi: 10.1016/j.dci.2013.04.012. Epub 2013 Apr 25. PMID: 23623955.
Резюме. Эпизоотическое благополучие птицеводческих хозяйств напрямую зависит от эффективности специфической профилактики инфекционных болезней птицы. При этом важное значение имеет интенсивность процесса антителообразования в ответ на введение вакцины. Количество образующихся после иммунизации антител зависит от состояния иммунной системы птицы, на которую в свою очередь воздействует целый ряд факторов, начиная от условий содержания и заканчивая рационом кормления. В данной статье рассматривается влияние кормовой добавки хелатного происхождения на организм цыплят-бройлеров, биохимические показатели сыворотки крови и степень интенсивности антителообразования после иммунизации против болезни Ньюкасла. В процессе исследования установлена закономерность, выражающаяся в более высокой степени напряженности поствакцинального иммунитета у птицы, получавшей кормовую добавку. При этом эффективность иммунизации составляла 97-100 %, а титр антител в сыворотке крови опытных цыплят превышал таковой показатель контрольной группы в 1,3 и 4,5 раз после первой и второй ревакцинации соответственно. Включение хелатной кормовой добавки в рацион опытных цыплят оказало положительное влияние и на биохимические параметры сыворотки крови, в частности на количество гемоглобина и общего белка. Практическая значимость полученных результатов заключается в том, что производству предложена новая эффективная кормовая добавка, включение которой в рацион цыплят-бройлеров способствует не только росту производственных показателей, но и повышению иммунного статуса птицы.
Ключевые слова: цыплята-бройлеры, иммунизация, болезнь Ньюкасла, вакцина, титр антител, напряженность иммунитета, сыворотка крови, кормовая добавка, прирост живой массы, конверсия корма.
Сведения об авторах:
Кощаев Андрей Георгиевич, доктор биологических наук, профессор, академик РАН, проректор по научной работе ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина»; 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13; тел.: 8-861-2214637; e-mail: koshhaev.a@kubsau.ru.
Косых Анастасия Валерьевна, аспирант ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина»; 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13; тел.: 8-918-9621364; e-mail: nastyantipova170196@icloud.com.
Шантыз Азамат Хазретович, доктор биологических наук, профессор, профессор кафедры биотехнологии, биохимии и биофизики ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Тру-билина»; 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13; тел.: 8-918-2735870; shah_8383@mail.ru
Ответственный за переписку с редакцией: Горковенко Наталья Евгеньевна - доктор биологических наук, профессор кафедры микробиологии, эпизоотологии и вирусологии ФГБОУ ВО КубГАУ, г. Краснодар, Россия, 350044, ул. Калинина, 13; телефон: +7-961-8584160; gorkovenko.n@kubsau.ru
http://vetkuban.com/num2_202405.html