Отдельные показатели иммунологического статуса при эстрозе у овец и опыт применения препаратов иммунологической коррекции

Балега А.А., Лысенко И.О., Толоконников В.П. Ставропольский
государственный аграрный университет, г. Ставрополь

Введение. Иммунный ответ, в биологическом отношении, направлен на защиту организма от генетически чужерод­ной информации и представляет собой сложный многоком­понентный процесс. Изучение иммунитета и механизмов его фор­мирования на различных стадиях развития паразитарных болезней сельскохозяйственных животных представляет собой перспективное направление [1].

Многие вопросы иммунного ответа при эстрозе овец остаются недостаточно изученными. В доступной нам зарубежной и отечествен­ной литературе мы анализировали лишь два сообщения Марченко и др. [2, 3], в которых отражены данные динамики иммуноглобулинов и Т-клеточного ответа при эстрозе овец.

Цель и задачи. Комплексная оценка Т и В-систем иммунитета при эстрозе овец, изучение кинетики иммуноглобулинов М и G, цир­кулирующих иммунных комплексов, исследование иммунокоррегирущих свойств левамизола и диметилсульфоксида.

Материалы и методы исследований. Оценку Т- и В-клеточного иммунитета, динамики иммуноглобуливов М и G классов, циркулирующих иммунных комплексов (ЦНК) в опыте наблюдали у 15 овец, разде­ленных на 3 группы (по 5 голов в каждой группе).

Животные первой группы были представлены валухами 3-х лет­него возраста, второй и третьей - ягнятами текущего года рождения. Всех животных до начала лета имаго O. ovis обработали препаратами широкого спектра действия и разместили в условия, исключающие их спонтанное заражение личинками овечьего овода. Спустя сорок суток провели экспериментальное заражение животных первой и второй групп личинками полостного овода в дозе 120 экземпляров на одно животное. Ягнята третьей группы служили контролем. Убой животных был осуществлен через 45 суток. Кровь для исследований у подопыт­ных животных брали до опыта и через 7, 14, 21, 30, 45 суток. Учитыва­ли абсолютное и относительное количество Т и В-лимфоцитов, динами­ку иммуноглобулинов М и G, циркулирующих иммунных комплексов.

Обработку животных препаратами проводили за 3 недели до появления в биотопе имаго овечьего овода. Использовали 15 ягнят текущего года рождения. Животных разделили на три группы (по пять в каждой группе). Ягнят первой группы обработали левамизолом из расчета 0,2 мг/кг живой массы. Препарат вводили ежедневно (одно­кратно) в течение трех суток, после чего делали трехдневный перерыв. По такой схеме левамизол вводили в течение 15 суток. Ягнят второй группы обрабатывали диметил-суфоксидом интраназально (однократ­но в течение 5 суток) трижды с интервалом в пять дней. ДМСО вводили в носовую полость в форме 5%-ного водного раствора в дозе 4 мл рас­твора на одно животное. Животных третьей группы не обрабатывали, они служили контролем. Обработанных животных выпустили в отару, где они содержались в идентичных условиях, что и необработанные овцы. За две недели до убоя животных подвергли экспериментальному заражению личинками овечьего овода в дозе 25-30 экземпляров на одно животное. По истечении указанного срока провели контрольный убой животных.

Результаты исследований. При оценке Т-клеточного иммунитета установили возрастание количества Т-лимфоцитов у овец первой груп­пы в течение первых 21 суток наблюдений. Достигнув максимума к 21-м суткам количество Т-лимфоцитов у животных этой группы снизилось до уровня исходных данных к 30-м суткам наблюдений. К 45-м сут­кам наблюдений этот показатель был несколько ниже уровня исходных данных. У ягнят второй группы, количество Т-лимфоцитов максимально возрастало к 30-м суткам опыта, после чего (к 45-м суткам) снижалось до значений уровня исходных данных (табл. 1).

Таблица 1. Отдельные иммунобиологические показатели крови у овец при экспериментальном эстрозе

Дни исследований

N° группы животных

Лимфоциты

ЦИК

Иммуноглобулины мг/мл

Т

В

опт. Пл

М

G

%

л/мкл

%

л/мкл

До опыта

1

28.1±1,2

1613±1,01

18,5±3,1

11215±3,3

85.3±0,4

1,2±0,1

23,8±0.3

2

29,3±0,3

1711±7,1

9,5±0,9

615±2,7

72,0±0,3

0,83±0,2

16,1±0,2

3

25.2±0,1

1594±3,2

10,0±1,1

656±0.8

71,1±0,2

0.81±0,1

18.2±0,1

 

Через 7 суток

1

30,3±0,3

1771±5,4

28,7±2,5

2340±0,4

98.8±0.2

1,8±0,2

25,7±0.2

2

28,7±1,4

1765±2,4

10,4±1,5

647±1,7

74,4±0,3

1,1±0,1

18,8±0,3

3

25,5±0.3

1603±3,1

9.4±0,3

606±0.9

70,8±0,1

0,93±0,3

18,5±0,1

 

14

1

33,7±0,2

1811±1,4

20,3±1.7

1375±0,9

89,9±0.4

1,5±0,1

26,0±0.4

2

30.4±0,3

1756±2,2

12.8±0,8

715±2,3

75,6±0.1

1,2±0,1

20.4±0.3

3

24,9±0,4

1599±1.7

11,0±0,4

733±0,7

72,3±0,2

0,82±0,2

19,0±0,2

 

21

1

38,3±0,7

2654±1,3

21,4±1,3

1394±1,1

90,5±0,6

1,6±0,3

26,4±0,6

2

31,1±1,4

1833±4,3

16,4±0,9

948±1,9

74,3±0,2

1,1±0,2

19,5±0,2

3

26,0±1.9

1580±6,0

10,5±0,1

652±0,3

70,0±0,1

0,70±0,1

17,3±0,1

 

30

1

28,7±1,4

1626±3,3

29.3±1.5

2406±3.3

99,1±0,3

1.4±0,2

31,3±0,3

2

35,5±0,1

2231±2,4

16,5±2,7

976±2,3

80,0±0,4

1.0±0,1

22,4±0,1

3

25,1±0,3

1603± 3,6

11,4±0,9

740±0,8

65,4±0,3

0,81±0,1

18,1±0,3

 

45

1

273±0.1

1515±3,7

27,3±2,6

1580±6.4

98.7±0,5

1.6±0.4

33.3±0,4

2

30,3±0,4

1766±6,1

15,3±0,8

954±2.0

75,1±0,2

1,1±0,1

21,2±0,2

3

25,5±0,3

1610±2,2

10,5±0,1

670±0.4

68,9±0,1

0,82±0,3

18,6±0,1

Оценивая активность В-системы иммунитета, следует отметить, что ее активации предшествовало появление антител в периферичес­кой крови. У овец первой группы возрастание количества В-лимфоци-тов было отмечено на 7-ые и 30-ые сутки. У животных второй группы на 21-30 сутки наблюдений.

Содержание Ig M у овец первой группы варьировало в пределах 1,2±0,1 - 1,8±0,2 мг/мл с максимальным подъемом через 7 суток пос­ле заражения овец личинками полостного овода. У животных второй группы диапазон колебаний Ig М отмечен в пределах 0,83±0,2-I,2±0,I мг/мл. Максимальный рост показателя регистрировали на 14 сутки. Уровень Ig М возрастал у животных обеих групп к 30-м суткам наблюдений. У овец первой группы с 23,8±0,3 до 31,3±0,3, у животных второй группы с 16,1±0,2 до 22,4±0,1 мг/мл.

Содержание ЦИК увеличивалось у животных первой группы к 7-мым и 30-м суткам. У ягнят второй группы максималь­ные значения показателя были отмечены к 30-м суткам наблюдений.

Таблица 2. Опосредованные показатели эффективности левамизола и диметилсульфоксида при эстрозе овец

Препарат, название

Метод обработки

Объем введения

И.И., экз./гол

Э.И., %

Левамизол

п\кожно

2 мг/кг

9,3

100

ДМСО

интраназально

4 мл/гол

12,5

100

Контроль

-

-

14,3

100

В процессе исследований устано­вили, что у овец, инвазированных ли­чинками O. Ovis, происходит активация Т и В-систем иммунитета. У подопытных животных возрастали концентрации им­муноглобулинов М, G и классов и содер­жание циркулирующих иммунных комп­лексов. Максимальный рост исследуемых показателей регистрировали на 21-30 сутки наблюдений, т.е. в период, который соответствует развитию второй и треть­ей стадий личинок овечьего овода. При вскрытии голов животных установили, что интенсивность оводовой инвазии у овец первой группы составляла 3,4+0,2, у второй 5,6±0,3 экземпляров личинок на одно животное.

Одной из задач наших исследова­ний было изучение иммунокоррегирущих свойств левамизола и диметилсульфоксида. Известно, что левамизол - левовращающий изомер тетрамизола, его действие на систему иммунитета близко к эффектам тимусных препаратов, в ветеринарной практике используется в качестве антгельминтика. Действует на различные фермен­тные системы, стимулирует созревание Т-лимфоцитов, способствует увеличению их количества, усиливает функции Т-эффекторов. Как антгельминтик, левамизол является высокоэффективным, широкого спектра действия средством, подходящим как для профилактических, так и терапевтических дегельминтизации овец и животных других ви­дов. Левамизол представляет собой активное противопаразитарное средство для лечения от легочных и желудочно-кишечных паразитов, причем одной дозы достаточно, чтобы уничтожить взрослые и незре­лые формы паразитов. Будучи а -изомером тетрамизола, он обладает 100%-ной активностью, более высокими антгельминтными свойства­ми, а его токсичность значительно ниже, чем у тетрамизола. Животные хорошо переносят левамизол. Парентеральное введение препарата безвредно для овец и является удобной формой применения. Левамизол можно назначать в сочетании с другими препаратами. Его приме­нение разрешено беременным и лактирующим животным.

Разработанная нами схема использования левамизола в качест­ве иммуномодулятора при эстрозе овец была применена впервые.

Диметилсульфоксид является иммуномодулятором с регулиру­ющим действием, обладает выраженным противовоспалительными свойствами. Способствует некоторому снижению активности нейтрофилов и лимфоцитов, угнетает развитие аллергической реакции, фор­мирование отека ткани. Это универсальный растворитель и хороший проводник лекарственных препаратов при накожных аппликациях и ингаляциях в виде 2-20%-ных растворов. Как иммуномодулятор при эстрозе овец использован впервые.

Установили, что экстенсивность оводовой инвазии у животных всех подопытных групп составляла 100%. Интенсивность инвазии у ягнят, обработанных левамизолом была, в сравнении с контрольной группой, ниже на 34,97%, а у животных с интраназальным орошением носовой полости 5%-ным раствором ДМСО - на 12,6%.

Выводы

  1. Приведенные данные иммунобиологической реактивности у овец и выживаемости личинок при экспериментальном эстрозе ука­зывают на обстоятельство формирования более выраженного иммунного ответа у взрослых животных, в сравнении с ягнятами текущего года рождения.
  2. Полученные данные свидетельствуют о возможности умерен­ного иммунокоррегирующего воздействия левамизола и ДМСО на ор­ганизм овец, инвази-рованных личинками 0. ovis. Исследования в этом направлении являются весьма пер­спективными, их выполнение следует осуществлять на основе изуче­ния динамики иммунологического статуса обработанных иммуномодуляторами животных.

Список литературы

  1. Даугалиева Э. Х. Иммунный статус и пути его коррекции при гельминтозах / Э. Х. Даугалиева, Филиппов В. В. - М.: Агропромиздат,1991. - 187 с.
  2. Марченко В. П., Кинетика специфических сывороточных ан­тител у овец, инвазированных личинками овечьего овода / В. П. Мар­ченко, В.А. Марченко, Е. С. Белоусов // Паразитология. - 1991. - Т. 25,вып.4. - С. 297-304.
  3. Марченко В.А. Т-клеточный ответ при паразитировании личи­нок овечьего овода /В.А. Марченко, В.П. Марченко //Паразитология.- 1994. - Т. 28, вып. 2. - С.156-166.

Реферат

Выполнена комплексная оценка Т- и В-систем иммунитета при эстрозе овец. Изучена кинетика иммуноглобулинов М- и G- классов, циркулирующих иммунных комплексов. Проведены исследования иммунокоррегирущих свойств левамизола и диметилсульфоксида (ДМСО). Установлено умеренное иммунокоррегирующее воздействие левамизола и ДМСО на организм овец, инвазированных личинками овечьего овода (Oestrus ovis).

Ключевые слова: эстроз овец, иммунологический статус, имму­нологическая коррекция, диметилсульфоксид, лимфоциты, левамизол.

UDC [619:616.995.773.4+619:615.37]:636.32/.38

SPECIFIC INDICES OF IMMUNE STATUS AT OESTROSIS OF SHEEP AND EXPERIENCE IN APPLICATION OF PREPARATIONS OF IMMUNOLOGICAL CORRECTION

Balega A.A., Lysenko I.O., Tolokonnikov V.P.

Summary

The complete estimation of the T- and B- systems of immunity at sheep aestrosis has been performed. The immunoglobulin kinetics of M- and G- classes, circulating immune complexes has been studied. The research of the immunocorrigating properties of levamisole and dimethylsulfoxide has been carried out. It has been determined a moderate immunocorregating affect of levamisole and dimethylsulfoxide on sheep organism invased by cleg larva (Oestrus ovis).

Key words: sheep aestrosis, immunological status, immunological correction, dimethylsulfoxide, lymphocytes, levamisole.

About the authors

Tolokonnikov Vasiliy P., the chief of department of parazitology and vet. sanitary examination of StSAU, D. Sc. in Veterinary Medicine, professor, mobile tel.8 (962) 453-40-21; 24/17, Pushkina str., Stavropol, 355017; e-mail w.tol@mail.ru

Lysenko Izolda O., the chief of department of ecology and landscape building of SGAU, D. Sc. in Biology, docent, mobile tel. 8 (905) 49-74­507; 156/19, Kulakova str., Stavropol, 355044; e-mail: lysenkostav@ yandex.ru

Responsible for correspondence with the editorial board: Balega Anna A., post-graduate of the department of parazitology and vet. sanitary examination; mobile phone 8-928-39-32-746.

Сведения об авторах

Лысенко Изольда Олеговна, заведующая кафедрой экологии и ландшафтного строительства СтГАУ, доктор биологических наук, доцент моб. 8 905 49 74 507; 355044, г.Ставрополь, пр.Кулакова д.19, кв.156; e-mail: lysenkostav@yandex.ru

Толоконников Василий Петрович, заведующий кафедрой парази­тологии и ветеринарно-санитарной экспертизы СтГАУ, доктор ветери­нарных наук, профессор, моб. 8 962 45 34 021; 355017, г. Ставро­поль, ул. Пушкина 14, кв. 28; e-mail: w.tol@mail.ru.

Ответственный за переписку с редакцией: Балега Анна Алек­сандровна, аспирантка кафедры паразитологии и ветсанэкспертизы СтГАУ, моб. 8 928 39 32 746

http://vetkuban.com/num1_20115.html