Оценка влияния минерального адаптогена на морфогистохимию некоторых внутренних органов при иммуносупрессии у животных в эксперименте

УДК 636.028-573.38/576.08
DOI 10.33861/2071-8020-2023-1-29-34

Дрозд М.Н., Усевич В.М. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего образования «Уральский государственный аграрный университет», г. Екатеринбург

Современное развитие животноводства имеет повы-шенную техногенную нагрузку на организм животных и птицы, которая сопровождается повышенной стрессовой нагрузкой. Постоянные стрессы снижают иммунитет животных. На фоне сниженного иммунитета могут развиваться инфекционные, инвазионные и незаразные болезни. Любые болезни снижают продуктивность животных и птицы, а также отрицательно влияют на качество получаемой продукции. Кроме того, неблагоприятными факторами являются корма низкого качества, нарушения микроклимата и нарушения в технологии содержания животных и птиц. Для успешной работы по устранению негативных факторов, снижающих эффективность животноводства и птицеводства необходимо полное представление где, когда, зачем и почему необходимы те или иные ветеринарные мероприятия. Проводя экспериментальное исследование и изучая структуру внутренних органов при различных физиологических и патологических состояниях, на микроскопическом уровне можно понять механизм развития патологического процесса, какие структуры более подвержены разрушению и что позволяет сохранить их. Моделируя патологические процессы на лабораторных животных, можно отследить на каком этапе развития патологии изменения становятся фатальными и когда можно лекарственными средствами или другими манипуляциями и действиями поменять направление анагенеза негативного процесса на позитивный. Изучая гистохимические изменения в тканях и клетках, можно увидеть цветограмму биохимических процессов, что позволит сопоставить иммунобиохимические процессы с результатами биохимических исследований сыворотки крови.

В настоящее время, для нивелирования отрицательных последствий перечисленных факторов, в ветеринарной практике используются различные лекарственные средства, кормовые добавки, комплексы поливитаминов, пробиотики, лекарственные растения и биологически активные вещества. Все перечисленные средства можно отнести к группе адаптогенов, которая подразделяется на минеральные, органические (животные, микробиологические), растительные (природные) и синтетические (аптечные) препараты. Все эти адаптогены повышают естественную резистентность организма. Наиболее интересны те адапто-гены, которые оказывают максимально широкое действие и эффективны в отношении естественной резистентности и сохранности поголовья, а также оказывающие позитивное влияние на количество и качество получаемой продукции [3, 6, 11, 12].

На протяжении длительного времени идет поиск дешевых и эффективных средств защиты животных и птицы. Адаптогены отечественного производства получают из побочных продуктов фармацевтической, перерабатывающей животноводческой, природо-добывающей и металлургической промышленности [1, 8, 12]. Качество и безопасность адаптогенов для жизни и здоровья человека, животных и птицы определяют лаборатории медицинских и ветеринарных учреждений. Большое количество исследованных природных минеральных адаптогенов использовали как энтеросорбенты, поглощающие энтеротоксины различного происхождения. Применяемые сегодня минеральные адаптогены относятся к группе цеолитов, имеющих природное и искусственное происхождение [6, 9, 10].

Главное их общее преимущество заключается в строении кристаллической решетки, способной поглощать токсические и вредные вещества, а также механизм обогащения организма необходимыми минеральными веществами по принципу ионного обмена [13].

Принципиальная разница между ними заключается не только в количественном и качественном химическом составе, но и возможностях их обогащения необходимыми минералами, а также стабильности минерального состава. Все природные цеолиты имеют непостоянный химический состав, который зависит от глубины залегания добываемого пласта. На его химический состав накладывают отпечаток климатические условия периода его формирования. Искусственные цеолиты в результате технологической переработки имеют постоянный химический состав, который может быть изменен в соответствии с требованиями технического регламента или запросов животноводства. У искусственных цеолитов исходным сырьем является побочный продукт алюминиевого производства, природным ископаемым для которого являются природные бокситы. Уровень залегания этих минералов значительно глубже, это более древние структуры, имеющие постоянные условия формирования. В связи с этим наиболее интересен минеральный адаптоген со стабильным минеральным составом [2, 5, 7]. Проведенные ранее исследования по химическому составу показали, что количество минеральных веществ в нем более тридцати, четыре из которых являются нейтральными в отношении обменных процессов в организме. Кроме того, минеральный адаптоген обогащен стабилизированным йодом. Но до последнего времени нет окончательных сведений о иммунопротективном действии минеральных адаптогенов на уровне обменных процессов в целом, на клеточном и внутриор-ганном уровне [4].

В связи со всем вышеперечисленным поиск эффективных средств профилактики отрицательных последствий стресса является актуальной задачей практической ветеринарии. В качестве такого средства используют кормовую минеральную добавку под торговым названием «БШ-ВИТ» (ООО «Сорбент-К», Россия), ранее использовавшуюся как энтеросорбент и источник макро- и микроэлементов [1, 8, 9]. Полученные положительные результаты его применения стали причиной более глубокого изучения на уровне органов, тканей и клеток.

Целью исследования стало определение иммуно- и органопро-тективного действия на уровне клеток и тканей некоторых внутренних органов лабораторных животных в условиях индуцированной иммуносупрессии. Нами поставлены следующие задачи:

— определить морфологическую структуру органов на фоне искусственной иммуносупрессии и профилактического использования минерального адаптогена;

— выяснить на гистохимическом уровне изменения в клетках и тканях органов на фоне искусственной иммуносупрессии и профилактического применения минерального адаптогена.

Материалы и методы исследований. Исследования проводили в условиях лаборатории кафедры инфекционной и незаразной патологии ФГБОУ ВО Уральского госагроуниверситета, в лаборатории иммунобиохимии ФГБНУ УрФАНИЦ УрО РАН, гистологической лаборатории ЦНИЛ ФГБОУ ВО Уральского госме-дуниверситета. Для исследования подбирали 3-месячных белых беспородных крыс живой массой 250 г обоих полов поровну, по 15 голов в каждой группе. Животных в группы подбирали по принципу аналогов. Животных разделили на две группы - контрольную и опытную. Все животные всех групп получали одинаковый рацион и водный режим, для кормления использовали комбикорм «Little-one-rats».

Для определения режима профилактического использования минерального адаптогена провели исследование по определению его влияния на микроструктуру селезенки. Для этого рандом-но разделили 9 белых беспородных лабораторных крыс на три группы: первая группа - контроль, вторая группа - минеральный адаптоген курсами по две недели с 7-дневным интервалом и третья группа - минеральный адаптоген скармливали постоянно в течение 30 дней.

После этого всех животных вывели из опыта и провели гистологическое и морфометрическое сравнение структуры селезенки. По результатам этого исследования была определена схема скармливания минерального адаптогена в основном экспериментальном исследовании.

В основном экспериментальном исследовании в контрольную группу вошли здоровые животные, которых не подвергали никаким воздействиям на протяжении трех недель (интактные), в опытную группу - животные, получавшие минеральный адапто-ген на протяжении всего периода исследования до и после искусственно индуцированной иммуносупрессии. Схема опыта представлена в таблице 1.

Таблица 1 Схема опыта

Группа

Корм «Little-one- rats» и вода питье­вая артезианская

Иммуносупрессия на 21 день от начала исследо­вания

Опытная группа 1 - минераль­ный адаптоген постоянно в дозе 0,3 г на кг живой массы

+

+

Опытная группа 2 - минеральный адаптоген 2 курса­ми по 14 дней с интервалом 7 дней в дозе 0,3 г на кг живой массы

+

-

Контроль - интактные животные

+

+

Перед началом исследования из каждой группы было выведено из опыта по 6 голов (по 3 самки и 3 самца) для определения исходного состояния и микроструктуры некоторых органов (селезенка, печень почки, надпочечники, желудок и тонкая кишка). Крысам опытных групп скармливали минеральный адаптоген -кормовую минеральную добавку БШ-ВИТ в смеси с комбикормом «Little-one-rats», в контрольной группе - только комбикорм и воду. В опытной группе минеральный адаптоген скармливали в дозе 0,3 г на 1 кг живой массы общим объемом 0,075 г на голову. Корм задавали 2 раза в сутки. Через 21 день от начала скармливания минерального адаптогена у животных обоих групп искусственно вызывали состояние иммуносупрессии с помощью однократного внутримышечного введения дексаметазона в дозе 0,5 мг и суспензии гидрокортизона ацетата 2,5% в дозе 20 мг на 100,0 г живой массы.

Через 7 и 14 суток от момента искусственно индуцированной иммуносупрессии во всех группах выводили из опыта по 6 крыс (поровну самок и самцов) из каждой группы животных и проводили отбор материала для гистологического исследования.

Для гистологического и гистохимического исследования отбирали кусочки печени, селезенки, надпочечников, почек, желудка и тонкой кишки. Полученный материал фиксировали раствором формалина 10% концентрации. После фиксации обезвоживали спиртами повышающейся концентрации и по общепринятой методике заливали в парафин. Для приготовления гистологических срезов использовали роторный микротом НМ-450 Microm. Окраску срезов производили гематоксилином и эозином и на выявление мукополисахаридов - шик-реакцией с реактивом Шиффа. Для изучения гистосрезов пользовались световым микроскопом Olympus CX41 при увеличении х100, 200, 400, 1000. Микрофотосъемку осуществляли цифровой фотокамерой Levenhuk C130 NG для документирования наиболее общих изменений в группах сравнения.

Полученный цифровой материал подвергался статистической обработке в программе Excel. Считывали среднеарифметическую ошибку (М) и ошибку среднего арифметического (m). Достоверность разницы оценивали по t-критерию Стьюдента. Достоверными считали результаты при Р<0,05.

Результаты исследований и их обсуждение. В результате сравнения микроструктуры селезенки на фоне постоянного и курсового скармливания минерального адаптогена было установлено, что структура органа соответствовала структуре интактных - контрольных животных (табл. 2).

Таблица 2 Морфометрические показатели состояния белой пульпы селезенки при введении в корм минерального адаптогена (средний диаметр фолликулов, мкм) в разных схемах введения, М±т

Группа

Интактный контроль

Мине­ральный адаптоген постоянно

%

Мине­ральный адаптоген курсами

%

Диаметр фоллику­лов, мкм

413,7±135,1

434,0±74,9

4,9

491,5±87,7

18,8

Диаметр центра фоллику­лов, мкм

234,0±76,0

255,4±75,6

9,1

232,7±76,3

0,6

Показатели белой пульпы селезенки при введении в корм минерального адаптогена в разных режимах статистически достоверно не отличаются от интактного контроля (хотя и несколько выше).

В связи с этим, для дальнейших исследований минеральный адаптоген скармливался одним курсом 4-5 недель. На этом фоне была искусственно воспроизведена иммуносупрессия и результаты морфометрически имели достоверные отличия (табл. 3).

Таблица 3 Морфометрические показатели состояния белой пульпы селезенки (средний диаметр фолликулов, мкм), М±т

Группа

Интактный контроль

Иммуносу­прессия

Минеральный адаптоген и им­муносупрессия

Диаметр фолликулов, мкм

413,7+115,1

186,3+70,0*

488,6+104,3

Диаметр центра фолликулов, мкм

234,0+46,0

134,5+30,9*

329,5+104,3

Примечание: * - P < 0,05.

Для оценки иммуносупрессивного эффекта провели оценку микроморфологической структуры стрессозависимого органа -надпочечников. При этом было установлено, что микрокартина органа не претерпела изменений в сравнении с группой интактных здоровых животных (контроль). Структура надпочечников имела характерное строение и деление на корковую и мозговую зоны, снаружи покрыта капсулой, представленной соединительной тканью (рисунок 1, 4).

При индуцированной иммуносупрессии происходит утолщение соединительнотканной капсулы органа и некоторое увеличение количества лимфоидных клеток в корковой зоне. Мозговая зона имела типичную структуру (рисунок 2, 5).

При индуцированной иммуносупрессии на фоне скармливания минерального адаптогена также отмечали утолщение соединительнотканной капсулы органа некоторое увеличение объема корковой зоны за счет миграции в нее лимфоидных клеток. При этом структура мозговой зоны имела типичное строение (рисунок 3, 6).

Рис. 1. Надпочечник. Группа интактных животных <br>(окраска гематоксилин и эозин, *200)
Рис. 1. Надпочечник. Группа интактных животных
(окраска гематоксилин и эозин, *200)
Рис. 2. Надпочечник. Группа животных с <br>иммуносупрессией (окраска гематоксилин и эозин, <br>*200)
Рис. 2. Надпочечник. Группа животных с
иммуносупрессией (окраска гематоксилин и эозин,
*200)
Рис. 3. Надпочечник. Группа животных с <br>иммуносупрессией на фоне скармливания <br>минерального адаптогена (окраска гематоксилин и <br>эозин, *200)
Рис. 3. Надпочечник. Группа животных с
иммуносупрессией на фоне скармливания
минерального адаптогена (окраска гематоксилин и
эозин, *200)
Рис. 4. Группа интактных животных. Типичная <br>структура надпочечника с хорошо выраженной <br>структурой органа и заметным делением на корковую <br>и мозговую зону (окраска гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 4. Группа интактных животных. Типичная
структура надпочечника с хорошо выраженной
структурой органа и заметным делением на корковую
и мозговую зону (окраска гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 5. Группа животных с иммуносупрессией. <br>Сохраненная структура надпочечника, увеличение <br>лимфоидных клеток в корковой зоне, утолщение <br>соединительнотканной оболочки (окраска <br>гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 5. Группа животных с иммуносупрессией.
Сохраненная структура надпочечника, увеличение
лимфоидных клеток в корковой зоне, утолщение
соединительнотканной оболочки (окраска
гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 6. Группа животных с иммуносупрессией на фоне <br>скармливания минерального адаптогена. Утолщение <br>поверхностного слоя соединительнотканной оболочки, <br>увеличение лимфоцитов в корковом слое <br>надпочечника, в мозговом слое сохраненная <br>структура органа (окраска гематоксилин и эозин, <br>*400)
Рис. 6. Группа животных с иммуносупрессией на фоне
скармливания минерального адаптогена. Утолщение
поверхностного слоя соединительнотканной оболочки,
увеличение лимфоцитов в корковом слое
надпочечника, в мозговом слое сохраненная
структура органа (окраска гематоксилин и эозин,
*400)

При исследовании микроструктуры почек в группе интактного контроля отмечали типичное строение клубочкового эпителия и извитых канальцев, при этом хорошо видны щеточные каемки, эпителий извитых канальцев в функционально-активном состоянии (рисунок 7).

При иммуносупрессии в извитых канальцах встречаются участки с нарушениями щеточной каемки, дегенеративными изменениями в эпителии и десквамацией клеток эпителия (рисунок 8).

При изучении микроструктуры почки корковой зоны в группе животных с искусственно индуцированной иммуносупрессией на фоне скармливания минерального адаптогена отмечали очаговые нарушения щеточной каемки (рисунок 9).

Рис. 7. Почка - состояние щеточной каемки эпителия <br>извитых канальцев. Группа интактных животных <br>(окраска гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 7. Почка - состояние щеточной каемки эпителия
извитых канальцев. Группа интактных животных
(окраска гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 8. Почка - дистрофические изменения в эпителии <br>извитых канальцев, нарушение щеточной каемки и <br>участки десквамации. Группа животных с <br>иммуносупрессией (окраска гематоксилин и эозин, <br>*400)
Рис. 8. Почка - дистрофические изменения в эпителии
извитых канальцев, нарушение щеточной каемки и
участки десквамации. Группа животных с
иммуносупрессией (окраска гематоксилин и эозин,
*400)
Рис. 9. Почка - состояние щеточной каемки эпителия <br>извитых канальцев. Группа интактных животных <br>(окраска гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 9. Почка - состояние щеточной каемки эпителия
извитых канальцев. Группа интактных животных
(окраска гематоксилин и эозин, *400)

При проведении морфометрических исследований по потере щеточной каемки на единицу площади, занимаемую извитыми канальцами, эти изменения заметно отличались (табл. 4).

Таблица 4 Состояние щеточной каемки эпителия извитых канальцев почки

Группа

Интактный контроль

Иммуносу­прессия

минеральный адаптоген и им­муносупрессия

% потери щеточной каемки эпителия канальцев

19

51

29

При иммуносупрессии у интактных крыс отмечаются дистрофические изменения в эпителии извитых канальцев, в эпителии извитых канальцев процент потери щеточной каемки существенно увеличивается, по сравнению с интактным контролем (различия статистически достоверны).

При использовании в корм минерального адаптогена - в извитых канальцах почки потеря щеточной каемки в эпителии встречается чаще, чем в контроле (в 29% против 19% в контроле), но изменения менее выражены, чем при иммуносупрессии у интактных крыс.

При изучении микроструктуры печени у интактных крыс структура органа имеет типичное строение. Дольки печени хорошо выражены, сосуды триады и желчный проток видны и имеют типичную структуру, орган и гепатоциты находятся в функционально активном состоянии. Цитоплазма гепатоцитов мелкозернистая, ядра округлые, небольших размеров, встречаются единичные двуядерные гепатоциты. Портальные тракты не расширены, в портальной строме заметны единичные лимфоциты (рисунок 10).

Рис. 10. Дольковое строение печени сохранено, <br>гепатоциты формируют печеночные балки. Группа <br>интактных животных (окраска гематоксилин и эозин, <br>*400)
Рис. 10. Дольковое строение печени сохранено,
гепатоциты формируют печеночные балки. Группа
интактных животных (окраска гематоксилин и эозин,
*400)
Рис. 11. Выраженные дистрофические изменения в <br>гепатоцитах (белковая и мелкокапельная жировая <br>дистрофии). Группа животных с иммуносупрессией <br>(окраска гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 11. Выраженные дистрофические изменения в
гепатоцитах (белковая и мелкокапельная жировая
дистрофии). Группа животных с иммуносупрессией
(окраска гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 12. Выраженная белковая дистрофия <br>гепатоцитов. Группа животных с иммуносупрессией на <br>фоне скармливания минерального адаптоге-на <br>(окраска гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 12. Выраженная белковая дистрофия
гепатоцитов. Группа животных с иммуносупрессией на
фоне скармливания минерального адаптоге-на
(окраска гематоксилин и эозин, *400)

При индуцированной иммуносупрессии в печени крыс отмечаются выраженные дистрофические изменения в гепатоцитах с развитием белковой и мелкокапельной жировой дистрофии, желчный проток значительно расширен и отмечаются признаки вазодилятации (рисунок 11).

В группе иммуносупрессии на фоне скармливания минерального адаптогена также заметны дистрофические изменения, но они более сглажены. Гепатоциты подвергаются белковой дистрофии, желчный проток умеренно расширен. Сосуды триады артерия и вена немного расширены (рисунок 12).

При проведении гистохимического исследования на содержание гликогена и мукополисахаридов (МПС) в гепатоцитах и межклеточном веществе - соединительно-тканной строме органа у интактных животных Шик-реакцией выявили значительное содержание гликогена и МПС в гепатоцитах и соединительнотканной строме, желчный проток незначительно расширен, что соответствует состоянию печени здоровых животных (рисунок 13).

Рис. 13. Печень. Шик-реакция Группа интактных <br>животных (окраска с реактивом Шиффа, *400)
Рис. 13. Печень. Шик-реакция Группа интактных
животных (окраска с реактивом Шиффа, *400)
Рис. 14. Печень - резкое обеднение гепатоцитов <br>гликогеном. Шик-реакция. Группа животных с <br>иммуносупрессией (окраска с реактивом Шиффа, <br>*400)
Рис. 14. Печень - резкое обеднение гепатоцитов
гликогеном. Шик-реакция. Группа животных с
иммуносупрессией (окраска с реактивом Шиффа,
*400)
Рис. 15. Печень. Снижение содержания гликогена в <br>гепатоцитах. Шик-реакция. Группа животных с <br>иммуносупрессией на фоне скармливания <br>минерального адаптогена (окраска с реактивом <br>Шиффа, *400)
Рис. 15. Печень. Снижение содержания гликогена в
гепатоцитах. Шик-реакция. Группа животных с
иммуносупрессией на фоне скармливания
минерального адаптогена (окраска с реактивом
Шиффа, *400)

При иммуносупрессии отмечали значительное уменьшение количества гликогена в гепатоцитах, за счет неоглюкогенеза, вызванного иммуносупрессией. Гликоген и МПС частично определяются только в строме органа. Цитоплазма гепатоцитов содержит большее количество жировых включений. Желчный проток значительно расширен, отмечается периваскулярный отек (рисунок 14).

При иммуносупрессии на фоне скармливания минерального адаптогена гепатоциты также теряют гликоген, в результате неоглюкогенеза, вызванного иммуносупрессией, но в некоторых гепатоцитах и строме печени отмечается небольшое количество гликогена и МПС, расширение желчного протока и признаки отека в области триады (рисунок 15).

Слизистая желудка у интактных крыс представлена гастро-цитами, находящимися в функционально активном состоянии, имеет складчатое строение (рисунок 16).

При иммуносупрессии заметно некоторое уплотнение складок слизистой оболочки желудка. Состояние гастроцитов без видимых изменений (рисунок 17).

У животных после иммуносупрессии на фоне скармливания минерального адаптогена с кормом заметных отличий в гистоструктуре гастроцитов не наблюдали (рисунок 18).

Анализ гистоструктуры слизистой желудка у крыс (интактных, после иммуносупрессии и иммуносупрессии на фоне скармливания минерального адаптогена) показал, что существенных морфологических изменений не выявлено. Структура слизистой желудка крыс во всех группах сравнения сохранена.

Рис. 16. Слизистая оболочка желудка. Группа <br>интактных животных (окраска гематоксилин и эозин, <br>*400)
Рис. 16. Слизистая оболочка желудка. Группа
интактных животных (окраска гематоксилин и эозин,
*400)
Рис. 17. Слизистая оболочка желудка. Группа <br>животных с иммуносупрессией (окраска <br>гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 17. Слизистая оболочка желудка. Группа
животных с иммуносупрессией (окраска
гематоксилин и эозин, *400)
Рис. 18. Слизистая оболочка желудка. Группа <br>животных с иммуносупрессией на фоне скармливания <br>минерального адаптогена (окраска гематоксилин и <br>эозин, *400)
Рис. 18. Слизистая оболочка желудка. Группа
животных с иммуносупрессией на фоне скармливания
минерального адаптогена (окраска гематоксилин и
эозин, *400)

При исследовании гистоструктуры слизистой оболочки тонкого отдела кишечника у крыс контрольной группы отмечали обычное строение ворсинок и энтероцитов. Энтероциты находились в функционально активном состоянии (рисунок 19).

В группе животных при индуцированной иммуносупрессии в тонкой кишке по сравнению с контрольной группой статистически значимо уменьшилось содержание межэпителиальных лимфоцитов (МЭЛ) в ворсинках, что можно рассматривать как проявление общей тенденции угнетения лимфоидных производных в разных органах (рисунок 20).

В группе животных с иммуносупрессией на фоне профилактического скармливания минерального адаптогена отмечается не только восстановление количества межэпителиальных лимфоцитов (МЭЛ) в ворсинках тонкой кишки, но и некоторое превышение контрольных значений, что может быть связано с местной реакцией иммунной системы кишечника на введение минерального адаптогена (рисунок 21). Кроме этого, при индуцированной иммуносупрессии введение минерального адаптогена в корм не привело к существенному изменению количества бокаловидных клеток в эпителии ворсинок тонкой кишки по сравнению с контрольной группой.

Рис. 19. Слизистая оболочка тонкой кишки. Шик-<br>реакция. Группа интактных животных (окраска с <br>реактивом Шиффа, X10Q)
Рис. 19. Слизистая оболочка тонкой кишки. Шик-
реакция. Группа интактных животных (окраска с
реактивом Шиффа, X10Q)
Рис. 20. Слизистая оболочка тонкой кишки. Шик-<br>реакция. Группа животных с иммуносупрессией <br>(окраска с реактивом Шиффа, X100)
Рис. 20. Слизистая оболочка тонкой кишки. Шик-
реакция. Группа животных с иммуносупрессией
(окраска с реактивом Шиффа, X100)
Рис. 21. Слизистая оболочка тонкой кишки. Шик-<br>реакция. Группа животных с иммуносупрессией на <br>фоне скармливания минерального адапто-гена <br>(окраска с реактивом Шиффа, X100)
Рис. 21. Слизистая оболочка тонкой кишки. Шик-
реакция. Группа животных с иммуносупрессией на
фоне скармливания минерального адапто-гена
(окраска с реактивом Шиффа, X100)

В группе интактных животных среди эпителиоцитов определяются бокаловидные клетки. ШИК-позитивная каемка эпителиоцитов сохранена (рисунок 22).

В группе крыс с индуцированой иммуносупрессией в слизистой тонкой кишки ШИК-позитивная каемка эпителиоцитов сохранена, в ворсинках понижено количество межэпителиальных лимфоцитов по сравнению с интактным контролем. Среди эпителиоцитов определяются бокаловидные клетки (рисунок 23).

У крыс в группе на фоне профилактического скармливания минерального адаптогена с последующей иммуносупрессией слизистая тонкой кишки крыс существенно не отличается от группы интактного контроля. Шик-позитивная каемка сохранена (рисунок 24).

Рис. 22. Слизистая оболочка тонкой кишки. ШИК-<br>позитив-ная каемка эпителиоцитов сохранена. Шик-<br>реакция. Группа интактных животных (окраска с <br>реактивом Шиффа, X400)
Рис. 22. Слизистая оболочка тонкой кишки. ШИК-
позитив-ная каемка эпителиоцитов сохранена. Шик-
реакция. Группа интактных животных (окраска с
реактивом Шиффа, X400)
Рис. 23. Слизистая оболочка тонкой кишки. ШИК-<br>позитив-ная каемка эпителиоцитов сохранена, в <br>ворсинках понижено количество межэпителиальных <br>лимфоцитов. Шик-ре-акция. Группа животных с <br>иммуносупрессией (окраска с реактивом Шиффа, <br>X400)
Рис. 23. Слизистая оболочка тонкой кишки. ШИК-
позитив-ная каемка эпителиоцитов сохранена, в
ворсинках понижено количество межэпителиальных
лимфоцитов. Шик-ре-акция. Группа животных с
иммуносупрессией (окраска с реактивом Шиффа,
X400)
Рис. 24. Слизистая оболочка тонкой кишки. Шик-пози-<br>тивная каемка сохранена. Шик-реакция. Группа <br>животных с иммуносупрессией на фоне скармливания <br>минерального адаптогена (окраска с реактивом <br>Шиффа, X400)
Рис. 24. Слизистая оболочка тонкой кишки. Шик-пози-
тивная каемка сохранена. Шик-реакция. Группа
животных с иммуносупрессией на фоне скармливания
минерального адаптогена (окраска с реактивом
Шиффа, X400)

При определении функционального состояния тонкой кишки в контрольной и опытной группах дополнительно проведено морфометрическое исследование: подсчет межэпителиальных лимфоцитов (МЭЛ) на 100 эпителиоцитов ворсинки тонкой кишки и подсчет количества бокаловидных клеток на 100 эпителиоцитов (табл. 5).

Таблица 5 Морфометрические показатели состояния тонкой кишки крыс при иммуносупрессии, М±т

Группа

Интактный контроль

Иммуно­супрессия

Минеральный адаптоген им­муносупрессия

Количество бока­ловидных клеток на 100 эпителиоцитов ворсинок, %

13,8±4,6

13,5±2,7

11,0±3,1

Количество МЭЛ на 100 эпителиоцитов ворсинок тонкой кишки

19,2±2,0

9,25±3,3*

25,5±2,1*

Примечание: * - P < 0,05.

Из данных таблицы видно, что по количеству бокаловидных клеток в слизистой оболочке ворсинок во всех группах показатели колеблются в статистически не значимых пределах, но показатели содержания межэпителиальных лимфоцитов на 100 эпителиоцитов ворсинки тонкой кишки показатели достоверно отличаются, что можно рассматривать как проявление общей тенденции угнетения лимфоидных производных в разных органах при искусственно индуцированной иммуносупрессии.

Повышение количества лимфоцитов в группе профилактического скармливания минерального адаптогена может быть результатом местной реакции иммунной системы кишечника на введение минерального адаптогена, при иммуносупрессии слизистая кишки сохранила свою функцию. Это подтверждает иммунопротективное действие минерального адаптогена.

Заключение. Анализ проведенных исследований показал, что искусственно индуцированная иммуносупрессия оказывает негативный эффект на структуру органов и тканей организма животных, наиболее чувствительными к этому воздействию оказались клетки и органы иммунной системы всех уровней. Выраженные изменения в структуре клеток отмечали в почках и печени. Менее выраженные изменения фиксировали в надпочечниках, слизистой тонкой кишки. Отсутствие видимых изменений регистрировали лишь в слизистой оболочке желудка. Выявленные изменения подтверждали морфометрическими измерениями, при которых был подтвержден иммуно- и органо-протективный эффект применяемого с профилактической целью минерального адаптогена. Гистохимическими исследованиями было установлено изменение обменных процессов на уровне клеток и доказаны изменения в органах не только на структурном, но и метаболическом (гистохимическом) уровне. При профилактическом скармливании минерального адаптогена изменения в органах не имели тотальной деструкции, приближаясь по структуре и обменным процессам в клетках к структуре этих органов у интактных животных. При проведении морфометрического анализа статистически достоверно отмечается выживание клеток иммунной системы не только в центральных, но и периферических органах и внутриорганных структурах внутренних органов при профилактическом скармливании минерального адаптогена с последующей иммуносупрессией.

Список литературы:

1. Бодрова О. С., Донник И. М. Применение иммуномодулирующих препаратов к сухим и сухостойным коровам с тяжелым иммунодефицитом // Кормление сельскохозяйственных животных и кормопроизводство. - 2016. - № 2. - С. 48-59.

2. Галиев Д. М., Шацких Е. В. Влияние кормовой добавки БШ на мясную продуктивность цыплят-бройлеров // Производство племенной продукции (материала) по направлениям отечественного племенного животноводства на основе ускоренной селекции: сборник материалов международной научно-практической конференции «Стратегические задачи по научно-технологическому развитию АПК». - Екатеринбург, 2018. - С. 33-37.

3. Донник И. М., Неверова О. П., Горелик О. В. Качество молозива и сохранность телят в условиях использования природных энтеросорбентов // Аграрный вестник Урала. - 2016. - № 7 (149). - С. 4-8.

4. Дрозд М. Н., Усевич В. М. Морфологическая оценка эффективности кормовой минеральной добавки в профилактике болезней органов пищеварения в период активного роста у цыплят-бройлеров // Разработка отечественных ветеринарных препаратов и способов профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных и птиц: сборник материалов международной научно-практической конференции «Стратегические задачи по научно-технологическому развитию АПК». - Екатеринбург, 2018. - С. 116-121.

5. Кундрюкова У. И., Дроздова Л. И. Ветеринарно-санитарная и морфологическая оценка мускулатуры бедренной и грудной групп мышц цыплят-бройлеров с низшей категорией упитанности // Научная жизнь. -2018. - № 12. - С. 222-231.

6. Подходы к коррекции иммунобиологического профиля животных / Е. Н. Беспамятных, А. С. Кривоногова, И. М. Донник, А. Г. Исаева // Ветеринария Кубани. - 2018. - № 5. - С. 10-13.

7. Шацких Е. В., Галиев Д. М. Минеральный сорбент в комбикормах для цыплят-бройлеров // Птицеводство. - 2018. - № 11-12. - С. 45-49.

8. Шацких Е. В., Латыпова Е. Н., Несват Е. Г. Использование антистрессовых препаратов в яичном птицеводстве: монография // Екатеринбург: Издательство Уральского ГАУ. - 2016. - 202 с.

9. Cecchini S., Rossetti M., Caputo A., Bavoso A. Effect of dietary inclusion of a commercial polyherbal Formulation on some physiological and immune parameters in healthy and stressed hens // Czech Journal of Animal Science. 2019. No. 64. Pp. 448-458.

10. Cecchini S., Rossetti M., Di Tomaso F., Caputo A. R. Evaluation of the effects of dexamethasone induced stress on levels of natural antibodies in immunized laying hens // Veterinary Immunology and Immunopathology. -2016. - Vol. 177. - pp. 35-41.

11. Donnik I. M., Loretts O. G., Barashkin M. I., Sadovnikov N. V., Shusharin A. D., Elesin A. V., Semenova N. N. Reviewing the influence of copper, lead and zinc accumulation on the morphofunctional liver and kidney state in broiler chickens under experimental toxicosis // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. 2018. -Т. 9. - No. 6. - pp. 859-873.

12. Loretts O. G., Donnik I. M., Bykova O. A., Neverova O. P., Gumenyuk O. A., Shakirova S. S., Meshcheriakova G. V. Nonspecific resistance of broilers on the background of application of a herbal complex of biologically active compounds under the conditions of industrial technology // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2018. -Т. 9. - No. 6. - pp. 1679-1687.

13. Mamta, Jakhar K. K. Protective effects of Tinospora condifolia on clinical manifestations of experimental colibacillosis in broiler chicken // Haryana Veterinarian. - 2016. - Vol. 55. - pp. 145-148.

Резюме. Современные технологические условия содержания и эксплуатации животных и птицы подвергают их постоянному стрессу, что ведет к снижению резистентности организма, повышению заболеваемости и падежа. Кроме того, снижается количество и качество получаемой продукции. Профилактика стрессов способствует повышению резистентности организма. Поиск эффективных средств профилактики стрессовых реакций организма в животноводстве и птицеводстве является актуальной проблемой практической ветеринарии. Полиминеральные кормовые добавки природного и искусственного происхождения могут проявлять адаптогенные свойства. Авторами проведена оценка иммуно- и органо-протективной активности минерального адаптогена отечественного производства в условиях эксперимента. Для подтверждения эффективности минерального адаптогена проводили гистологическое, морфометрическое и гистохимическое исследование стрессозависимых органов, органов непосредственно контактирующих с минеральным адаптогеном, органами выведения продуктов обмена и органа регулирующего гомеостаз в организме. В ходе проведенных исследований установлено, что при иммуносупрессии происходит подавление органов и структур иммунной системы всех уровней во всех органах. Авторами по результатам опыта выявлена органопротекторная функция минерального адаптогена. Определены наиболее чувствительные органы к действию неблагоприятных факторов (печень, почки, надпочечники). Морфометрически определена достоверность морфологических изменений в органах. При профилактическом скармливании минерального адаптогена в исследуемых органах (селезенка, надпочечник, почки, печень, желудок, тонкая кишка) выявленные изменения не имели тотальной деструкции, приближаясь по структуре и обменным процессам в клетках к структуре этих органов у интактных животных. Впервые проведена сравнительная морфогистохимическая и морфометрическая оценка некоторых внутренних органов в организме животных в условиях искусственно индуцированной иммуносупрессии, подтверждающих имуно- и органопротективный эффект минерального адаптогена - минеральной кормовой добавки отечественного производства.

Ключевые слова: стресс, иммуносупрессия, адаптоген, гомеостаз, гистология, гистохимия, морфометрия, лабораторные животные, кормовая добавка, профилактика стрессов.

Сведения об авторах:

Дрозд Марья Николаевна, аспирант, ассистент кафедры инфекционной и незаразной патологии ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, 34 42; тел.: 8-904-5425823; e-mail: umn100@yandex.ru.

Ответственный за переписку: Усевич Вера Михайловна, кандидат ветеринарных наук, доцент, доцент кафедры инфекционной и незаразной патологии ФГБОУ ВО «Уральский государственный аграрный университет»; 620075, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, 42; тел.: 8-904-5425225; e-mail: vus5@yandex.ru.


http://vetkuban.com/num1_202309.html